高中生物实验改良的苯酚品红溶液将染色体染成什么颜色

从配法上看，有效成分是碱性品红、苯酚，还有乙醇、甲醛、乙酸、山梨醇等

配方：

先配成3种原液，再配成染色液。

原液A：取3g 碱性品红溶于 100ml 的 70％乙醇中（可长期保存）。

原液B：取原液 A 10ml，加入 90ml 的 5％苯酚水溶液（限2周内使用）。

原液C：取原液 B 45ml，加冰乙酸和福尔马林（37％甲醛）各6ml（可长期保存）。

染色液：取原液C10～20ml，加 45％的乙酸 80～90ml，再加山梨醇 1.8g 即可

准备材料：洋葱、培养皿、蒸馏水、广口瓶、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液。 

一、培养根尖。将洋葱放入装满蒸馏水的广口瓶中，洋葱底部接触水

二、低温诱导。放入冰箱，将整个装置放入冰箱的低温室（4℃）内，诱导培养36小时

三、固定细胞形态。剪去诱导处理的根尖约0.5-1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时，以固定细胞的形态

四、用体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液冲洗2次

五、将处理好的根尖放在玻片上

六、滴改良苯酚品红染液，着色3-5分钟

七、制片完成后，将玻片放入显微镜下观察

八、在显微镜下可以观察到，染色体数目加倍，低温可以诱导植物细胞中的染色体数目加倍

也被称为改良苯酚品红改良苯酚品红。

被称为前三种涂料，相映成染色液的制备方法。原液A：以：碱性品红克（长期保存）溶解在100毫升70％乙醇中。库存溶液B：采取原液A10ml，加入90ml的5％石炭酸水溶液（限2周）。原液C：取原液B45ml，冰乙酸和福尔马林（37％甲醛），6毫升（长期保存）。染色溶液：涂料C10??20ml中，90毫升加45％醋酸和80多个山梨醇1.8克，配成的10％至20％的苯酚品红溶液，一般两个星期后着色能力显著增强。淡染或延长染色浓度为2?10％的可用的，防污染色液的浓度可以根据需要改变，可使用的浓度为30％，然后45％的乙酸的分离。 （山梨糖醇辅助剂稳定的染色解决方案，而山梨糖醇也略差，但着色效果。）

作用原理

该解决方案的优势，方便醋酸洋红染色，但也Schiff试剂的优势，核和染色体染色，染色效果可靠。该解决方案是适用于各种大小的动物和植物的染色体染色体和减数分裂染色体，具备相当雄厚的染色性能，室温保存两年不变质。随着卡诺的解决方案通过类似的。

2、固定：卡诺氏固定液12-24小时，然后70%的酒精中4℃冰箱保存。

3、解离：从固定液中取出根尖，用蒸馏水洗3次，每次5min，然后用1M盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）60℃解离8-10min，再用蒸馏水洗一次。

4、染色：切取乳白色的分生区组织滴一滴石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，染15min。

5、压片，防止气泡产生。

6、镜检。

7、永久封片，利用指甲油、中性树胶等制作永久封片。

原理是芽胞壁较厚，通透性低而不易着色，但芽胞一旦着色就很难被脱色。因此，先用着色能力强的染液（如孔雀绿或石炭酸复红）在加热条件下染色，使染料既可进入菌体也可进入芽胞，水洗脱色时菌体中的染料被洗脱，而芽胞中的染料仍保留。再用对比度大的复染剂染色后，菌体染上复染剂颜色，而芽胞仍为原来的颜色，这样两者区别开来。

细菌夹馍染色注意事项：

1. 加盖玻片时不可有气泡，否则会影响观察。

2. 应用干墨水法时，涂片要放在火焰较高处并用文火干燥，不可使玻片发热。

3. 在采用Tyler法染色时，标本经染色后不可用水洗，必须用20%CuSO4冲洗。

细胞芽孢染色的注意事项：

1.选用适当菌龄的菌种，幼龄菌尚未形成芽孢，而老龄菌芽孢囊已经破裂。

2.加热染色时必须维持在染液冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽孢囊破裂，加热不够则芽孢难以着色。

