当溶液浓度发生改变时,最大吸收波长是否会改变?吸光系数是否会改变?
吸收系数的数值等于当吸光物质的浓度为1mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。所以你要用1mol/L的溶液,放在1cm的比色皿里测定吸光度,此时的吸光度就是吸收系数。
但是吸收系数会受到温度和溶剂的影响,最好在室温25摄氏度测定,溶剂你每次统一就好了。
苯胺在中性溶液中最大吸收波长为280nm,在酸性溶液中为254nm。
苯酚在中性溶液中最大吸收波长为270nm,在碱性溶液中为287nm。
PH变化会使苯胺和苯酚中的氨基和羟基与苯环的共轭体系发生变化,共轭时发生红移,也就是吸收波长变大。
式中 Iint和Iout分别为入射光及通过样品后的透射光强度;log(Iin/Iout)称为吸光度;C为样品浓度;d为光程,也就是溶液的多厚;ε为光被吸收的比例系数。当浓度采用摩尔浓度时,ε为摩尔吸收系数。它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关。
通常物质在可见吸收波段内都有一个最大的吸收峰,我们称作物质的特征峰,形状是一个山峰型。几种复合物质的时候,就是有几个山峰型。
溶液浓度降低的时候,光谱的峰值增加,波形全都增加。反之,浓度增加,峰值下降。
吸光度由比尔定律可以看出,和浓度呈正比,是直线关系。影响到直线的斜率,浓度大,直线陡急,浓度小,直线平缓。
同一波长下不同浓度的KMnO4溶液吸光度的变化规律:A=abc,其中A为吸光度,a为吸光系数,b为光程,c为样品的浓度。
吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关,只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。当一束光通过一个吸光物质(通常为溶液)时,溶质吸收了光能,光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。
影响吸光度的因数
是b和c。a是与溶质有关的一个常量。此外,温度通过影响c,而影响A。符号A,表示物质对光的吸收程度。lg(I0/I1)式中I0是通过均匀的液体介质的一束平行光的入射光的强度;It是透射光强度;T是透射比。A值越大,表示物质对光的吸收越大。根据比尔定律,吸光度与吸光物质的量浓度c成正比,以A对c作图,可得到光度分析的校准曲线。
采用760CRT型双光束紫外可见光分光光度计。
试剂选用2%盐酸甲醇溶液:浓盐酸:99%甲醇(2:98)。
1.2 方法
1.2.1 样品处理
将含有花青素的树木鲜叶片去脉剪成1~2 mm碎片,随机取样,准确称量0.2 g,置于50 mL烧杯
中,加人10 mL 2%盐酸甲醇溶液浸泡,杯口用封口膜扎紧以防挥发,置室温避光处浸提2小时,至肉眼
观察叶组织完全变白取出过滤,用2%盐酸甲醇溶液定容至50 mL容量瓶中,于紫外可见分光光度计上
分析。
1.2.2 测定
在紫外可见光分光光度计上全波段扫描2%盐酸甲醇溶液浸提叶片的浸提溶液吸收光谱,结果表
明,紫外区最大吸收波长在280砌附近,可见光区域最大吸收波长在500~550砌内[引。其最大吸收波
长在530~535 I]/n处,在此采用波长530 nm条件下定量测定。用2%盐酸甲醇溶液作为空白对照,在紫外可见光分光光度计上,用1 em厚比色皿,在波长530 nln
处测定其吸光度(A)。
检查方法为:取本品,在20℃~25℃时加0.8%的氢氧化钠溶液制成每1ml中含有10mg的溶液,在530nm处测定,自加0.8%的氢氧化钠溶液起5分钟时,其吸光度不得超过0.12(供注射用)。
温度越高,放置的时间越长,吸光度越高。所以检查时应严格控制温度和放置的时间。
除以上项目外,盐酸四环素还需检查酸度、溶液的澄清度、热原和无菌。