TRNZOL和TRIZOL是一样的,正确称呼为TRIZOL,是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。
TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。
扩展资料:
TRIZOL试剂 在破碎和溶解细胞时能保持样品中RNA的完整性,有效抑制RNA的降解。在加入氯仿离心后,溶液会形成水样层、中间层和有机层,RNA分布在水样层中,收集上面的水样层后,经异丙醇沉淀便可回收得到总RNA。
提取的总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组DNA,可直接用于Northern、点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RT-PCR、poly(A)+选择、RNA酶保护分析以及构建cDNA文库等多种分子生物学实验。此外,在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。
参考资料来源:
百度百科-TRIZOL
深情的芝麻
2025-06-27 11:48:13
TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。
1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。
2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。
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扩展资料:
使用TRIzol的注意事项:
1、在匀化后和加入氯仿之前,样品可以在_60—_70°C保存至少一个月。RNA沉淀(步骤4,RNA洗脱)溶于75%的乙醇在2—8°C至少可以保存一周,在_5—_20°C下至少可保存一年。
2、从少量的组织(1—10mg)或细胞(102—104)中分离RNA样品:往组织或细胞中加入800µlTRIZOL。待样品裂解后,加入氯仿并进行步骤2中的抽提操作。
3、台式离心机最大能达到2,600×g的离心力,如果将离心时间延长到30-60分钟可以满足步骤2和步骤3中的操作。
参考资料来源:/baike.baidu.com/item/TRIZOL"target="_blank">百度百科-TRIZOL
参考资料来源:/baike.baidu.com/item/苯酚/317273?fr=aladdin"target="_blank">百度百科-苯酚
甜蜜的煎蛋
2025-06-27 11:48:13
具体要看你的实验要求,一般是不需要的。
加800ul Trizol,样品裂解后加氯仿,分层,沉淀RNA前,加5-10ug RNase-free糖原,糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml时不会影响反转录cDNA第一链的合成,也不影响PCR反应。
RNA在Trizol试剂中不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150 ℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
用的天根的trizol,-80度冰箱的话至少存两三个月没问题,4度冰箱也能存几天。室温的话,放一个小时没什么问题,而且时间太短反而裂解不充分。
TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。
义气的帆布鞋
2025-06-27 11:48:13
巯基乙醇提取rna作用 Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。 同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到DNA。 Tris饱和酚的配置: 1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂 2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行) 3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层 4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相 5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0 6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存 7、如黄色消失或呈粉红色(说明酚已经被氧化),则不能使用 巯基乙醇提取rna作用机理 RNasin是一类从大鼠肝或人胎盘中提取出来的酸性糖蛋白质,鼠肝RNasin分子量为40KD;来源于人胎盘的RNasin分子量为51KD,等电点为4.7,最适pH为7~8。RNasin能与RNase非共价结合(Ki=3×1010)从而抑制了它们的活力,RNasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂。1mmol/L的二巯基乙醇对于RNasin的发挥抑制RNase的最大活性非常重要。 