饱和硫酸铵溶液浓度是多少

硫酸铵饱和度表，通常包括25度和0度两种，要根据实验温度选择相应的表。

表中横轴是初浓度，纵轴是终浓度，中间是100ml溶液需加入的固体硫酸铵克数，查找从初浓度到终浓度应加入的克数，再根据你的溶液体积计算。

比如，0度，从0到40%是22.6

g/100ml，那么10ml溶液加2.26克硫酸铵粉末就行。

1、硫酸铵浓度的计算就根据硫酸铵饱和度表来计算，比如60%的硫酸铵就是指体系中硫酸铵的浓度达到同温度下硫酸铵饱和浓度的60%，这个和硫酸铵的摩尔浓度没有关系。

2、直接根据饱和度表在蛋白溶液中加入适当重量的固体硫酸铵即可。

3、硫酸铵的饱和度随着温度有少许变化：

0度时，每升水可以溶解706.96克硫酸铵（此时重量百分比为41.42%,摩尔浓度为5.35 mol/L，比重1.2428g/cm3）。

25度时，每升水可以溶解769.05克硫酸铵（此时重量百分比为43.46%,摩尔浓度为5.82 mol/L，比重1.2449g/cm3）

至于从某一硫酸铵浓度调节到另一浓度，许多生化手册可以查到表，免去自己计算可能的不准确。

例如：《生物化学制备技术》苏拔贤主编（科学出版社），第58页、59页两个表分别为在25度和0度进行硫酸铵沉淀的表。

饱和度是可以查到。可我现在急求的是已知硫酸铵饱和度或溶质的质量分数得到硫酸铵溶液的密度。或者反过来，已知硫酸铵溶液的密度求其饱和度。现在没有条件作试验，只能靠分析推导，不知可否有办法。

25度时饱和硫酸铵溶液的摩尔浓度我记得是4.1mol/L，是将767g硫酸铵溶于一升水得到。由此可以计算密度：（1000+767）/(767/132.13/4.1*1000) = 1.248g/mL。其他饱和度的密度计算也可以依此类推

一，基本原理

硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。

二，试剂及仪器

1.组织培养上清液、血清样品或腹水等

2.硫酸铵（NH4）SO4

3.饱和硫酸铵溶液（SAS）

4.蒸馏水

5.PBS(含0.2g/L叠氮钠)

6.透析袋

7.超速离心机

8.pH计

9.磁力搅拌器

三，操作步骤

以腹水或组织培养上清液为例来介绍抗体的硫酸铵沉淀。各种不同的免疫球蛋白盐析所需硫酸铵的饱和度也不完全相同。通常用来分离抗体的硫酸铵饱和度为33%—50%。

（一）配制饱和硫酸铵溶液（SAS）

1.将767g（NH4）2SO4边搅拌边慢慢加到1升蒸馏水中。用氨水或硫酸调到硫酸pH7.0。此即饱和度为100%的硫酸铵溶液（4.1mol/L,25°C）.

2.其它不同饱和度铵溶液的配制

（二）沉淀

1.样品（如腹水）20000′g离心30min，除去细胞碎片；

2.保留上清液并测量体积；

3.边搅拌边慢慢加入等体积的SAS到上清液中，终浓度为1：1（

4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6小时或搅拌过夜（4°C），使蛋白质充分沉淀。

（三）透析

1.蛋白质溶液10000′g离心30min（4°C）。弃上清保留沉淀；

2.将沉淀溶于少量（10-20ml）PBS-0.2g/L叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋对

PBS-0.2g/L叠氮钠透析24-48小时（4°C），每隔3-6小时换透析缓冲液一次，以彻底除去硫酸氨；

3.透析液离心，测定上清液中蛋白质含量。

四，应用提示

（一）先用较低浓度的硫酸氨预沉淀，除去样品中的杂蛋白。

1.边搅拌边慢慢加SAS到样品溶液中，使浓度为0.5:1(v/v)；

2.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6小时或过夜（4°C）；3.3000′g离心30min（4°C），保留上清液；上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨；

4.上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨；

5.杂蛋白与欲纯化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差别很大时，用预沉淀除杂蛋白是非常有效

（二）为避免体积过大，可用固体硫酸氨进行盐析（硫酸氨用量参考表1）；硫酸氨沉淀法与层析技术结合使用，可得到更进一步纯化的抗体。