食用油中的饱和脂肪酸其化学成分就是乙醇

A.1 范围

本方法规定了玉米储存品质判定。

A.2 原理

在室温下无水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用标准氢氧化钾溶液滴定，计算脂肪酸值。

A.3 试剂和材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

A.3.1 无水乙醇。

A.3.2 酚酞—乙醇溶液（10g/L）1.0g酚酞溶于100mL95%（V/V）乙醇。

A.3.3 不含二氧化碳的蒸馏水：将蒸馏水烧沸，加盖冷却。

A.3.4 c(KOH)=0.01mol/L氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液。

A.3.4.1 c(KOH)=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的配置

称取28g氢氧化钾，置于聚乙烯容器中，先加入少量无CO2的蒸馏水（约20ml）溶解，再将其稀释至1000ml，密闭放置24h.吸取上层清液至另一聚乙烯塑料瓶中。

A.3.4.2 c（KOH）=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的标定

称取在105℃烘2h并在干燥器中冷却后的邻苯二钾酸清钾2.04g，精确到0.0001g，溶于50ml不含CO2蒸馏水中，滴加酚酞-乙醇指示剂（A3.2）3～5滴，用配制的氢氧化钾标准储备液滴定至微红色，以30s不褪色为终点，记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数（V1），同时做空白试验（不加邻苯二钾酸氢钾,同上操作），记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数（V0）,按式计算氢氧化钾标准储备液浓度。

100×m

c(KOH)= —————————…………………. (1)

(V1-V0) ×204.22

式（1）中：

c(KOH)—氢氧化钾标准储备液浓度，mol/L

1000—换算系数：

m—称取邻苯二甲酸氢加的质量，g；

V1—滴定所耗情氧化钾标准储备液体积，ml

V0—空白试验所耗氢氧化钾标准液体积，ml

204.22—邻苯二钾酸氢钾的摩尔质量g/mol.

注：氢氧化钾标准储备液按要求定时复标。

A.3.4.3 c（KOH）=0.01mol/L氢氧化钾-95%乙醇标准滴定溶液

准确移取20.0ml/L氢氧化钾标准储备液，用95%（V/V）乙醇稀释定容至1000ml,盛放于聚乙烯塑料瓶中。临用前稀释。

注：稀释用乙醇应事先调整为中性。

A.4 仪器与设备

A.4.1 具塞磨口锥形瓶：250ml.

A.4.2 移液管：50.0ml、25.0ml.

A.4.3 微量滴定管：5ml，最小刻度为0.02ml: 10ml，最小刻度为0.05ml.

A.4.4 天平：感量为0.01g以上。

A.4.5 振荡器：往返式，震荡频率为100次/min.

A.4.6 粉碎机：锤式旋风磨，具有风门可调和自清理功能，以避免样品残留和出样管堵塞。在粉碎样品时，磨膛不能发热。

A.4.7 电动粉筛：按GB/T 5507要求。

A.4.8 玻璃短颈漏斗。

A.4.9 中速定性滤纸。

A.4.10 锥形瓶：150ml.

A.5 试样制备

取混合均匀样品约80~100g，用锤式旋风磨粉碎，要求粉碎细度能一次性达95%以上过CQ16（相当于40目）筛，粉碎样品充分混合后（筛上、筛下的全部筛分范围样品）装入磨口瓶中备用。

注：1：按GB/T 5507检验样品粉碎细度，使用其它类型粉碎机可以达到细度要求，粉碎样品也只能选用锤式旋风磨。一次粉碎达不到细度要求的，该锤式旋风磨不能使用。

注：2：粉碎样品时，应按照设备说明书要求，合理调节风门大小，并控制进样量，防止和减少出料管留存样品，未必免出料管堵塞，减少磨膛发热，引起样品中脂肪酸值的变化，每粉碎10个样品应将出料管拆下清理。

注：3：制备耗的样品应尽快完成测定，如需较长时间存放，应存放在冰箱中，全部过程不得超过24h。

A.6 分析步骤

A.6.1 试样处理

称取制备试样约10g，精确到0.01g，于250ml具塞磨口锥形瓶中，并用移液管准确加入50.0ml无水乙醇（A3.1）置往返式震荡器上振摇30min,震荡频率为100次/min。静置1~2min，在玻璃漏斗中放入折叠式的滤纸过滤，并加盖滤纸。弃去最初几滴滤液，收集滤液25ml以上。

A.6.2 测定

精确移取25.0ml滤液于150ml锥形瓶中，加50ml不含CO2的蒸馏水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示剂后，用0.01mol/L的氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液（A3.4.3）滴定至呈微红色，30s不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾—95%乙醇溶液体积（V1）。

注：样品提取后一定要及时滴定；滴定应在散射阳光或日光型日光灯下对着光源方向进行；提取液颜色较深，滴定终点不易判定时，可用一已加入去CO2蒸馏水后尚未滴定的提取液作参照，当被滴定液颜色与参照相比有色差时，即可视为已到滴定终点。若上述参照比色法，仍无法准确判定滴定终点时，可在滤纸锥头放入0.5g粉末活性炭，褪色后滴定。

A.6.3 空白试验

取25.0ml无水乙醇于150ml锥形瓶中，加50ml不含CO2的蒸馏水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示剂，用0.01mol/L的氢氧化钾—95%乙醇溶液滴定至成微红色，30s不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾—95%乙醇溶液体积（V0）.