RNasin最好不要与某些蛋白质变性剂(如7mol/L的尿素)同时使用,因为尿素能使RNase-RNasin复合物分离,并释放出活性的RNase。 rna提取中乙醇的作用 1. 按照Invitrogen公司的Tizro说明书,在提取RNA过程中进行到加入75%乙醇后,可使RNA沉淀在4度保存一个月,在-20度保存一年。 2. 一般这种方法用的比较少,因为每次提RNA都是一气下来,中间没有停顿的,除非一次提很多,上午时间不够用,可进行到加入乙醇未知,然后放到-20度冰箱,下午可继续进行。 3. 一般保存方法都是RNA溶解到无RNase的水中,然后-80度冰箱保存。 4. 反复冻融对RNA的长时间保存肯定是有影响的,可分成小量保存,尽量减少冻融。 5. 现在有些试剂公司有相关的产品,可用于保存RNA,不过可能会有植物或动物,细胞或组织之分。 二巯基丙醇怎么提取 二巯基丙醇古代叫砒霜解药,二巯丙醇为无色或几乎无色、易流动的澄明液体。有类似葱蒜的气味。在甲醇、乙醇或苯甲酸苄酯中极易溶解,溶于水,在脂肪油中不溶,可防止砷、汞、铋、金、锑等金属对身体组织的中毒作用。名称介绍 中文名称:2,3-二巯基丙醇;2,3-二氢硫基-1-丙醇;2,3-二巯基-1-丙醇;二巯基丙醇;3-羟基-1,2-丙二硫醇;巴尔;巴尔双硫代甘油;英国抗路易斯气剂 dna提取中巯基还原剂 DTT作用如下: 1、DTT的作用之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。 这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA的二聚化。 2、DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。 但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M盐酸胍、8M尿素或1%SDS)。 反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。 DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。 而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。 RNA提取中巯基乙醇如何除去 是 TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。 1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。 2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。 巯基乙醇作用Rna提取 Trizol就是酚氯仿提取法的常用试剂 Trizol中有酚,异硫氰酸胍和B-巯基乙醇。他们的作用都是使蛋白变性,使蛋白质与核酸解聚。加入氯仿,用来分相,实际上是加速有机相和水相的分层,当溶液pH在酸性的时候,DNA分子就会沉淀在酚与溶液的界面,就是白色层,只有RNA分子留在水相,但溶液pH不在酸性范围内,会使DNA溶解在水相,所以使用时按照说明书要求根据细胞数或培养器皿底面积适量加入Trizol。最后异丙醇沉淀,将水相中RNA提取出来。 提rna加巯基乙醇 材料、试剂及器具 1、 材料 总rna提取物。 2、 试剂 (1)0.1%DEPC水:200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀,室温放置过夜,高压灭菌。 (2)10x电泳缓冲液。 吗啉代丙烷磺酸(MOPS) 0.4mol/L(pH 7.0) NaAc 0.1mol/L 乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L (3)50mL变性琼脂糖凝胶(1%) (4)10x电泳缓冲液 5 mL 琼脂糖 0.5 g 0.1%DEPC水 36.5 mL 加热溶解,稍冷却,加入8.5 mL 37%甲醛。 (5)上样缓冲液:50%,1mmmol/LEDTA,0.4% 溴酚兰,0.4%二甲苯蓝。 (6)甲酰胺(去离子)。
兴奋的宝贝
2025-06-27 11:48:13
是有这种可能的。
TRizol的主要成分是异硫氰酸胍和苯酚,对于皮肤的损伤主要是苯酚对于皮肤的腐蚀,不懂的话,参见高中化学。
以前提取RNA的时候,尽管带着手套操作,但还是不可避免的会有TRizol溅到皮肤上,一般洗一下手,就没事了;不洗手的话,会有一个小腐蚀斑,过几天就没事了。
独特的银耳汤
2025-06-27 11:48:13
苯酚结构式如下图:
苯酚是一种有机化合物,化学式为C6H5OH,是具有特殊气味的无色针状晶体,有毒,是生产某些树脂、杀菌剂、防腐剂以及药物(如阿司匹林)的重要原料。也可用于消毒外科器械和排泄物的处理,皮肤杀菌、止痒及中耳炎。
发现历史:
苯酚是德国化学家龙格(Runge F)于1834年在煤焦油中发现的,故又称石炭酸(Carbolic acid)。使苯酚首次声名远扬的应归功于英国著名的医生里斯特。
里斯特发现病人手术后死因多数是伤口化脓感染。偶然之下用苯酚稀溶液来喷洒手术的器械以及医生的双手,结果病人的感染情况显著减少。这一发现使苯酚成为一种强有力的外科消毒剂。里斯特也因此被誉为“外科消毒之父”。
以上内容参考:百度百科-苯酚