pH= 9.6 苯酚钠缓冲液如何配置

酚酞指示剂(0.5%酚酞乙醇溶液)：取0.5g酚酞，用95％乙醇溶解，并稀释至 100mL，无需加水。

酚酞溶液是一种酸碱指示剂。 酚酞是一种弱有机酸，在pH＜8.2的溶液里为无色的内酯式结构，当8.2醌式结构。 酚酞的变色范围是 8.2 ～ 10.0，所以酚酞只能检验碱而不能检验酸。

脲酶试验原理：

存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。脲酶的作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和碳酸。土壤脲酶活性，与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。

土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法是测定生成的氨量。

试剂：1）甲苯

2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。

3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释至1000毫升。

4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A），存于冰箱中；27克NaOH溶于100毫升水（B）。将AB溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。

5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。

6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的标准液

标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液10ml，定容至100ml，即稀释了10倍，吸取1，3，5，7，9，11，13ml移至50ml容量瓶，加水至20ml，再加入4ml苯酚钠，仔细混合，加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟,用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。

取新鲜土壤7份，每份30g，装于棕色广口瓶中，先将1，3－二氯丙烯溶于丙酮（定量），6份分别加入不同浓度均为1.5ml的1，3－二氯丙烯，使之在土壤中的浓度分别为1、10、50、100、200、500µg/g，另1份相应加入1.5ml的丙酮作为对照，然后调节土壤的含水量至最大田间持水量的60%（记录此时重量，以便补充水分）。放置于25℃恒温培养箱，培养后第0d、1d，5d，10d（前10d密封，后来测定的敞口）、20d，30d，40d，50d分别取土样检测脲酶的活性。取样前，反复旋转广口瓶，混匀土样，一个处理随机取3个重复。

1) 称取5g过1mm筛的风干土样于100ml容量瓶中。

2) 向容量瓶中加入1ml甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟

3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml柠檬酸缓冲液（PH6.7），并 仔细混合

4) 将容量瓶放入37摄氏度恒温箱中，培养24h

5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。

6) 显色：吸取3ml滤液于50ml容量瓶中，加入10ml蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml苯酚钠，仔细混合，再加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现（青定）酚的蓝色。

7) 1h内在（（青定）酚的蓝色在1h内保持稳定）在分光光度计上用1cm液槽，于578nm处将显色液进行比色测定。

8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照

9)无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。

结果计算：土壤脲酶活性以24小时后100g土壤中NH3－N的毫克数表示。

M＝（X样品－X无土－X无基质）*100*10

式中：M－土壤脲酶活性值

X样品――样品实验的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数

X无土――无土对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数

X无基质――无基质对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数

100 ――样品定容的体积与测定时吸取量的比值

10 ――酶活性单位的土重与样品土重之比值

注意事项：当脲酶活性为3-80微克NH3-N时，本法能获得可靠结果。当脲酶活性小于3微克NH3-N，培养时间需增至24小时（已经24h了）（计算时应考虑这一点）

计算：脲酶活性以24h后1g土壤中NH3-N的mg数表示。

NH3-N（mg）＝a*2

A：从标准曲线查得NH3-N毫克数

2 ：换算成1k土的系数。

用硫酸使苯磺化得苯磺酸，再用亚硫酸钠使苯磺酸中和成苯磺酸钠，后者经过NaOH碱熔生成苯酚钠2、氯苯法

用10％～15％的氢氧化钠溶液，在360～390℃、28～30MPa条件下将氯苯水解生成苯酚钠

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苯酚钠，苯氧基钠，Sodium phenolate；Sodium phenoxide ；国标编号：83013 CAS号 139-02-6 ，苯酚呈弱酸性，在常温下与NaOH反应，能生成苯酚钠。

中文名

苯酚钠

英文名

sodium phenolate

别称

苯氧基钠

化学式

C6H5ONa

分子量

116.09

CAS登录号

139-02-6

EINECS登录号

205-347-3

水溶性

易溶

密度

0.898 g/cm3

外观

无色针状结晶

闪点

28℃

应用

防腐剂、有机合成中间体，在防毒面具中用以吸收光气。

危险性符号

R34：会导致灼伤。

目录

1 物化性质

2 安全信息

3 储存条件

4 处理方法

5 包装运输

6 处理措施

7 环境影响

8 防护措施

物化性质

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苯酚在通常温度下是固体，与钠较难发生反应，如果采用加热熔化苯酚，再加入金属钠的方法进行实验，苯酚易被氧化，在加热时苯酚颜色发生变化而影响实验效果。本人在教学中采取下面的方法实验，操作简单，取得了满意的实验效果。在一支试管中加入2～3毫升无水乙醚，取黄豆粒大小的一块金属钠，用滤纸吸干表面的煤油，放入乙醚中，可以看到钠不与乙醚发生反应。然后再向试管中加入少量苯酚，振荡，这时可观察到钠在试管中迅速反应，产生大量气体。这一实验的原理是苯酚溶解在乙醚中，使苯酚与钠的反应得以顺利进行。

分子式 C6H5ONa

分子量 116.10

无色易潮解的针状结晶蒸汽压熔 点溶解性：溶于水、乙醇密 度稳定性：稳定危险标记 20(腐蚀品)主要用途：用作防腐剂、有机合成中间体，在防毒面具中用以吸收光气　【苯酚、苯酚钠与碳酸、碳酸钠的反应】

