蛋白质发生显色反应的条件
黄色反应 (Xanthoproteic reaction)�
原理�
凡是含有苯环的化合物都能与浓硝酸作用产生黄色的硝基苯衍生物。该化合物在碱性溶液中进一步转化成深橙色的硝醌酸钠 .�
在蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基易发生上述反应,而苯丙氨酸不易硝化,需加少量浓硫酸催化才能呈明显的正反应。皮肤、指甲、头发等遇浓硝酸变黄即为这一反应的结果。�
操作步骤�
一、取一支试管加 4滴0.5%苯酚溶液,再加浓硝酸2滴,观察黄色出现,冷却后逐滴加入10%氢氧化钠溶液,观察颜色转变为橙色。�
二、取一支试管加蛋白质溶液 4滴及浓硝酸2滴,由于强酸的作用,开始蛋白质形成白色沉淀,小火加热,则沉淀变为黄色,冷却之,逐滴加入10%氢氧化钠溶液,颜色由黄色转变成深橙黄色。�
三、剪少许指甲或头发放入试管中,加入数滴浓硝酸,观察颜色变化。�
此外,蛋白质的显色反应
常用的显色反应
双缩脲反应:
该反应是肽键常用的反应,即在碱性铜溶液中,
肽键与铜离子形成络合物,呈紫色(在540nm有最大
光吸收峰)。
酚试剂法:
该反应是比色法测定蛋白质的常用方法,即蛋白
质以碱性铜溶液处理后,加用酚试剂,呈蓝色(在650nm
有最大光吸收峰)。
考马斯亮蓝法:
即蛋白质与一种蛋白质染料考马斯亮蓝G250反应形成
复合物,该复合物在595nm有最大光吸收峰。 1
是向苯环中引入了发色基-硝基
黄蛋白反应(xanthoprotein
reaction),也称蛋白黄反应,是带有苯环的蛋白质与浓硝酸混合加热后呈现黄色的反应。
反应原理是硝酸对苯环发生硝化作用,生成黄色的芳香硝基化合物,使蛋白质发生变性。浓硝酸滴到皮肤上,过一段时间皮肤就会发黄,数天后死皮褪去,就是因为这个原因。生成的黄色冷却后,若再与碱或氨水接触,则颜色转变为橙黄色。
带有苯环的氨基酸包括:酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。它们之中,酪氨酸苯环上的羟基活化了苯环,使得黄蛋白反应较容易进行,而苯丙氨酸苯环的硝化却较难发生。
常用的显色反应
双缩脲反应:
该反应是肽键常用的反应,即在碱性铜溶液中,
肽键与铜离子形成络合物,呈紫色(在540nm有最大
光吸收峰)。
酚试剂法:
该反应是比色法测定蛋白质的常用方法,即蛋白
质以碱性铜溶液处理后,加用酚试剂,呈蓝色(在650nm
有最大光吸收峰)。
考马斯亮蓝法:
即蛋白质与一种蛋白质染料考马斯亮蓝G250反应形成
复合物,该复合物在595nm有最大光吸收峰。
显色反应的应用
蛋白质的显色反应可用于蛋白质的检测分析
将试样中被测组分转变成有色化合物的化学反应,叫显色反应。焰色反应,也称作焰色测试及焰色试验,是某些金属或它们的化合物在无色火焰中灼烧时使火焰呈现特殊颜色的反应。其原理是每种元素都有其个别的光谱。
颜色反应是通过化学变化改变了化学物质的颜色。硝酸与蛋白质反应,可以使蛋白质变黄。这称为蛋白质的颜色反应,常用来鉴别部分蛋白质,是蛋白质的特征反应之一。
扩展资料
焰色反应实际上是物理变化,是物质原子内部的电子能级发生了改变。通俗地说,焰色反应是原子中的电子能量的变化,不涉及物质结构和化学性质的改变。一些金属或它们的化合物在灼烧时能使火焰呈现特殊的颜色。
这是因为这些金属元素的原子在接受火焰提供的能量时,从能量较低的轨道跃迁至能量较高的轨道。但处于能量较高轨道上的电子不稳定,会迅速跃迁回能量较低的轨道,这时就将多余的能量以光的形式释放出来。
参考资料来源:百度百科—显色反应
百度百科—焰色反应
百度百科—颜色反应
蛋白质变性后,就失去了原有的可溶性,也就失去了它们生理上的作用.因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程.
造成蛋白质变性的原因
物理因素包括:加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、超声波等:
化学因素包括:强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。
但是注意,盐析不是变性,与乙醇,丙酮接触也不一定变性,要将沉淀与有机溶剂长时间放置才会变性
⑥颜色反应
蛋白质可以跟许多试剂发生颜色反应.例如在鸡蛋白溶液中滴入浓硝酸,则鸡蛋白溶液呈黄色.这是由于蛋白质(含苯环结构的蛋白质才反应)与浓硝酸发生了颜色反应的缘故.
硝酸与蛋白质反应,可以使蛋白质变黄.这称为蛋白质的颜色反应,常用来鉴别部分蛋白质,是蛋白质的特征反应之一.
蛋白质的颜色反应
1、双缩脲反应 双缩脲NH2-CO-NH-CO-NH2是由2分子尿素,(NH2-CO-NH2)失去1分子氨后的缩合产物.多肽分子中含有许多和双缩脲结构相似的肽键-CO-NH-.因此,在蛋白质溶液中加入碱和少量的硫酸铜就有紫红色铜的络合物生成.任何蛋白质或者蛋白质水解中间产物都有双缩脲反应.这个性质显示和蛋白质分子中所含肽键数目有一定的关系.肽键数目越多,颜色越深.它能显示是由于生成了+2价的铜的络合物.
2、蛋白质黄色反应 某些蛋白质跟浓硝酸作用呈黄色,如再以氨处理又变成橙色.有这种反应的蛋白质分子一般都存在苯环.
3、蛋白质跟茚三酮反应 蛋白质和氨基酸一样,也能和茚三酮水合物试剂产生紫色的颜色反应,这种反应可鉴别蛋白质.
4、还原性糖类与斐林试剂也可发生颜色反应,生成砖红色的沉淀.这种反应可以快速鉴别还原性糖的存在,但是斐林试剂需要现配现用.
显色反应是将试样中被测组分转变成有色化合物的化学反应.
属水合离子本身的颜色进行光度分析,因为它们的吸光系数值都很小.一般都是选适当的试剂,将带测离子转化为有色化合物,再进行测定.这种将试样中被测组分转变成有色化合物的化学反应,叫显色反应.显色反应有氧化显色反应,还原反应和配位反应.而配位反应最主要.例如:三氯化铁与苯酚反应生成紫色的配合物(络合物).