牡蛎中的10%异丙醇-0.1mol/l盐酸1ml使溶解，怎么配制

原来是测接枝率的 碱溶液除了可以用NaOH外还可以用KOH。 0.05mol/L的NaOH和HCl是无法准确配得到的。还必须标定。 溶液可以这样配： (1)碱溶液：称20gNaOH溶于20mL水中用乙醇稀释到1000mL。 (2)盐酸溶液：量取5mL浓盐酸用异丙醇稀释到1000mL。 溶液配好后都要标定才行。碱液与酸分别用邻苯二甲酸氢钾和无水碳酸钠来滴定。 具体的滴定等操作可以参考这篇文献： http://web.hstc.edu.cn/xibu/huashengxi/LessonNet/fxhx/zy/11sy/11_4syyj/110407.pdf

HCl不是基准物质，不能直接配制标准溶液

以标称质量分数为36.5%，密度为1.19g/mL，物质的量浓度为11.9mol/L的浓盐酸为例

量取8.4mL的该浓盐酸，并用水定容到1L，得到浓度约为0.1mol/L的HCl溶液

再用Na2CO3基准物质配制Na2CO3标准溶液

以甲基橙为指示剂，用盐酸滴定碳酸钠溶液，之后根据消耗盐酸体积计算其实际浓度。

熔点（℃）-88.5

沸点（℃）80.3

相对密度（水=1）0.79

相对密度（空气=1）2.07

饱和蒸汽压（kPa） 4.40（20℃）

辛醇/水分配系数的对数值 <0.28

燃烧热（kJ/mol） 1984.7

折射率 1.3776

临界温度（℃）275.2

临界压力（MPa）4.76

溶解性：溶于水、醇、醚、苯、氯仿等多数有机溶剂。

危险性：

接触高浓度蒸汽出现头痛、倦睡、共济失调以及眼、鼻、喉刺激症状。

口服可致恶心、呕吐、腹痛、腹泻、倦睡、昏迷甚至死亡。长期皮肤

接触可致皮肤干燥、皲裂。

燃爆危险：本品易燃。

原来是测接枝率的 碱溶液除了可以用NaOH外还可以用KOH. 0.05mol/L的NaOH和HCl是无法准确配得到的.还必须标定. 溶液可以这样配： (1)碱溶液：称20gNaOH溶于20mL水中用乙醇稀释到1000mL. (2)盐酸溶液：量取5mL浓盐酸用异丙醇稀释到1000mL. 溶液配好后都要标定才行.碱液与酸分别用邻苯二甲酸氢钾和无水碳酸钠来滴定

    实验原理：

    胺类固化剂(伯胺、仲胺、叔胺)都是电子给予体，是碱性化合物，在两性或酸性溶剂中呈碱性反应。因此可利用其碱性，用酸标准溶液进行滴定来测定其含量。

    实验方法有以下两种:

    1.高氯酸-乙酸滴定法

    对于芳香胺、改性胺等碱性较弱的胺，在醇溶液中滴定时，终点变色不敏锐，滴定误差较大。采用高氯酸-乙酸滴定法则可获得更精确的结果（相关文献中实验结论说明此情况下盐酸-乙醇法滴定结果是偏低的），其原理为： 

RNH2+HClO4→RNH3+ClO4-

R2NH+HClO4→R2NH2+ClO4-

R3N+HClO4→R3NH+ClO4-

    2.盐酸-乙醇(或异丙醇等)滴定法

    此方法适用于碱性较大的脂肪胺，其原理为：

RNH2+HCl→RNH3+Cl-

R2NH+HCl→R2NH2+Cl-

R3N+HCl→R3NH+Cl-

一、高氯酸-乙酸滴定法

    1.仪器和试剂

    烘箱、分析天平(万分之一)、量筒(100 mL、10 mL)、锥形瓶(250 mL)、酸式滴定管、干燥器。

    70%高氯酸(分析纯)、冰乙酸(分析纯)、纯苯(分析纯)、醋酸酐(分析纯)、邻苯二甲酸氢钾(基准物)，甲基紫(指示剂)。

    2.配制溶液及指示剂

    指示剂：0.1%甲基紫冰乙酸溶液（变色蓝变紫，范围2-3）。

    溶  剂：体积比冰乙酸:纯苯=2:l。

    3.标准溶液的配制

    量取 70%高氯酸溶液 4.3 mL，溶于 500 mL冰乙酸中，然后再取醋酸酐 7.5 mL，分数次加入，摇动至混合均匀，放置过夜，使与高氯酸中含的水分反应，转变为醋酸，即为[c(HCl04)=0.1 mol/L(0.1N)]高氯酸标准溶液。

