提rna时必须加入巯基乙醇吗
是。
为了达到更好的RNase抑制效果,往往会在裂解液中额外加入巯基乙醇。巯基乙醇具有较强的挥发性,为更安全的提取RNA。
RNase活性的抑制效果决定了RNA提取的完整性。裂解液中的变性剂,能够使蛋白变性、抑制RNase的活性。
主要用途:用于合成树脂及用作杀霉菌剂、杀虫剂、增塑剂、水溶性还原剂等。其它理化性质:1.4996健康危害:吸入、摄入或经皮肤吸收后会中毒。中毒表现有紫绀、呕吐、震颤、头痛、惊厥、昏迷,甚至死亡。对眼、皮肤有强烈刺激性。可引起角膜混浊。环境危害:对环境有危害,对水体可造成污染。燃爆危险:本品可燃,有毒。危险特性:遇高热、明火或与氧化剂接触,有引起燃烧的危险。受高热分解放出有毒的气体。加入保护剂防止某些生物活性物质的活性基团及酶的活性中心受到破坏。如最常见的巯基,是许多活性物质和酶催化的活性基团,极易被氧化,故提取时常加入一些还原剂。一些易受重金属离子抑制生理活性的物质,加入某些金属螯合剂,把有害金属离子螯和掉,而保持被提取物的活性。[螯合剂和巯基试剂]巯基试剂在生化反应中有两个用途,一是防止蛋白质或酶等分子中的SH-基氧化成S-S,二是某些酶反应中维持体系的还原环境。经常应用的巯基试剂有二硫丁醇类化合物(如二硫苏糖醇DTT、二硫赤酰糖醇DTE)和2-巯基乙醇,谷胱甘肽也经常应用。一般来说二硫丁醇类是常选用的巯基试剂,不仅是因为挥发性低,难闻的气味较少,而且氧化电位低,比2-巯基乙醇浓度低很多的情况下,可以使其他二硫化合物完全还原。螯合剂用于控制反应中金属离子浓度或去除金属离子,常用的螯合剂有EDTA(乙二胺四乙酸)、EGTA、1,10-二氮杂菲、柠檬酸和磷酸等。抗氧化。用PBS配成100X的浓度,4度避光保存,用2周。瓶子上没有特殊标注,应该就是纯的吧?
巯基乙醇的还原性很强,能够将二硫键还原为硫醇(用R-S-S-R‘表示某含二硫键化合物):2HS-CH2CH2OH + RSSR’ → RSH + R‘SH + HO-CH2CH2-S-S-CH2CH2-OH称之为破坏了二硫键。
蛋白质的一级结构:蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。主要化学键:肽键,有些蛋白质还包含二硫键。
蛋白质的二级结构:蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,也就是该段肽链骨架原子的相对空间位置,并不涉及氨基酸残基侧链的构象。二级结构以一级结构为基础,多为短距离效应。
分子结构数据
摩尔折射率:20.74。
摩尔体积(cm3/mol):73.1。
等张比容(90.2K):180.3。
表面张力(dyne/cm):37.0。
极化率(10-24cm3):8.22。
溶解性:能与水、乙醇、乙醚和苯以任意比例混溶。
以上内容参考:百度百科-巯基乙醇
经查询上海桥星贸易有限公司供应巯基乙醇浓度浓度,1.4mol/L供应产品。
巯基乙醇一般指2-巯基乙醇。2-巯基乙醇,又称为β-巯基乙醇,是一种有机化合物,分子式为C?H?OS,为无色挥发性液体,具有较强烈的刺激性气味。
年初的时候,我在一所二本大学读大四,信心满满出来找实习。但事与愿违,学了四年生物,才知道找个实习都这么难:本科学历,成绩不好,人际关系太少。最后我去了南京一家生物公司做实验员实习。
这份工作其实真的没有什么技术含量,我每天的任务就是做Western Blot实验和利用SDS-PAGE进行蛋白染色:每天我都要配几十块胶、做十几种样本的Western。因为这家公司是做抗体的,Western Blot就成了必不可少的质检环节。所以,公司雇了好多像我一样的实验员,天天在重复这些劳动。过了不久,我就对这份工作十分失望:天天配胶跑Western Blot,这也太TM无聊了吧!
