DNA可以被什么染料染色?
龙胆紫或醋酸洋红
还有碱性染料或改良苯酚品红溶液
DNA染色实验
1、原理与解析
(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。
(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。(同时甲基绿用二苯胺或龙胆紫代替做平行)
(3)盐酸的作用
① 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；
② 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。
注意事项
1.材料的选择
① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察；
② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)
2.取材要点
① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；
② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。
3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。
4.安全要点
① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。
5.换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。
主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例)
1.取材
① 滴： 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液；
② 刮： 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；
③ 涂： 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；
④ 烘： 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2.水解
① 解： 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解；
② 保： 将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。
3.冲洗涂片
① 冲： 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟；
② 吸： 用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4.染色
① 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟；
② 吸： 吸去多余染色剂；
③ 盖： 盖上盖玻片。
5.观察
① 低： 在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；
② 高： 转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。
2%甲基绿水溶液的配制
甲基绿（methyl green） 蒸馏水加至 50mlc 用三氯甲烷抽提， 甲基绿水溶液的抽提：甲基绿为绿色粉末，属三苯甲烷染料，这种染料是由氯代甲烷作用于结果晶紫而形成的一 种化合物。由于甲基化作用，甲基绿就比甲基绿后，所引进的甲基连接得并不牢固，容易从甲基绿中脱失。另一方面， 在甲基化过程中，还有一部分结晶紫并没有生成甲基绿，因此，也有人认为甲中，常有少量的甲基紫或结晶紫成份。但是，也有人认为甲基紫乃是甲基绿的衰败产物，甲基绿在储存过程中，会不断产生甲基紫。因此，在配制试剂时，必须 先将甲基绿所含的甲基紫或结晶紫抽提出来，才能使细胞核内的脱氧核糖核酸染成绿色。抽提方法是取 2%甲基绿水溶 液 20ml 倾入洁净分液漏斗，加入三氯甲烷 20ml 充分摇荡混合，使其内的甲基紫溶于三氯甲烷中而呈紫红色。旋动分液 漏斗下部的砂塞，慢慢把如此反复更换三氯甲烷，直到三氯甲烷无紫红色为止，即可得到得纯的甲基绿溶液。
英文名称：Methyl Green 分子式：C27H35Cl4N3Zn 分子量：608.78 IUPAC 名称： 4-((4-(dimethylamino)phenyl)(4-(dimethyliminio)cyclohexa-2,5-dieny lidene)methyl)-N-ethyl-N,N-dimethylbenzenaminium dichloride compound with zinc(II) chloride 甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水，显蓝绿色。 稍溶于乙醇，不溶于戊醇。 盐酸中显红黄色，在氢氧化钠中无色。试剂溶液在可见光区有吸收峰 (λmax=633.8nm)。 与 ReO4-、HgCl42-、BiI4-、AuCl4-和 GaCl4-等形成离子缔合物。 用于光度法测定 Hg2+、ReO4-等，定性检出铁氰化物，酸碱指示剂和细 胞染色剂。
甲基绿为碱性染料，它易与聚合程度高的 DNA 结合呈现绿色。 又称双绿 SF 双绿 SF。绿色晶体，具金黄色光泽，或淡绿色粉末。溶于水，呈蓝 绿色。微溶于乙醇，不溶于乙醚。 由氯甲烷与甲基紫(C.I.碱性紫 1)反应制得。 商品通常为锌复盐 C26H33N3Cl2ZnCl2(称 C.I.碱性蓝 20)。 用于细菌染色(新鲜标本细胞核染色)甲基绿-盐酸混合物用于检定精子、 淋球菌和肥大细胞染色。 甲基绿可用于鉴定 DNA。DNA 遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。 甲基绿—派洛宁 （methyl green-pyronin）为碱性染料，它分别能与细胞内的 DNA、RNA 结合呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿与染色质中 DNA 选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的 RNA 选择性结 合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核 酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。
甲基绿易与聚合程度高的 DNA 结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的 RNA 结合呈现红色（但解聚的 DNA 也能和派洛宁结合呈现红色）。即 RNA 对派洛宁亲和力大，被染成红色， 而 DNA 对甲基绿亲和力大，被染成绿色。
