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苯酚加氯仿在氢氧化钠水溶液中反应生成什么

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2022-12-21 21:08:17

苯酚加氯仿在氢氧化钠水溶液中反应生成什么

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2025-12-05 09:36:36

西亚试剂由苯酚和氯仿在氢氧化钠溶液中反应而得。改进的制法是用邻甲苯酚为原料,光气化、氯化后进行水解,即获得水杨醛。

氯苯在氢氧化钠溶液中水解得到苯酚——这个属于卤代烃的碱性水解;

苯酚再和氢氧化钠溶液反应得到苯酚钠——苯酚属于酸,又叫石炭酸,酸碱中和反应;

注意:氯苯在氢氧化钠水溶液中很难水解生成苯酚,条件是加热。

扩展资料:

可吸收空气中水分并液化。有特殊臭味,极稀的溶液有甜味。腐蚀性极强。化学反应能力强。与醛、酮反应生成酚醛树脂、双酚A,与醋酐;水杨酸反应生成醋酸苯酯、水杨酸酯。还可进行卤代、加氢、氧化、烷基化、羧基化、酯化、醚化等反应。

苯酚在通常温度下是固体,与钠不能顺利发生反应,如果采用加热熔化苯酚,再加入金属钠的方法进行实验,苯酚易被还原,在加热时苯酚颜色发生变化而影响实验效果。

参考资料来源:百度百科-苯酚

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2025-12-05 09:36:36

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

使用苯酚抽提细胞

DNA

时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了

DNase

的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与

DNA

联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而

DNA

溶于水相。

氯仿的作用是克服酚的缺点加速有机相与液相分层。

最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。

(酚易溶于氯仿中)

用酚-氯仿抽提细胞基因组

DNA

时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡

产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含

DNA

的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

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2025-12-05 09:36:36

苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA 的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,核蛋白变性降解,使DNA从核蛋白中游离出来。

DNA易溶于水,不溶于有机溶剂。蛋白质分子表面带有亲水基团,也容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能顺利地进入到水溶液中形成稳定的胶体溶液。当有机溶液存在时,蛋白质的这种胶体稳定性遭到破坏,变性沉淀。

离心后有机溶剂在试管底层(有机相),DNA存在于上层水相中,蛋白质则沉淀于两相之间。酚–氯仿抽提的作用是除去未消化的蛋白质。氯仿的作用是有助于水相与有机相分离和除去DNA溶液中的酚。抽提后的DNA溶液用2倍体积的无水乙醇在NaCl存在下沉淀DNA,回收DNA用70%乙醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥,用TE缓冲液溶解DNA备用。

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2025-12-05 09:36:36

通常,氯仿与异戊基发酵的比例为24:1。 苯酚,氯仿和异戊醇的比例也可以按25:24:1的比例使用。

提取DNA时,为了均匀混合,必须将容器摇动几次,并且在混合溶液中容易产生气泡,并且气泡会阻止相互作用。 异戊醇的添加降低了分子的表面张力,因此减少了萃取过程中泡沫的产生。

扩展资料

酚:氯仿:异戊醇试剂是由水饱和酚、氯仿和异戊醇按125:24:1 的体积比混合而成的,主要用于RNA的提取等试验。苯酚使蛋白质变性,同时抑制了 RNase 的降解作用。

氯仿抽提加速有机相与液相分层,去除核酸溶液中的迹量酚。异戊醇减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。使用酚:氯仿:异戊醇抽提离心后的上层为含 RNA 的水相、中间为变性蛋白与 DNA,下层为有机溶剂相。静置后产品有分层现象,使用时将产品摇匀后用移液器吸取即可。

注意事项:酚:氯仿:异戊醇试剂有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。

参考资料来源:百度百科-苯酚

参考资料来源:百度百科-氯仿

参考资料来源:百度百科-异戊醇