乙醇回流法提纯的原理及操作步骤

回流提取法是用乙醇等易挥发的有机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷却，重复流回浸出容器中浸提原料，这样周而复始，直至有效成分回流提取完全的方法。回流法提取液在蒸发锅中受热时间较长，故不适用于受热易遭破坏的原料成分的浸出。

回流提取法分为回流热浸法和回流冷浸法。

1、回流热浸法

需更换新溶液2-3次，不适用于遇热易受破坏的成分的提取

（1）将饮片或粗粉添加溶剂

（2）浸泡一定时间后水浴加热，回流浸出至规定时间

（3）滤出回流液

（4）添加新溶剂再回流2-3次

（5）合并各次回流液，回收溶剂，即得浓缩液

2、回流冷浸法

（1）将饮片置于浸出器中，加入溶剂

（2）待浸出液充满虹吸管时，自动流入蒸发锅中

（3）在蒸发锅中被加热蒸发，蒸汽冷凝后又流入浸出器

（4）反复浸提至规定时间

黄酮的分离

从植物向溶剂中转移的过程,主要影响因素是所选溶剂中黄酮类物质的溶解度目前常用的有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、石油醚、丙酮等,其中由于甲醇和丙酮等溶剂的毒性较大,而乙醇相对安全且易回收等特点,因此乙醇是目前总黄酮提取中的常用溶剂。基于乙醇为提取溶剂的三叶青总黄酮提取方法主要包括回流法和超声法。其中回流法是最常用且提取效率最高的方法。回流法是指用挥发性有机溶剂浸提三叶青药材成分,浸提液被加热,溶剂馏出后又冷凝回流至药材,这样周而复始,直至有效成分提取完全。包括回流热浸法和回流冷浸法,其中热浸法溶剂用量较多,且在循环时不能更新,而冷浸法的溶剂用量较小,提取时可以循环更新,因此更适合用于三叶青的总黄酮提取。超声法提取黄酮是相对较新的方法,其原理是利用超声波在液体中的空化作用加速黄酮从植物药材中浸出,另外还利用其次效应,如机械振动、扩散和击碎等,加速被提取物的释放。此法具有设备简单、操作方便、提取时间短等优点,对三叶青总黄酮的提取率为555%3另外还包括基于大孔吸附树脂的提取新方法。三叶青黄酮的提取方法中已有陈丹351等人发明的三叶青地上部分总黄酮的提纯方法专利及刘东峰等基于超临界二氧化碳萃取三叶青总黄酮的发明专利,均为三叶青总黄酮的提取技术提供了新的方法学支持。

二、黄酮的测定

目前,测定黄酮类物质的方法很多,主要有分光光度法、色谱法。分光光度法是最常用的三叶青总黄酮含量的测定方法,其中包括直接测定法和显色法直接测定法是在黄酮结构的特征吸收峰波长处测定其含量,对单一成分的样本具有检测方便、快速且准确等优势。但对于复杂的中药成分,由于存在的干扰因素较多,会对测定结果产生影响,出现较大误差。另一种总黄酮含量测定法是在碱性条件下的显色法。主要包含两种显色方式,一种是NaNO2-A1(NO3)3-NaOH比色法,即在测定过程中依次加入NaNO2、A(NO3)3、NaOH溶液,产生稳定的红色化合物在(505±5)m处进行比色测定含量,此法是目前应用最为广泛的测定黄酮类化合物的方法,可以有效地排除多糖和皂苷的干扰。另一种是氯化铝显色法,即在测定的溶液中加入氯化铝溶液,A1+与黄酮类物质的3-或5-羟基与4-羰基,或3',4-邻二酚羟基络合显色,在413mm处有最大吸收色谱技术已经广泛地应用于各种天然产物的定性和定量分析中,常用的色谱技术分为气相色谱和液相色谱两大类。由于黄酮类物质的沸点高,对热不稳定等特征,在进行气相色谱测定前需要对样本进行衍生化处理。因此,在三叶青总黄酮的测定应用中,高效液相色谱法使用较为广泛,也是目前公认的最佳方法。但高效液相色谱存在一定的缺点,主要是价格昂贵,分析时间长,分离效率低等。

