细菌在无水乙醇中能否存活

你好，无水乙醇用来杀菌消毒，不过必须进行稀释。由于酒精的杀菌过程原理特殊，因此只有75%浓度的酒精才可以杀菌，将无水乙醇和水以3：1的比例进行调配搅拌，就可以用稀释液进行消毒杀菌了。乙醇是一种有机物，俗称酒精，化学式为CH3CH2OH(C2H6O或C2H5OH)或EtOH，是带有一个羟基的饱和一元醇，在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体，它的水溶液具有酒香的气味，并略带刺激。乙醇的用途很广，可用乙醇制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70%-75%的乙醇作消毒剂等，在国防工业、医疗卫生、有机合成、食品工业、工农业生产中都有广泛的用途，望采纳。

燃料、化工原料、有机溶剂、酿酒，70%～75%乙醇溶液可作消毒剂。

无水乙醇在生物学中的用途：叶绿体中的色素能在有机溶剂无水乙醇（或丙酮）中，所以用无水乙醇可以提取叶绿体中的色素。

（2）由乙烯直接催化水合而成。最后，说一下它的用途：1.用途 用作自助火锅燃料、野外旅游燃料等

2.用途 常用作分析试剂，也用于制药工业

3.用途 抽提溶剂；载色剂；香料溶剂；增香剂；防腐剂。GB 2760-96规定为食品加工助剂。

4.用途 广泛用于1,6-己二醇 、合成1.4丁炔二醇 、合成2,3-丁二醇 等有机合成工业

5.用途 是重要的基础化工原料之一，广泛用于有机合成、医药、农药等行业，也是一种重要的有机溶剂

6.用途 用作制饮料酒，用于食品工业

7.用途 用作基本有机化工原料，也用作有机溶剂,制饮料酒，食品工业

8.用途 乙醇是重要的有机溶剂，广泛用于医药、涂料、卫生用品、化妆品、油脂等各个方法，占无水乙醇总耗量的50%左右。乙醇是重要的基本化工原料，用于制造乙醛、2-噻吩乙醇 、2-溴乙醇 、4-硝基苯硫醇 、2-萘硫醇 、D-泛醇 等等，并衍生出医药、染料、涂料、香料、合成橡胶、洗涤剂、农药等产品的许多中间体，其制品多达300种以上，但目前乙醇作为化工产品中间体的用途正在逐步下降，许多产品例如D-山梨醇 、DL-氨基丙醇 、苯甲醇 已不再采用乙醇作原料而用其他原料代替。75%的乙醇水溶液具有强杀菌能力，是常用的消毒剂。经过专门精制的丙炔醇 也可用于制造饮料。与胆固醇 类似，乙醇可作能源使用。有的国家已开始单独用DL-泛醇 作汽车燃料或掺到汽油（10%以上）中使用以节约汽油。

乙醇也是重要的基本化工原料，用于制造乙醛、乙二烯、乙胺、乙酸乙酯、乙酸、氯乙烷等等，并衍生出医药、染料、涂料、香料、合成橡胶、洗涤剂、农药等产品的许多中间体，其制品多达300种以上，乙醇作为化工产品中间体的用途正在逐步下降，许多产品例如乙醛、乙酸、乙基乙醇已不再采用乙醇作原料而用其他原料代替。75%的乙醇水溶液具有强杀菌能力，是常用的消毒剂。不过目前还是以用于医疗方面为主，稀释后可以分为95%乙醇、75%乙醇，其中75%乙醇就是医用酒精。

经过专门精制的乙醇也可用于制造饮料。与甲醇类似，乙醇可作能源使用。有的国家已开始单独用乙醇作汽车燃料或掺到汽油（10%以上）中使用以节约汽油。

储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

下午好，酒精是无水乙醇可以工业制取也可以通过微生物发酵工艺酿造而成，它的醇羟基对于很多微生物外壳有抑制能力一般无法直接分解利用并非营养源，可能有某些特殊细菌拥有像活性脱氢酶那样的分解能力不常见。二级产物乙醛和乙酸也都对很多菌种有灭杀作用。

试验材料

醋醅 采用陕西杨陵当地产水柿 经打浆

后罐装 置于 30 培养箱中 7 d 后柿浆的含酸量

开始上升 于 7 11 15 20 d 时取发酵正常的醋醅

分离培养基

溴甲酚紫显色平板 葡萄糖

1% 酵母膏 1% 无水乙醇 4% 体积分数 0.04%

溴甲酚紫 5% 体积分数 琼脂 2% 水 100 mL 0.1

MPa 灭菌 20 min 后 当培养基温度降到 75 时加

入乙醇

分离方法

采用溴甲酚紫作指示剂 根据

有无变色圈 黄色 来判断是否产酸 若有黄色变

色圈 说明产酸 可能为醋酸菌 再做定性试验 直

到分离出醋酸菌

保藏培养基

葡萄糖 1% 酵母膏 0.5%

琼脂 2% 丙三醇 2.5 水 100 mL 121 灭菌 20

min 备用

产酸培养基

葡萄糖10 g/L， 酵母膏10 g/L

pH 5.5，分装于500 mL三角瓶，每瓶100 mL，121 ℃

灭菌20 min，使用前加入7%（v/v）无水乙醇。

发酵培养基

葡萄糖10 g/L， 酵母膏10 g/L

磷酸二氢钾0.5 g/L， 硫酸镁0.5 g/L， pH 5.5， 121 ℃

灭菌20 min，冷却至60 ℃以下加入10%（v/v）无

水乙醇。

在30 ℃， 100 r/min摇床培养3 天

微生物细胞含大量水分（一般在80%~90%以上） ，绝大多数必须染色，才能显微镜观察。

借助物理因素和化学因素的作用进行

细菌的 等电点较低，pH在2~5之间 ，故在中性、碱性、弱酸性溶液中，<u>菌体蛋白质</u>电离后带 负电荷 ；而碱性染料电离时<u>染料离子</u>带 正电 。