    4.标定3中的高氯酸标准液

    称取 0.2～0.3g 邻苯二甲酸氢钾（必须保证干燥恒重），准确至 0.0001g，置于干燥的锥形瓶中，加入 50 mL 冰乙酸，温热溶解，加入 3～4 滴甲基紫指示剂，用配制好的高氯酸标准溶液[c(HCl04)=0.1mol/L]滴定至溶液由紫色变为纯蓝色，即为终点。

    5.计算

    c(HCl04)=m/(V×0.2042)式中：

    c(HCl04)——高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；

    m——邻苯二甲酸氢钾的质量，g；

    V——消耗的高氯酸标准溶液体积，mL；

    0.2042——与 1.00 mL 高氯酸标准溶液[c(HCl04)=0.1 mol/L]相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。

    注：本溶液使用前标定。标定高氯酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。

    6.测定方法

    精确称取适量的样品，置于 250 mL 锥形瓶中，加入约 25 mL 冰乙酸一纯苯溶剂，摇动至完全溶解后(如样品不容易溶解时， 可稍微加热然后让它冷却到室温)，加入甲基紫指示剂 3～4 滴， 用[c(HCl04)=0.1mol/L]高氯酸标准溶液滴定至溶液由紫色转变成纯蓝色，即为终点。

    7.计算

    AN(mgKOH/g)=(cV×56.11)/m

    式中：C——高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；

    V——消耗的高氯酸标准溶液体积，mL：

    m——样品的质量，g；

    56.11——每摩尔氢氧化钾的质量。

二、盐酸-乙醇滴定法

    1.实验仪器：锥形瓶、滴定管

    2.试剂及溶液

    ①盐酸（分析纯）

    ②0.5摩尔每升盐酸异丙醇标准液：以2L容量瓶为准，先加1000mL异丙醇，再加85mL浓盐酸摇匀后用异丙醇溶液稀释至刻度。（用无水碳酸钠在溴甲酚绿钠盐为指示剂的情况下标定，原理同盐酸的标定）

    ③氢氧化钠（分析纯），0.5摩尔每升

    ④无水乙醇（基准试剂）

    ⑤溴甲酚绿钠盐指示剂：0.1g溴甲酚溶于100毫升水中，再加0.05摩尔每升的氢氧化钠溶液1毫升

    ⑥溴酚蓝：0.2g溴酚蓝溶于100毫升无水乙醇

    3.测定方法

    取适量样品于250mL锥形瓶中，加50mL无水乙醇在电炉上煮沸1min（除去游离氨的干扰），冷却至室温后，加入5滴溴酚蓝，用0.5摩尔每升盐酸异丙醇标准液滴定至黄色为终点。