使用配制方法 关于吡罗红和甲基绿分装粉的使用方法 试剂及配制方法（ 1） 试剂 ） 质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液，质量分数为 8%的盐酸，乙酸钠，乙酸， 蒸馏水，吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉， 可以分别购买甲基绿和吡罗红 G，然后按 A 液的第二种方法配制（见下文）。（ 2） 染色剂的配制 ） ①染色剂 A 液的两种配制方法 第一种方法：取吡罗红甲基绿粉 1 g，加入到 100 mL 蒸馏水中溶解，然 后用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。 第二种方法：取甲基绿 2 g 溶于 98 mL 蒸馏水中，取吡罗红 G 5 g 溶于 95 mL 蒸馏水中。取 6 mL 甲基绿溶液和 2 mL 吡罗红溶液加入到 16 mL 蒸馏 水中，即为 A 液，放入棕色瓶中备用。（注意：用于核酸染色的是吡罗红 G， 请不要错买吡罗红 B。） ②染色剂 B 液的配制方法 B 液是一种缓冲液， 由乙酸钠和乙酸混合而成。 先取乙酸钠 16.4 g，用蒸馏水溶解至 1 000 mL 备用；再取乙酸 12 mL，用蒸 馏水稀释至 1 000 mL 备用。取配好的乙酸钠溶液 30 mL 和稀释的乙酸 20 mL， 加蒸馏水 50 mL，配成 pH 为 4.8 的 B 液（缓冲液）。 ③染色剂的配制 染色剂是由 A 液、B 液混合配制而成的。取 A 液 20 mL 和 B 液 80 mL 混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是 该试剂应现配现用
综述：
真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。
甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。
用甲基绿，吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。同时甲基绿用二苯胺或龙胆紫代替做平行。
脱氧核糖核酸是分子结构复杂的有机化合物。作为染色体的一个成分而存在于细胞核内。功能为储藏遗传信息。DNA 分子巨大，由核苷酸组成。核苷酸的含氮碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶及胸腺嘧啶戊糖为脱氧核糖。
1953 年美国的沃森(James Dewey Watson)、英国的克里克与韦尔金斯描述了 DNA 的结构:由一对多核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕构成。
糖 -磷酸链在螺旋形结构的外面，碱基朝向里面。两条多核苷酸链通过碱基间的氢键相连，形成相当稳定的组合。
分子编码中使用的遗传指令所有已知生物的发展和运作。
二苯胺与DNA反应的本质：DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，后者与二苯胺试剂反应生成蓝色物质。
二苯胺的乙醇溶液加入9体积的浓硫酸（形成强酸性溶液）配制成二苯胺试剂，本试剂遇硝酸盐或硝酸产生蓝色的苯胺蓝沉淀，可用于鉴定硝酸盐。
扩展资料：
二苯胺试剂：
A液：1.5克二苯胺溶于100ml冰醋酸中，再加1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈结晶状态，则需加温后待其熔化再使用。
B液：体积分数为0.2%的乙醛溶液(CH3CHO)。
配制：将0.1mlB液加入10mlA液中，煮沸观察显色。
合成方法：
1、苯胺盐酸盐法：由苯胺与苯胺盐酸盐缩合而得。
2、三氯化铝催化法：以苯胺为原料，三氯化铝为催化剂，经缩合反应而得。
3、苯酚缩合法：采用HD92催化剂，由苯酚与苯胺缩合而得。
4、苯胺以无水三氯化铝为催化剂，进行缩合反应。反应产物经盐酸盐析、氢氧化钠中合、煮洗、真空蒸馏、用乙醇结晶、分离即得成品。
5、工业二苯胺经精制制得。
6、用氰化钾洗涤工业二苯胺，与铁、其他金属络合后，与二苯胺分开。
7、在氮气流中把二苯胺减压蒸馏即得成品。
参考资料来源：百度百科-二苯胺
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤：
1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min
2．溶解DNA：
3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢
4．过滤：取黏稠物
5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min
6．过滤：取滤液。
7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min
8．DNA的鉴定：沸水浴5min
大学：
DNA提取分为三个基本步骤，每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。
利用研磨或者超声破碎细胞，并通过加入去污剂以除掉膜脂。
加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚/氯仿抽提，以除掉细胞内的蛋白，如与DNA结合的组蛋白。
将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀，因为DNA在醇中不可溶而黏在一起，这一步也能除掉盐分。
另外，目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。
2.细胞的破碎
细菌有坚硬的细胞壁，首先要破碎经胞。方法有三种①机械方法：超声波处理法、研磨法、匀浆法②化学试剂法：用SDS处理细胞③酶解法：加入溶菌酶或蜗牛酶，都可使细胞壁破碎。
3.DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
A. 利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
B. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
C.以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA. （2）.阴离子去污剂法用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA
（3）.苯酚抽提法：苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态
（4）.水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
结果就是得到DNA
使用苯酚抽提细胞 DNA 时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了 DNase 的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相.