苯酚的酸性强于碳酸氢根（苯酚的Ka大于碳酸的Ka2），所以苯酚可以溶解于碳酸钠溶液中，生成碳酸氢钠和苯酚钠，而碳酸氢钠溶解度在同等温度下小于苯酚钠，因为可用重结晶法将苯酚钠与碳酸氢钠分离。

而苯酚的酸性又小于碳酸（苯酚的Ka小于碳酸的Ka1），所以往苯酚钠溶液中吹入二氧化碳，又可以得到碳酸氢钠和苯酚，苯酚在65度以下溶解度极小，所以溶液变浑浊。

安全信息

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安全说明: S26：万一接触眼睛，立即使用大量清水冲洗并送医诊治。

S36/37/39：穿戴合适的防护服、手套并使用防护眼镜或者面罩。

危险类别码: R34：会导致灼伤。

储存条件

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可燃，其粉体与空气混合，能形成爆炸性混合物。储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。包装要求密封，不可与空气接触。应与氧化剂、酸类分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物职业接触限值(中国)未制定标准职业接触限值(美国)未制定标准监测方法火焰原子吸收光谱法工程控制严加密闭，提供充分的局部排风。提供安全淋浴和洗眼设备呼吸系统防护可能接触其粉尘时，必须佩戴过滤式防尘呼吸器。紧急事态抢救或撤离时，佩戴空气呼吸器眼睛防护戴化学安全防护眼镜身体防护穿橡胶耐酸碱服手防护戴橡胶手套其它防护工作现场禁止吸烟、进食和饮水。

处理方法

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废弃物性质危险废物废弃处置方法用控制焚烧法处理，如使用旋转炉式，温度控制在820～1600℃；如使用流动床式，温度控制在450～980℃。根据国家和地方有关法规的要求处置。或与制造商联系，确定处置方法废弃注意事项处置前应参阅国家和地方有关法规。

包装运输

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包装标志腐蚀品；有毒品包装方法小开口钢桶；塑料袋或二层牛皮纸袋外全开口或中开口钢桶；螺纹口玻璃瓶、铁盖压口玻璃瓶、塑料瓶或金属桶(罐)外普通木箱；螺纹口玻璃瓶、塑料瓶或镀锡薄钢板桶(罐)外满底板花格箱、纤维板箱或胶合板箱运输注意事项铁路运输时应严格按照铁道部《危险货物运输规则》中的危险货物配装表进行配装。起运时包装要完整，装载应稳妥。运输过程中要确保容器不泄漏、不倒塌、不坠落、不损坏。严禁与氧化剂、酸类、食用化学品等混装混运。运输时运输车辆应。

处理措施

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1.呼吸系统防护：高浓度环境中，应该佩带防毒面具。紧急事态抢救或逃生时，佩带自给式呼吸器。眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。防护服：穿相应的防护服。手防护：戴防化学品手套。其它：工作现场禁止吸烟、进食和饮水。工作后，彻底清洗。单独存放被毒物污染的衣服，洗后再用。注意个人清洁卫生。皮肤接触：脱去污染的衣着，立即用水冲洗至少15分钟。就医。

2.眼睛接触：立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。就医。吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。必要时进行人工呼吸。就医。食入：患者清醒时立即漱口，给牛奶、蛋清、植物油等口服，催吐，

环境影响

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一、健康危害

侵入途径：吸入、食入。

健康危害：本品具有强刺激性。吸入后可引起肺水肿。溅入眼内，引起眼灼伤。皮肤接触造成灼伤。口服腐蚀消化道，造成严重灼伤，出现腹痛、呕吐、血样便。中毒后可继发肾损害。

二、毒理学资料及环境行为

危险特性：遇明火、高热或燃。与强氧化剂可发生反应。受高热分解放出有毒的气体。

燃烧(分解)产物：一氧化碳、二氧化碳、氧化钠。

3.现场应急监测方法:

4.实验室监测方法:

气相色谱法(EPA方法 8040、604)

色谱/质谱法(EPA方法 8250、8270、625)

5.环境标准:

6.应急处理处置方法:

防护措施

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一、泄漏应急处理

隔离泄漏污染区，周围设警告标志，建议应急处理人员戴好防毒面具，穿化学防护服。不要直接接触泄漏物，用洁清的铲子收集于干燥净洁有盖的容器中，运至废物处理场所。也可以用大量水冲洗，经稀释的洗水放入废水系统。如大量泄漏，收集回收或无害处理后废弃。

二、防护措施

呼吸系统防护：高浓度环境中，应该佩带防毒面具。紧急事态抢救或逃生时，佩带自给式呼吸器。

眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。

防护服：穿相应的防护服。

手防护：戴防化学品手套。

其它：工作现场禁止吸烟、进食和饮水。工作后，彻底清洗。单独存放被毒物污染的衣服，洗后再用。注意个人清洁卫生。

三、急救措施

皮肤接触：脱去污染的衣着，立即用水冲洗至少15分钟。就医。

眼睛接触：立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。就医。

吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。必要时进行人工呼吸。就医。

食入：患者清醒时立即漱口，给牛奶、蛋清、植物油等口服，催吐，就医。

灭火方法：雾状水、二氧化碳、砂土、泡沫、干粉。