于是我开始混日子的生活,白天玩手机,晚上打游戏,做实验也是应付了事。现在回想起来,如果一直这么下去,我这辈子可能也就这样了。直到后来,一次意外事故彻底改变了我的命运。
那天我手头的活特别多,所以同事们都去食堂吃午饭了,只有我留在实验室加班配胶。本来我的工作态度就不是特别积极,正好赶上在跟女朋友闹分手,更加心不在焉。在配胶的时候,我随手把一瓶TEMED放在了桌子边上 - 不料,我拿移液器的时候忘了这事,一下子把这瓶TEMED打翻在地上了。一股浓重的鱼腥味扑面而来,我当场就慌了:我还在实习期,犯这种低级错误肯定要被领导扣分,影响我正式签约可就完蛋了。于是我决定掩盖自己的“罪行”。
我迅速拿了一个袋子,把碎玻璃收进去,然后用吸水纸把地面擦干净,全部带到外面的垃圾桶扔掉。最后又从仓库拿了一瓶新的TEMED摆上。但这个味道实在是去不掉,我只能喷点酒精掩盖一下,然后打开通风机猛抽一阵。因为过于慌乱,我在处理时没带口罩,当场被熏的肺不舒服。虽然早就听老师说这东西有毒,但我也没在意那么多,以为透透气就好了。
下午的时候,我还对自己的“机智”非常得意,根本没人发现这件事。但是很快,我就付出了惨重代价。我很快就觉得头晕眼花,四肢无力,眼睛居然也开始疼。我坚持了一会,发现自己根本站不住了。趁着自己还有点力气,我赶紧去跟领导请假,打车火速赶往医院。
肌电图检查结果出来之后,我吓了一跳:神经损伤?不会植物人了吧!
医生很严肃的告诉我,四甲基乙二胺(TEMED),是一种很强的神经毒剂(跟刺杀金正男的毒剂是一个类型的。。。),对黏膜、上呼吸道、眼睛和皮肤的组织有极大的破坏作用,还会对神经系统造成很大影响,重度中毒很可能会瘫痪!
可以说这次多亏我带了手套,不然小命难保了。没办法,我最后在医院里躺了3天,回家休养了两个星期。
这次惊心动魄的事故,彻底改变了我。在家养病期间,我开始反省自己:这种混日子、不上进的生活不能再继续下去了。我甚至意识到,自己连配胶的成分都没有关注过,只是照着protocol机械操作。SDS-PAGE实验里哪些东西有毒性,我居然没有概念。
我查阅了各种资料,发现配胶过程中竟然充满了这么多危险试剂:
丙烯酰胺-甲叉丙烯酰胺(Arc-Bis):中等毒性,神经毒剂。低浓度接触数月数年后,渐出现头痛头晕疲劳,嗜睡,手指剌痛,麻木感,常伴有两手掌发红,脱屑,手掌足心多汗。
过硫酸铵(APS):对皮肤粘膜有刺激性和腐蚀性.吸入后引起鼻炎、喉炎、气短和咳嗽等.眼、皮肤接触可引起强烈刺激、疼痛甚至灼伤.口服引起腹痛、恶心和呕吐.长期皮肤接触可引起变应性皮炎.。
SDS:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用.可引起呼吸系统过敏性反应。
TEMED:不用多说了,非常强的神经毒剂,我就是中了它的毒。(大家千万要注意带着口罩操作实验,防止误吸)
DTT二硫苏糖醇:可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。
另外,万万没想到的是自己经常做的蛋白染色过程中,考马斯亮蓝g250也是有毒的:接触会腐蚀皮肤,吸入会损伤黏膜。
二甲基亚砜
DMSO是二甲基亚砜,用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。也可作为农药的添加剂。也是一种十分重要的化学试剂。
DMSO也是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,减轻自由基对细胞损害,改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。
但是,研究表明,DMSO存在严重的毒性作用,与蛋白质疏水集团发生作用,导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性。
DMSO是毒性比较强的东西,用的时候要避免其挥发,要准备1%-5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤.最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。
吸入:高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。
皮肤:能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。
吸收:吸收危险性很低。
丙烯酰胺
丙烯酰胺属中等毒性物质,可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体,因此,在搬运和使用中必须穿戴好防护用具,如,防毒服,防毒口罩及防毒手套等。丙烯酰胺的危害主要是引起神 经毒性,同时还有生殖、发育毒性。神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化,试验还显示丙烯酰胺是一种 可能致癌物,职业接触人群的流行病学观察表明,长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状,伴随末梢神经病如手套样感觉、出汗 和肌肉无力。累积毒性,不容易排毒。
具备以下任何一项者,可列为慢性丙烯酰胺中毒观察对象:
a.接触丙烯酰胺的局部皮肤出现多汗、湿冷、脱皮、红斑;
b.出现肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等症状;
c.神经-肌电图显示有可疑神经源性损害。
5.NN-亚甲双丙烯酰胺:
有毒,影响中枢神经系统,切勿吸入粉末。
氯 仿
氯仿(CHCl3):
对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一种致癌剂,可损害肝和肾。它也易挥发,避免吸入挥发的气体。操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。
甲醛(HCOH)
甲醛(HCOH):
有很大的毒性并易挥发,也是一种致癌剂。很容易通过皮肤吸收,对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和安全眼镜。始终在化学通风橱内进行操作。远离热、火花及明火。
叠氮钠
叠氮钠(NaN3):
毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜,操作时要格外小心。
十二烷基硫酸钠(SDS)
十二烷基硫酸钠(SDS):
有毒,是一种刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。
三氯乙酸(TCA)
三氯乙酸(TCA):
有很强的腐蚀性。戴合适的手套和安全防目镜。
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