色素的提取要为什么用无水乙醇?用乙醇不行吗?
乙醇肯定是不可以的,因为一般说的乙醇就是酒精,其组成是乙醇和水,如果有水的话,你提取的色素就会分解成其他的物质,这样就达不到有效提取色素的目的.
而无水乙醇是不含有水的,这样就是说用无水乙醇就可以有效的提取色素,并且不会使其分解.
光合色素的提取和分离如下:
一、光合色素的提取
1、选材:选择鲜绿、柔软的绿色菠菜叶。
2、研磨:
(1)5g菠菜叶,去叶脉,剪碎放入研钵中。
(2)分别加入无水乙醇有机溶剂,要少量多次加,以利于溶解色素;加CaCO3是为了保护色素(CaCO3能中和有机酸),是因为在研磨过程中,液泡也容易被破碎,液泡中的有机酸容易分解色素,色素被分解的多了,提取液中的色素就少了,实验效果不明显。加石英砂(SiO2)使研磨更加迅速。
3、过滤:不能使用滤纸,滤纸有吸水性,一般要用尼龙布或纱布,最后得到提取液。
二、光合色素的分离
1、原理:根据不同色素在层析液中溶解度不同。
2、过程
(1)制备滤纸条。
(2)用毛细玻璃管在滤纸条上划线,应先用铅笔划线,再用毛细玻璃管蘸取提取液划线,要多次反复的划,第一次干了,再划第二次,要尽可能细,尽可能直。
(3)烧杯中的层析液(20份在60—90℃下分离出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成的)。
(4)色素分离的方法:纸层析法。
实验目的
1、使学生了解光合作用的发现过程。
2、使学生了解叶绿体中色素的种类、颜色及其吸收的光谱;初步学习光合色素的提取方法及其在滤纸上的分布。
3、掌握光合作用的概念、实质、总反应式、光反应、暗反应的具体过程、光反应与暗反应的区别与联系及光合作用的意义。
4、应用所学的光合作用的知识,了解植物栽培与合理利用光能的关系。
(2)选用绿叶叶脉过多,叶肉细胞过少。
(3)未加碳酸钙或加入过少,导致色素分子被破坏。
(4)使用放置数天的绿叶,滤液中色素(叶绿素)含量太少。
(5)一次加入大量的无水乙醇,提取浓度太低。(应分次加入少量无水乙醇提取色素)
叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。
提取步骤如下:
(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。
(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。
(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。
(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。
(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。
(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。
(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。
(8)将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。
扩展资料:
叶绿素的分离
色谱法是一种很好的分离纯化、鉴定有机化合物的重要方法,尤其是在微量分析中应用的更是广泛。果蔬中色素主要包括脂溶性的胡萝卜素、叶黄素、叶绿素和水溶性的花青素。
在提取实验时,我们可以利用相似相溶的原理把水溶性的花青素滤掉,继而可以利用薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素进行分离。
由于这三种色素的极性依次减弱,可以适当地选择单一的有机溶剂或者不同配比的混合溶剂作为展开剂和洗脱剂,确定最佳的优化分离条件。
叶绿素-百度百科
1、选取叶子。此实验必须选择绿色且容易研磨的叶子,所以一般选择鲜嫩的菠菜叶,而且量不宜过多但也不能过少。过多不易研磨,过少则色素量太少。
2、研磨。研磨时注意先将叶子剪碎放入研磨,研磨前还必须加入适量的二氧化硅、乙醇和碳酸钙。此过程中三种物质必须先加,研磨要迅速,否者色素容易挥发,研磨完毕要保存好。
3、过滤。过滤选择的是单层尼龙布,不能是滤纸。因为滤纸孔特别小,而且吸附能力特别强,所以需要用纱布较好。
4、制作滤纸条。制作滤纸条时必须剪去一端的两个角,并且在靠近剪去角的一端画铅笔细线,注意此细线必须细而且直。
5、画滤液细线。化滤液细线可以用两种方法,一种是用毛细吸管一滴滴沿着滤纸条上的细线来画,必须保证滤液不扩散。在画细线的时候要先干燥之后再画一次,目的是有更多的色素。另一种方法是用盖玻片沾一下滤液,再像印章一样印在滤液细线上。
6、分离色素。将刚才画好的滤纸条放入到层析液中。此过程必须注意不能让滤液细线被层析液淹没,而且需要盖好盖子,因为层析液有毒而且易挥发。
7、干燥滤纸条。一段时间后取出滤纸条,可以用嘴巴吹干,也可以用风扇加速干燥,一段时间就能观察到滤纸条上出现的色素带。