荚膜染色步骤：

1.涂片：在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水（或用接种环挑1-2滴水），用无菌的接种环挑取少量菌种与水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜，涂布面积约1cm2 。

2.干燥：涂片在室温下使其自然干燥，也可以小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。

3.固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过微火三次（手指触摸反面不烫手为宜），待玻片冷却后，再加染色液。

4.染色：玻片置于玻片搁架上，加适量（以盖满菌膜为度）草酸铵结晶紫（或石炭酸复红染液）于菌膜部位，染色1-2min。

5.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头（或洗瓶）下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

6.干燥：自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水，用吸水纸时切勿将菌体擦掉。

7.镜检：用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图于记录表中

芽孢染色步骤：

方法1

（1）将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。

（2）滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。

（3）用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5分钟。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约7．6%）染10分钟。

（4）倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。

（5）用番红水溶液复染1分钟，水洗至水为无色。

（6）待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色

方法2

（1）取二支洁净的小试管，分别加入0．2ml无菌水，再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔，另 一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔，两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。

（2）在菌悬液中分别加入0．2ml苯酚品红溶液，充分混合后，于沸水浴中加热3—5分钟。

（3）用接种环分别取上述混合液2—3环于两片载玻片上，涂薄，风干后，将载玻片稍倾斜于烧杯上，用95%乙醇冲洗至无红色液流出。

（4）再用自来水冲洗，滤纸吸干。

（5）取1—2接种环黑色素溶液于涂片处，立即展开涂薄，自然干燥后，油镜观察，在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。

①洋葱幼根的培养：于实验前3～4d，将洋葱鳞茎置于烧杯口之上，烧杯内盛满清水，使洋葱鳞茎的下部浸入水中，注意每天换水，3－5天后，即可长出白色幼根。

②材料的固定和离析：剪取根端0.5cm，立即投入盛有一半浓盐酸和一半95%酒精的固定离析液中浸泡幼根，10－20分钟后用镊子将材料取出，放入蒸馏水中漂洗10－20分钟。

③压片：取经过固定离析、洗净的洋葱根尖一个，切取根顶端（生长点部分）1～2mm，放在载玻片上，用镊子压裂，滴一滴改良苯酚品红染色液，放置5～10min，再加45％的冰醋酸，盖上盖玻片，以一小块吸水纸放在盖玻片上。左手按住载玻片，用右手拇指在吸水纸上对准根尖部分轻轻挤压，将根压成均匀的薄层。用力要适当，不能将根尖压烂，并且在用力过程中不要移动盖玻片。或用吸管的橡皮头对准材料所在位置，隔着盖玻片轻轻加以敲击，使材料压成均匀的一层细胞。

④镜检：将制好的压片放在显微镜下检查，与前面观察的洋葱根源永久装片进行对比，注意有何不同。

对于实验观察没区别，两者的作用效果是一样的。

醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。

在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。

扩展资料：

1、作为染色剂必须具备两个条件：一是具有颜色；二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的，产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。

2、染色质(体)容易被碱性染料染成深色。实验中对染色质(体)进行染色，须使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂，这些染色剂是以龙胆紫或醋酸洋红溶解于醋酸溶液中制得，配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性)。

3、改良苯酚品红染液配法顺序如下： 原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中，此液可以长期保存。原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C：取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。

染色液：取C液10-20毫升，加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。放置2周后使用，染色效果显著，可普遍用于植物组织的压片法和涂片法，使用2-3年不变质。

山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用。如果没有山梨醇，也能染色，但效果稍差。改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效，简易节约的优点。

4、在涂抹法与压碎法中，醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和，再加入微量的铁离子，便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时，洋红将核或染色体染成红色。PH呈酸性。

参考资料来源：百度百科-龙胆紫溶液

参考资料来源：百度百科-苯酚品红染液

参考资料来源：百度百科-醋酸洋红