中药乙醇提取液回收溶剂，得到乙醇提取物，乙醇提取物如酸水溶剂，得到酸水。酸水用氨水碱化至PH10--11，用氯仿萃取，分为氯仿层和碱水层。氯仿层用2% NaOH萃取，NaOH萃取液加NH4CL，用氯仿萃取。氯仿萃取液回收溶剂得到非酚性碱。碱水层加盐酸调PH3—4，加雷氏铵盐沉淀，沉淀用丙酮溶解，氯化铝柱色谱纯化，硫酸银，氯化钡分解，得到季铵碱盐酸盐。

传统的提取方法系将原料装入适当的容器中，加入适宜的溶剂，如乙醇、或CO2流体流体等，通过控制原料粒度、提取时间、提取温度、提取压力等工艺条件，以溶出其中有效成分。普遍使用的方法有： A.浸出提取法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等； B.水蒸气蒸馏法：将原料与水在一起加热，当其蒸气压和水的蒸气压总和为一个大气压时，液体开始沸腾，水蒸气将挥发性物质一并带出。例如挥发油，某些小分子生物碱，以及某些小分子的酚类物质； C.升华法：固体物质加热直接气化，冷凝后凝固为固体化合物，利用升华原理直接自原料中提取目标成分。例如樟木中升华的樟脑，茶叶中的咖啡碱等。浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等传统工艺方法，萃取能力强，选择性强，但在萃取、分离过程中，工艺温度均需超过50℃ 以上，易造成“热敏性”有效成分不同程度的分解或变性，使得产品发生次生化；亲脂性的有机溶剂萃取所生产的产品中的溶剂残留高，降低了产品的品质，并且可选取的有机溶剂多属易燃品，生产过程的安全隐患难以消除。水汽蒸馏法、升华法由于其针对性过强，影响了该方法的应用领域。

具体制作过程不太明白，所以根据我的想法回答。

中药中的成分属有机物，根据“相似相溶原理”，难溶于水易溶于有机物，所以中药粉碎后，用乙醇浸取，其成分就会溶解到乙醇中，然后滤去不溶物，蒸馏，除去乙醇，就提炼到了中药精华。

蒸馏基本可以完全除去乙醇，不用担心会伤害身体。 http://zhidao.baidu.com/question/123929701.html?fr=uc_push

1、器材：索氏提取器。

2、过程：用滤纸包住要提取的东西，放在提取管中，乙醇放在烧瓶里，通冷凝水，加热回流。

3、黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。

乙醇回流法系指用乙醇等挥发性有机溶剂浸提药材成分，浸提液被加热，溶剂馏出后又被冷凝流回浸出器中浸提药材，这样周而复始，直至有效成分提取完全的方法。包括回流热浸法（溶媒用量较多，提取时循环使用，但不能更新）和回流冷浸法（溶媒用量较少，提取时可循环和更新）。该法由于浸提液受热时间较长，故不适用于受热易破坏的药材成分的浸出。

回流的目的是为了节省溶剂。乙醇是易挥发的液体，如果不采用回流提取法的话，在提取的过程中乙醇会因为蒸发消耗。这时候就需要不断地补充乙醇的量，不仅操作繁琐而且浪费。回流提取的好处就是可以使乙醇蒸汽冷凝后再回到烧瓶内达到反复循环的作用。

在回流的过程中，植物中能溶解在乙醇中的成分就会跑到乙醇中（包括你要的产品）。其实跟煎中药是一个道理。

至于你要的产品很简单，只要回流提取完毕之后，回收乙醇提取液，滤过，然后减压蒸馏至干，然后再进行进一步的分离纯化得到产物。