    4.计算（同法一，C和V分别指盐酸异丙醇标准液的浓度及用量）

B 非直接滴定总胺的测定方法

    原理：利用氨基的乙酰化、氧化、与羰基反应生成西弗碱以及芳香胺的重氮化和亚硝化等方法来分别测定伯仲叔氨基相对含量的方法。

    测定方法：

    1.伯氨基含量的测定方法

    原理：主要是基于伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

    测定方法：①伯胺与醛或酮反应生成西弗碱和水，而仲胺和叔胺不发生此反应。测定生成的水量或所消耗的醛或酮的量，即可求出伯氨基的含量。

RNH2+R'CHO→RN=CHR'+H2O

    ②伯胺(主要是脂肪胺)与亚硝酸反应释出氮，而仲胺和叔胺与亚硝酸反应不释出氮。测定生成的N的体积，即可求出伯氨基含量。

RHN2+HNO2→ROH+H2O+N2↑

R2NH+HNO2→R2N-N=O+H2O

R3N+HNO2→R3N•HNO2

    2.叔氨基含量的测定方法

    在有伯胺、仲胺存在下，测定叔胺含量时，可先使伯胺及仲胺与乙酸酐反应，生成乙酰化产物，以排除伯胺及仲胺的影响。

    乙酰化产物不显碱性，不能被酸中和。而叔胺不能产生乙酰化反应，但它可以与乙酸反应：

R3N+CH3COOH→R3NH+CH3COO-

    该产物可用高氯酸-乙酸标准溶液滴定，过量的乙酸酐无干扰，有时可使终点更为敏锐。

R3NH+CH3COO-+HClO4→R3NH+ClO4-+CH3COOH

    3.仲氨基含量的测定方法

    原理：伯胺及仲胺与CS2反应牛成氨荒酸

酸值(acidnumber)每克原油被中和到滴定终点时氢氧化钾的用量，用mg/g(KOH)表示。

碱值(basenumber，也称为总碱值，TBN)滴定1g试样到滴定终点时酸的用量，用mg/g(KOH)表示。

强碱值(strongbasenumber，SBN)中和1g试样中的强碱性组分时酸的用量，用mg/g(KOH)表示。

方法提要

试样溶解在滴定溶剂中，在电位滴定仪上用氢氧化钾或盐酸的异丙醇溶液滴定。以电位计读数对滴定体积作图，取曲线的突跃点为滴定终点。

仪器和设备

电位滴定仪手动、自动均可，具有定时、定量滴加功能。

玻璃电极。

甘汞电极。

试剂

滴定溶剂 (测酸值用) 将 500mL 甲苯，250mL 四氢吠喃，5mL 水加到 245mL 异丙醇中，混合均匀。应在每天使用前测定空白值。

滴定溶剂 (测碱值用) 在一个棕色试剂瓶中，将 30mL 水加入到 1L 异丙醇中，充分混合后加入甲苯和三氯甲烷各 1L，再充分混匀。

氢氧化钾异丙醇标准溶液 0.1mol/L 和 0.2mol/L，需准确标定浓度。

盐酸异丙醇标准溶液 0.1mol/L 和 0.2mol/L，需准确标定浓度。

氯化钾电解液 饱和氯化钾水溶液。

缓冲溶液 (pH 4.00) 称取 10.21g 邻苯二钾酸氢钾，溶于新鲜蒸馏水中，稀释至 1L。

缓冲溶液 (pH 9.18) 称取 3.80g 硼砂，溶于蒸馏水，并稀释至 1L。

缓冲溶液母液 A 称取 24.20g 2，4，6-三甲基吡啶至已加有 100mL 异丙醇的 1L 容量瓶中。再量取 盐酸异丙醇标准溶液(c1是已标定的物质的量浓度)，在不断摇动中加入该容量瓶中，并用异丙醇稀释至容量瓶刻度，混合均匀，备用(有效期两周)。

缓冲溶液母液B称取27.8g±0.1g的间硝基苯酚，并加到已加有100mL异丙醇的1L容量瓶中。用250mL量筒量取 氢氧化钾异丙醇标准溶液(c2是已标定好的氢氧化钾异丙醇标准溶液的准确浓度)，在不断摇动下加入容量瓶中，再用异丙醇稀释至刻度，混合均匀。使用期为两周。

非水酸性缓冲溶液取10mL缓冲溶液母液A加入到100mL滴定溶剂中，使用期为lh。

非水碱性缓冲溶液取10mL缓冲溶液母液B加入到100mL滴定溶剂中，使用期为lh。

分析步骤

1)校准仪器。接通仪器电源，稳定1/2h。用pH4.00和pH9.18缓冲溶液，按电位滴定仪器说明书进行仪器校准。

2)非水缓冲溶液电位测定。将电极依次放在非水酸性和碱性缓冲溶液中，搅拌5min。该溶液温度与滴定试样的温度差不能大于2℃，读取各溶液电位值作为无拐点滴定曲线的滴定终点。