A.7 结果的计算和表述

A.7.1 脂肪酸值已中和100g干物质试样中游离脂肪酸值所需氢氧化钾毫克数表示。按式（2）计算：

50100

脂肪酸酯（KOHmg/100g干基）=（V1—V0）×56.1×———×—————×100

25m(100—ω)

11220×（V1—V0）×C 100

=————————————×—————……….（2）

m100—ω

式（2）中：

V1——滴定试样所耗氢氧化钾—95%乙醇溶液体积，mL；

V0——滴定空白所耗氢氧化钾—95%乙醇溶液体积，mL；

C——氢氧化钾-95%乙醇溶液的准确浓度，mol/L；

50——提取式样用无水乙醇的体积，mL；

25——用于滴定的滤液的体积，mL；

100——换算为100g（干）试样的质量，g；

m——试样的质量，g；

ω——试样水百分数，即每100g试样中含水分的质量，g；

注：用测定脂肪酸值的同一粉碎样品，按GB/T 5497中105℃恒重法测定样品水分含量，计算脂肪酸值干基结果。此水分含量结果不得作为样品水分含量结果报告。

A.7.2 结果表示

每份试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，计算结果保留小数点最后一位数。

A.8 重复性

同一分析者对同一试样同时进行两次测定，结果差值不超过2mgKOH/100g.

可以发生酯化反：在浓硫酸催化下，以高级饱和脂肪酸与无水酒精为原料，可合成高级脂肪酸乙酯。据查《广东化工》2006年 33卷 4期 起止页码：34-36,42（Guangdong Chemical Industry ，国际标准刊号：ISSN 1007-1865国内统一刊号：CN 44-1238），广西大学化学化工学院的叶少峰、谭国进教授进行过硬脂酸乙酯的合成研究，做过正交试验，考察了醇酸的量比、反应时间及反应温度对合成硬脂酸乙酯的影响，实验结果表明：醇酸的量比为12:7、反应时间为6hr及反应温度为80℃是最佳反应条件。

脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比较简单，而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类：饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。 通式：

C3H5(OOCR)3.

其中R表示脂肪链

在加热条件下与乙醇可以发生酯交换反应：

C3H5(OOCR)3 + 3CH3CH2OH —〉

C3H5(OH)3 (甘油）+ 3RCOOCH2CH3.

酒精是生物实验中常用的试剂之一，它在生物实验中有多种作用，而不同浓度的酒精其作用也有所不同。现列举不同浓度的酒精在高中生物实验中的应用如下。 1 体积分数为50%的酒精 1.1 作用 洗去浮色。 1.2 原理 苏丹Ⅲ是弱酸性染料，易溶于体积分数为50%酒精。 1.3 应用 脂肪的鉴定实验。在该实验中，用苏丹Ⅲ对花生子叶薄片染色后，在薄片上滴1～2滴体积分数为50%的酒精溶液，可以洗去被染玻片标本上的苏丹Ⅲ染液浮色。 2 体积分数为95%的酒精 2.1 作用 ① 解离； ② 析出提取含杂质较少的DNA。 2.2 原理 ① 解离原理：用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精1∶1混合，能使组织中的细胞相互分离开来； ② 析出提取含杂质较少的DNA的原理：DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。 2.3 应用 ① 观察植物细胞的有丝分裂； ② DNA的粗提取与鉴定。 3 体积分数为75%的酒精 3.1 作用 消毒杀菌。 3.2 原理 体积分数为75%的酒精，能够顺利地渗入到细菌体内，吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能，以达到消毒杀菌的目的。高于体积分数为75%浓度的酒精与细菌接触时，就可能使得菌体表面迅速凝固，形成一层薄膜，阻止了酒精继续向菌体内部渗透，待到适当时机，薄膜内的细胞可能将薄膜冲破而重新复活。在此高浓度下，酒精迅速凝固蛋白质的作用往往随着其浓度升高而增强，因此，其消毒杀菌的效果也就越差。若酒精的浓度低于75％，也因不能顺利地渗入到细菌体内而彻底杀死细菌。如果使用体积分数为75％的酒精，既能使组成细菌的蛋白质凝固，又不能形成薄膜，这样，酒精可继续向内部渗透，从而达到较好的消毒效果。值得注意的是，体积分数为75%的酒精溶液的杀菌能力不是绝对很强，它对芽孢就不起作用。 3.3 应用 学习微生物的培养技术。在接种开始时，待用肥皂将双手洗干净后，再用体积分数为75%的酒精棉球擦拭双手，然后在进行接种操作。 4 无水酒精 4.1 作用 提取色素。 4.2 原理 叶绿体中的各种色素均是有机物，能溶解在有机溶剂中，各色素在无水酒精中的溶解度较大，且酒精无毒，方便操作。 4.3 应用 叶绿体中色素的提取与分离。 5 工业酒精（一般是体积分数为95%的酒精） 5.1 作用 燃烧加热。 5.2 原理 酒精是富含能量的有机物，燃烧能产生大量的热量。 5.3 应用 此处包括各类必须加热的实验，如生物组织中还原糖的鉴定、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取与鉴定、温度对酶活性的影响、学习微生物培养的基本技术、自身固氮菌的分离等实验。