氯仿的作用是克服酚的缺点；加速有机相与液相分层.最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的迹量酚.（酚易溶于氯仿中）
用酚-氯仿抽提细胞基因组 DNA 时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡.异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡 产生.另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定.
原理不知道，从现象上看，蛋白成为絮状沉淀，且不能复原。所以我猜主要是破坏水化层，从而破坏蛋白胶体的稳定，进而破坏其三级结构
分子间氢键就是说氢键形成在两个分子的基团之间,如水（一个水分子的氧和另一个水分子的氢形成氢键）.
分子内氢键使得溶沸点降低,分子间氢键使得溶沸点升高.像邻二苯酚的溶解度就明显小于对二苯酚,因为邻二苯酚有分子内氢键,增大了分子的对称性,而且减小了分子间作用力；而对二苯酚有分子间氢键,溶解后对二苯酚分子会和水分子形成氢键,增加了对二苯酚分子与水分子的结合程度,从而增大了溶解度.
其实按说应该是都要考虑的,但有两点: 1.一般无机物分子很少存在分子内氢键,所以大多时候没有考虑的必要. 2.在中学阶段比较熔沸点时没有讲到分子内氢键的影响. 所以在研究结构很简单的物质时可以不考虑分子内氢键,只看范德华力和分子间氢键.
1、苯酚的硝化反应
C₆H₅O⁻+CO₂+H₂O = C₆H₅OH+HCO₃⁻
2、苯酚与甲醛的反应，本质为缩聚反应，生产中用于制酚醛树脂。
C₆H₅OH + HCHO → C₆H₃OHCH₂ + H₂O
3、苯酚与溴的反应，生成三溴苯酚。
3Br₂+C₆H₅OH → (C₆H₅OH ) Br₃+3HBr
4、苯酚与氢氧化钠发生反应，生成苯酚钠和水。
C₆H₅OH +NaOH→C₆H₅ONa+ H₂O
苯酚的物理性质：苯酚在室温下微溶于水，能溶于苯及碱性溶液，易溶于乙醇、乙醚、氯仿、甘油等有机溶剂中，难溶于石油醚。
扩展资料
苯酚的使用：
1、苯酚常用于测定硝酸盐、亚硝酸盐及作有机合成原料等。 苯酚工业生产以异丙苯法为主，该法具有产品纯度高、原料和能源消耗低等优点，但其发展受联产物丙酮的制约。
2、苯酚是重要的有机化工原料，用它可制取酚醛树脂、己内酰胺、双酚A、水杨酸、苦味酸、五氯酚、己二酸、酚酞n-乙酰乙氧基苯胺等化工产品及中间体，在化工原料、烷基酚、合成纤维、塑料、合成橡胶、医药、农药、香料、染料、涂料和炼油等工业中有着重要用途。
3、苯酚还可用作溶剂、实验试剂和消毒剂,苯酚的水溶液可以使植物细胞内染色体上蛋白质与DNA分离，便于对DNA进行染色。
参考资料来源：百度百科-苯酚
剧烈振荡可使DNA断裂，故操作时应尽量轻柔、缓慢地颠倒混匀。
要获得高纯度DNA，可加入蛋白酶K降解蛋白质。
DNA在260nm处有一吸收峰，而蛋白质在280nm处有吸收峰。当纯度比值小于1.6时，应考虑进行再次纯化。
整个实验须接触多种有毒、有腐蚀性试剂，故应注意操作规范安全。
