如何配制50mM磷酸钠缓冲液（pH7.0）
基本不用ph=pka+lg[c(磷酸钠）/c(磷酸氢二钠)]这个公式了。
A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。 B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶100ml。
这样得到的是200mM的磷酸钠缓冲液。而A液与B液以39：61的比例混合，得到PH值为7.0的溶液。
但浓度还是200mM。所以得到的100ml稀释成400ml。如果没法定溶到400ml。可以计算一个可以定溶的体积，比如1L。
总共是50mmol（0.05Mol）试剂，NaH2PO4.2H2O占39%得0.05*0.39*分子量。同样可以算出Na2HPO4.12H2O（0.05*0.61*分子量）要的量。
扩展资料：
1、按标准配制即可；（取磷酸氢二钠10.9g，磷酸二氢钠2.3g，加水700ml使溶解，调pH值至7.0，再加水稀释至1000ml。）
2、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠在药典附录试药中有规定，通常情况下没指明带几个水的，均是指下列形式：
A、磷酸氢二钠：Disodium Hydrogen Phosphate (Na2HPO4·12H2O＝358.14]本品为白色结晶或颗粒状粉末，易风化。在水中溶解，在乙醇中不溶。
B、磷酸二氢钠：Sodium Dihydrogen Phosphate [NaH2PO4·H2O＝137.99]本品为白色结晶或颗粒。在水中易溶，在乙醇中几乎不溶。
参考资料来源：百度百科 ——磷酸缓冲液
磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，简称PBS）的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及 磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。它是一种水基盐溶液中含有氯化钠，磷酸盐，以及（在某些配方）氯化钾和磷酸钾。缓冲液有助于保持恒定的pH值。解决方案的渗透压和离子浓度通常与人体pH相近（等渗）。
2，磷酸氢二钠和磷酸二氢钠在药典附录试药中有规定，通常情况下没指明带几个水的，均是指下列形式：
A，磷酸氢二钠：Disodium Hydrogen Phosphate (Na2HPO4·12H2O＝358.14]
本品为白色结晶或颗粒状粉末，易风化。在水中溶解，在乙醇中不溶。
B，磷酸二氢钠：Sodium Dihydrogen Phosphate [NaH2PO4·H2O＝137.99]
本品为白色结晶或颗粒。在水中易溶，在乙醇中几乎不溶。
磷酸为三元弱酸，各级电离常数分别为：
Ka1=6.7×10^-3, pKa1=2.17
Ka2=6.2×10^-8, pKa2=7.21
Ka3=4.5×10^-13,pKa3=12.35
在三种缓冲体系中要配置pH=7.0的缓冲溶液最适宜的是
H3PO4——H2PO4-。根据Henderson-Hasselbalch方程，可写出：
pH=pKa1+lg[c(H2PO4-)/c(H3PO4)]
7.0=2.17+lg[c(H2PO4-)/c(H3PO4)]
lg[c(H2PO4-)/c(H3PO4)]=4.83
c(H2PO4-)/c(H3PO4)=6.76×10^4
也就是说NaH2PO4和H3PO4的摩尔比为6.76×10^4。这个比值是相当大的，事实上光NaH2PO4的溶液pH就7.21，已经非常接近7.0了，你可以在所配置的1/15mol/L的NaH2PO4的溶液中大概1L，加入半滴磷酸甚至更少（这个量完全可以用精密pH试纸来控制）就可以了。
溶质：0.1mol磷酸
并调整溶液至一升
配法非单一 再举例一个
0.02501molNaOH+0.01624mol磷酸混合 并调整溶液至一升
其中
磷酸1.33e-7mol/L
磷酸二氢根 0.01mol/L
磷酸氢根 0.00623mol/L
磷酸根 1.38e-5mol/L
溶液中性
选用参数
磷酸一级电离 7.52e-3
二级 6.23e-8
三级 2.20e-10
实际上 你配一瓶磷酸溶液 选用甲基橙指示剂 缓慢滴入NaOH，至亮黄色
这就是一瓶缓冲剂了。
难度颇高 如果有PH计会更好
0.2M磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M) 甲液： NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L， NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。 乙液： Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L， Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ， Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。 磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) 5.7 9.35 6.5 6.9 45 55 5.8 92 8 7 39 61 5.9 90 10 7.1 33 67 6 87.7 12.3 7.2 28 72 6.1 85 15 7.3 23 77 6.2 81.5 18.5 7.4 19 81 6.3 77.5 22.5 7.5 16 84 6.4 73.5 26.5 7.6 13 87 6.5 68.5 31.5 7.7 10 90.5 6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5 6.7 56.5 43.5 7.9 7 93 6.8 51 49 8 5.3 94.7 根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.
1/15M 磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) 4.49 0 10 6.98 6 4 4.94 0.1 9.9 7.71 7 3 5.29 0.25 9.75 7.58 8 2 5.59 0.5 9.5 7.75 9 1 5.91 1 9 8.04 9.5 0.5 6.24 2 8 8.2 9.7 0.3 6.47 3 7 8.54 9.75 0.25 6.64 4 6 8.68 9.9 0.1 6.81 5 5 9.18 10 0 乙液：一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L 甲液：二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L 根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.
H2PO4- + H+ ====H3PO4 (酸足量)
磷酸中磷已是最高价,所以溶于硝酸与硝酸氧化性无关,只与酸性有关
在但是酒精不和磷酸盐反应。这里PH之所以升高，是因为磷酸二氢钠是两性的，既能和酸反应，也能和碱反应，但酸性略强于碱性（缓冲溶液）。酒精溶于水，抑制了磷酸二氢根的酸式电离（水变少了所以磷酸二氢钠的相对浓度变大了），所以PH升高了。