3)试样酸值的测定。根据试样酸值或碱值的强弱称取适量试样于150mL烧杯中，加入100mL滴定溶剂，放在电位滴定仪器上，搅拌至试样完全溶解。记录电位计最初的读数，在搅拌下以0.2mL/min的速度用0.1mol/L氢氧化钾异丙醇标准溶液进行滴定，当每滴定0.1mL电位值变化在30mV(相当于0.6pH)时，滴定速度要减慢至0.05mL/min，以此速度滴定至电位突跃或在步骤2)所测得的非水碱性缓冲溶液的电位值。滴定完毕，用溶剂将电极洗净，浸泡在蒸馏水中备用。按试样测定步骤，滴定100mL滴定溶剂的空白值。

4) 试样总碱值和强碱值的测定。按步骤 3) 操作，用 0.1mol / L 盐酸异丙醇标准溶液进行滴定至电位突跃或在步骤 2) 所测得的非水酸性缓冲溶液的电位值。

5) 试样的总酸值 (mg / g，KOH) 的计算:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:A为滴定试样到终点或非水碱性缓冲溶液电位值时，所用的0.1mol/L氢氧化钾异丙醇标准溶液体积，mLB为空白试验所用的0.1mol/L氢氧化钾异丙醇标准溶液体积，mLc2为氢氧化钾异丙醇标准溶液浓度，mol/Lm为试样的质量，g56.1为氢氧化钾的摩尔质量数值，单位用g/mol。

6)试样的总碱值或强碱值(mg/g，KOH)的计算:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:A为滴定试样至终点或非水酸性缓冲溶液电位值时，所消耗盐酸异丙醇标准溶液的体积，mLB为相应于A的空白值，mLc1为盐酸异丙醇标准溶液的浓度，mol/Lm为试样的质量，gC为滴定试样至非水碱性缓冲溶液电位时所消耗盐酸异丙醇标准溶液的体积，mLD为相应于C的终点进行空白滴定时所消耗氢氧化钾异丙醇标准溶液的体积，mLc2为氢氧化钾异丙醇标准溶液的浓度，mol/L。

准备试剂：异丙醇含0.3M盐酸胍的95%乙醇无水乙醇1%SDS。

操作步骤：

1.取沉淀DNA后剩余的上清，用异丙醇沉淀蛋白质。每使用1ml

TRIzol加1.5ml异丙醇，室温放置10分钟，2～8℃12000×g离心10分钟弃上清。

2.用含0.3M盐酸胍的95%乙醇洗涤蛋白质沉淀。每使用1mlTRIzol加2ml洗涤液，室温放置20分钟，2～8℃7500×g离心5分钟，弃上清，重复两次。用2ml无水乙醇同样方法再洗一次。

3.真空抽干蛋白质沉淀5～10分钟，用1%SDS溶解蛋白质，反复吸打，50℃温浴使其完全溶解，不溶物2～8℃10000×g离心10分钟除去。分离得到的蛋白质样品可用于Western

Blot或-5至-20℃保存备用。

注意事项：

1.蛋白质沉淀可保存在含0.3M盐酸胍的95%乙醇或无水乙醇中2～8℃一个月以上或-5至-20℃一年以上。

2.用0.1%

SDS在2～8℃透析三次，10000×g离心10分钟取上清即可用于Western

Blot。

常见问题分析：

得率低：

A.样品裂解或匀浆处理不彻底。

B.最后得到的蛋白质沉淀未完全溶解。

蛋白质降解：组织取出后没有马上处理或冷冻。

电泳时条带变形：蛋白质沉淀洗涤不充分。

由十六醇经溴素溴化后与三甲胺反应生成季铵盐。将三甲胺水溶液投入汽化釜中，加热至沸，产生的三甲胺气体经干燥后用丙酮吸收，在吸收塔中生成三甲胺丙酮溶液，使其进入季铵化釜。然后在搅拌下滴加溴代十六烷，二者摩尔比为1.10︰1。滴加过程中保温30～40℃，滴毕后再保温搅拌1 h。冷却结晶，得粗品，用丙酮洗涤，甩干，干燥得产品。