脱蜡水化中二甲苯的作用

运用的原理是蜡的熔点低于水的熔点，等水还没烧开，蜡便会从布料上脱落于水中，溶于水中的蜡等待冷却，再加工便可循环使用。

免疫组化对标本处理最后的脱水透明需要采用由低至高的梯度酒精脱水，是避免直接将组织投入高浓度酒精中而造成组织过度收缩。脱蜡和水化的目的和原理不一样，但都是利用酒精既溶于水又溶于有机溶剂的特性。

组织脱水的目的是通过酒精的媒介让有机溶剂渗透入组织，再让石蜡置换有机溶剂，从而使组织包埋在石蜡中。而水化是组织切片经二甲苯脱蜡后，用酒精洗去二甲苯，所以必须从高浓度酒精开始，让后再利用酒精的媒介入水。

一、实验步骤：

（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS 洗涤3次。

（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。

（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。

（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。

（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。

（6）吹干或自然晾干细胞 爬片后，中性树胶封片。

若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。

二、注意事项：

1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2、切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。

3、切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。

4、在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。

5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

6、最后封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。

扩展资料

一、细胞核染色原理：

苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外。

使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

二、细胞浆染色原理：

细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。

当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

参考资料来源：百度百科-he染色

试 剂 ：10％福尔马林、酒精、二甲苯、固体石蜡、苏木精、酸水、氨水、酒精伊红染色剂型、加拿大树胶

（二）HE染色石蜡切片的制作过程

步骤一：取材与固定：

取动物新鲜组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。

步骤二：脱水透明：

一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。

步骤三：浸蜡包埋：

将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。

步骤四：切片与贴片：

将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。

步骤五：脱蜡

常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。

步骤六：染色

HE染色过程是：

①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。

②酸水及氨水中分色，各数秒钟。

③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。

④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。

⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。

步骤七：脱水透明：

染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。

步骤八：封固：

将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。

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随着家居装修观念的转变，现在越来越多的人比较看重 环保 ，所以在家居装修使用材料上都尽可能的使用实木 家具 、壁纸等一类相对较为环保的材料，在一定程度上甲醛等一类装修污染下降了，但二甲苯等一类污染却上升了，主要因为木器漆墙面漆壁纸等的大量运用，那 二甲苯是什么 ? 二甲苯的危害 有哪些呢？为了让朋友们引起重视，下面就对 二甲苯是什么 以及 二甲苯的危害 做个相关介绍，看完一定会让你受益匪浅哦！

二甲苯是什么?

中文名称：二甲苯

英文别名：Xylene ，Xylol ，Xylene mixture of isomer

二甲苯为无色透明液体是苯环上两个氢被甲基取代的产物，存在邻、间、对三种异构体，在工业上，二甲苯即指上述异构体的混合物。二甲苯具特臭、易燃，与乙醇、氯仿或乙醚能任意混合，在水中不溶。沸点为137～140℃。二甲苯毒性中等，也有一定致癌性。二甲苯的污染主要来自于合成纤维、塑料、燃料、橡胶，各种涂料的添加剂以及各种胶粘剂、防水材料中，还可来自燃料和烟叶的燃烧气等等。

二甲苯来源：

家居装修中二甲苯来源于溶剂、杀虫剂、聚酯纤维、胶带、粘合剂、 墙纸 、油漆、湿处理影印机、压板制成品和地毯等。

二甲苯污染症状：

二甲苯主要经呼吸道进入身体，对眼和上呼吸道有刺激作用，家居二甲苯污染会让人出现神经衰弱、皮炎、意识模糊等。

二甲苯的危害：

二甲苯具有中等毒性，可经呼吸道、皮肤及消化道吸收进入人的身体，对健康的影响远比苯小。若不慎口服了二甲苯或含有二甲苯溶剂时，即强烈刺激食道和胃，并引起呕吐，还可能引起血性肺炎，应立即饮入液体石蜡，延医诊治。

二甲苯蒸气对小鼠的LC为6000*10-6,大鼠经口最低致死量4000mg/kg。

二甲苯对眼及上呼吸道有刺激作用，高浓度时，对中枢系统有麻醉作用。

急性中毒：短期内吸入较高浓度本品可出现眼及上呼吸道明显刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、头痛、恶心、胸闷、四肢无力、意识模糊、步态蹒跚。重者可有躁动、抽搐或昏迷。有的有癔病样发作。

慢性影响：长期接触有神经衰弱综合症，女性有可能导致月经异常。皮肤接触常发生皮肤干燥、皲裂、皮炎。

二甲苯的用途：

二甲苯广泛用于涂料、树脂、染料、油墨等行业做溶剂用于医药、炸药、农药等行业做合成单体或溶剂也可作为高辛烷值汽油组分，是有机化工的重要原料。还可以用于去除车身的沥青医院病理科主要使用制剂主要用于脱水、脱蜡等。

工业邻二甲苯为原料,先用工业浓硫酸洗涤至酸层无色,再依次用10%氢氧化钠溶液、水洗涤至合格,分出水层后用无水氯化钙干燥,然后精馏,待馏出物清亮后,收集中间馏分,即为纯品。

如何避免家居二甲苯污染：

1、家具购置，要让商家提供正规合格的检测报告，有条件的，最好在使用前让家具在通风条件下多放置一段时间。

2、装修时间为一年以上且房间内并无明显异味，可选择生物降解法。比如在家中养殖芦荟、虎皮兰、吊兰、绿萝等植物，同时在天气条件允许下每日开窗通风一至两小时，可有效使室内污染物挥发。

3、要保证房间的通风率和采光率。

4、注意施工质量，防止不合理的施工程序或施工工艺影响污染物正常挥发扩散，造成室内环境污染。

5、居住时如明显感觉到室内有异味并伴有身体不良反应(眼睛流泪、呼吸不顺畅、皮肤红肿等)，经权威部门进行室内空气检测后各项数值超标，可选择专业的室内环境治理公司进行治理。

6、选择环保指标优越的装饰材料，注意向生产商或销售商索要检测报告。

7、家庭装修要尽量简约化。

8、严把装修验收关，装修结束后2~4周，请有专业资质的检测机构对室内环境进行检测。若检测结果超标，可采取相应治理手段，合格后再入住。

编辑总结：以上就是对二甲苯是什么，二甲苯的危害及用途做的详细介绍，希望能够引起大家的重视。家居装修中最担心的就是装修污染，这会对我们的身体造成伤害，二甲苯主要经呼吸道进入身体，而二甲苯广泛用于颜料、油漆等的稀释剂，所以在家居装修中的油漆等的选择上我们都要注意，避免家居二甲苯污染。