如何用核磁共振氢谱鉴别丙酸甲酯与乙酸乙酯

有以下几个：

1、2980到2850cm到为甲基、亚甲基碳氢键CH伸缩振动产生的吸收峰。

2、1742cm，为羰基C等于0伸缩振动产生的吸收峰。

3、1374cm是甲基的CH弯曲振动产生的吸收峰。

4、1240cm，1047cm为C，O，C伸缩振动产生的吸收峰。

乙酸乙酯与丙酸甲酯二者氢谱各个峰裂分情况一致,化学位移很相似,不容易区别。

丙酸甲酯的三氢单峰化学位移在3-4之间，而乙酸乙酯的三氢单峰在2-3之间，有较多的重合。

核磁共振氢谱原理：

氢原子具有磁性，如电磁波照射氢原子核，它能通过共振吸收电磁波能量，发生跃迁。用核磁共振仪可以记录到有关信号，处在不同环境中的氢原子因产生共振时吸收电磁波的频率不同，在图谱上出现的位置也不同，各种氢原子的这种差异被称为化学位移。利用化学位移，峰面积和积分值以及耦合常数等信息，进而推测其在碳骨架上的位置。

在核磁共振氢谱图中，特征峰的数目反映了有机分子中氢原子化学环境的种类；不同特征峰的强度比（及特征峰的高度比）反映了不同化学环境氢原子的数目比。

乙酰乙酸乙酯在常温下有8%左右的烯醇式，92%是酮式，因此应该有两个主峰。

乙酰乙酸乙酯本身是含有羰基的，可以和羰基试剂作用。另外乙酰乙酸乙酯在水中可以和水形成烯醇结构，这种烯醇和苯酚的性质相似，所以也可以像苯酚一样，和氯化铁显色。

通过观察上述三种物质的分子式，通过观察发现，三种物质的H是不一样的。

所以，可以通过红外光谱配合核磁共振氢谱（HNMR）检验最快。

核磁共振鉴别：

三个物质的核磁图谱，可以看出，分别会出现如下情况：

HCOCH2COOCH2CH3有4个峰，比例分别为1:2:2:3

CH3COCH2COOCH2CH3有4个峰，比例分别为3:2:2:3

CH3COOCH2CH3有3个峰，比例分别为3:2:3

上述的图谱中都会出现一个四重峰，与鉴别不大相关。

只要通过计算图谱中的积分曲线得到的比例，就可以区分。

红外光谱鉴别：

通过红外光谱也可以鉴别，会发现3者都存在一个酯基的吸收峰

不同之处在于：

HCOCH2COOCH2CH3、CH3COCH2COOCH2CH3

2个都多一个C=O的伸缩振动吸收峰（1600Cm-1到1700CM-1左右），

而CH3COOCH2CH3没有。

①这样可以鉴别出CH3COOCH2CH3

②剩下的两个，发现CH3COCH2COOCH2CH3大约在1380Cm-1处存在一个吸收峰，

证明为孤立甲基。这样这可以鉴别CH3COCH2COOCH2CH3。

③最后剩下的那个就是HCOCH2COOCH2CH3。

在HPLC分析中，在色谱柱正常，样品浓度适宜，分析方法合适，色谱峰在出峰时间较短的条件下，峰型应对称而尖锐。但在实际操作中，如果对样品不了解，前处理不恰当或者分析方法不合理等，会出现峰形不正常的情况，其中双峰现象就是液相色谱中常见的问题之一。色谱双峰指的是明明是同一种物质，但在色谱图中却呈现双峰，让实验人员误认为含有两种物质。

出现色谱双峰的原因一般有以下几种：

色谱柱

如果在样品分析时发现每个色谱峰都有双峰出现，尤其在采用单一纯物质时，则可以确定是色谱柱出现问题了，一般是柱头受损或者柱头固定相污染引起的。

如果进样量少，原来色谱柱正常，色谱峰的形状多为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下就行了。当然不反冲，正冲有时也会正常的。

如果峰拖尾，双峰强弱相差不大，柱头固定相变脏或流失可能性更大，这时可以将进样头拧开，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分填料，重新填上新填料拧紧，不过这个对技术要求较高且不能经常做，否则用不了几次，色谱柱就会应柱效降低而报废。

如果上述不能解决问题，可能是柱塌陷造成的，此时需要更换色谱柱。

溶剂问题

目前HPLC分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解，最佳的溶解方法是用流动相溶解。在实际分析中，有时候为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液，缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化，从而产生双峰现象。此时需要更换缓冲液，调整溶剂pH值，或者用流动相配置样品。

此外，样品要现配现用，避免样品溶解液的有机相比例、pH值发生变化而导致的溶剂效应。

进样量

当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主时，如果样品进样量大，如定量管为20ul，此时单一的纯物质会出现双峰，第二峰比第一峰小(每次都不太一样)，且拖尾，保留时间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的，此情况下需要减少进样量。

另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾(如果出峰很快，也可能是色谱柱问题)。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。

pH值

体系pH值对色谱双峰的影响出现在各个环节上(前面已经提到)，尤其在缓冲液流动相平衡过程中其影响更为明显。当连续进样时，受pH的连续变化影响会经常遇到这种双峰的情况。另外，在样品分析时，流动相的pH尽量远离被分析物的等电点，否则也容易引起双峰的产生。在用离子对试剂分析时，选择不好条件也会容易引起双峰的产生。

样品特性

有些样品由于其化学结构的特点，存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，而是以一个动态平衡存在。在色谱分析时，在一个特定的条件下(如pH值、流动相极性、温度等)，一种物质将出现双峰，双峰靠的很近，基本齐高，不拖尾，条件稍一变化，尤其pH，双峰现象将消失，如红霉素等。

有的样品紫外的色谱图上看不到双峰，但在LC-MS下，用质谱检测器，其质谱的总离子流图上较明显，如农药啶虫眯(吡虫清)。