所以，细菌学上常用 碱性染料 染色。

染色操作程序：<u>制片→固定→媒染→染色→脱色→复染→水洗→干燥→镜检</u>

主要依据：

油浸物镜、观察完毕、<u>先用擦镜纸</u>擦去镜头上的油、在用擦镜纸蘸少许 乙醚乙醇混合液（乙醚2份、无水乙醇3份）or二甲苯 ，擦去残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2~3下（朝一个方向）

普通光学显微镜<u>不能观察细胞和细菌的亚结构。</u>

设计原理： 丁达尔现象

光源的中央光束被阻挡、散射的光线投入物镜、整个视野是黑暗的。

暗视野中观察到的是 被检物体的衍射光图像 、并非物体本身、所以只能看到物体的 存在和运动 ，（ 不能 辨清物体的 细微结构 ）。用于→未染色标本的<u>活的</u>细菌、真菌，并可观察活细胞内的 线粒体及细菌鞭毛的运动 。观察 螺旋体 时多用暗视野显微镜。

暗视野聚光器→显微镜的聚光器支架上、显微镜灯照明， 聚光器和标本片之间要加一滴<u>香柏油</u> 。目的：避免聚光镜全反射。

将光线通过透明标本细节产生的 光程差（相位差）转化为光强差 的特种显微镜。

适用于对<u>活体细胞生活状态下的生长、运动、增殖情况及 细微结构 </u>的观察。

放上绿色滤光片

高发光效率的点光源→滤色系统→一定波长的光<u>（紫外光365nm、紫蓝光420nm）作为激发光</u>→激发标本内的荧光物质发射出荧光。

敏感性高、用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。

荧光光源一般采用 超高压汞灯（50~200W）、激发滤片（紫外、紫色、蓝色、绿色） 、阻断（或压制）滤光片

按光路区分

传统细菌：指人工培养基上易于增殖的细菌

“三段划线” 、目的：使细菌分散、生长为 单个菌落 、便于挑选目标细菌

类型：

烛缸、严格的分离操作-处理标本开始无氧的手套箱

使用特殊的培养基：添加胆固醇、马血清、酵母提取物、抗生素等。液体-添加酚红指示剂

固体培养基、5%CO2、37℃、 7日后用60倍低倍镜 斜投射光 观察是否生长、一般 3周左右 长成菌落。菌落中心 陷入平皿生长、“油煎蛋”样

支原体菌落坚实、无法挑取、灭菌 刀片切取菌落琼脂块 →移入液体培养基→棕红色变为黄绿色提示生长、支原体小→液体培养不会明显浑浊

反复2~3次。

L型→细胞壁缺损的细菌

在普通渗透压下、细胞壁缺损的细菌会“涨破”死亡→分离L型的培养基必须 高渗透压 。

<u>琼脂浓度0.5%（ 0.3 0.5%半固体、1.5% 2.5%固体 ）以下的半固体培养基，加马血清及10%蔗糖维持渗透压</u>（3%~5%NaCL？）L型可生长成 “油煎蛋”样细小菌落 。

专性细胞内寄生菌、必须动物及细胞分离

姬姆尼茨、吉姆萨染色

常用动物：小鼠、大鼠、豚鼠

注射：皮下、腹腔、静脉or特殊器官（如颅内接种）

已分离的病原菌在保存过程中突变→丧失致病能力→制成悬液<u>接种于动物→重新从动物分离出来→成为完整毒力的培养物</u>，过去是保存病原菌的常规做法→ 菌株的“复壮” （实际上是利用动物的疾病过程，将残留的具有毒力的致病细菌从大量无毒力的突变细菌中重新 分离出来 ）

最常用-革兰染色、特殊反应-荚膜肿胀试验等

霍乱弧菌鉴定：噬菌体-生物学分型

单克隆抗体检测特异性抗原：凝集试验、ELISA、免疫荧光试验、胶体金免疫吸附试验等

最常用实验同四

比抗原检测敏感性更高

通常使用 动物试验 。半数致死量为指标。

每 一次分离过程 、获得的纯培养物→称作 一“株” 该种细菌

所保存的培养物→称为该种细菌的“菌种”。

将细菌增殖到所需数量→这一过程称为“培养”。

无水乙醇：无色澄清液体。有灼烧味。易流动。极易从空气中吸收水分，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。能与水形成共沸混合物(含水4.43%)，共沸点78.15℃。相对密度(d204)0.789。熔点-114.1℃。沸点78.5℃。折光率(n20D)1.361。闭杯时闪点（在规定结构的容器中加热挥发出可燃气体与液面附近的空气混合，达到一定浓度时可被火星点燃时的温度）13℃。易燃。蒸气与空气能形成爆炸性混合物，爆炸极限3.5%～18.0%（体积）

注意事项：

危险性概述

健康危害：该品为中枢神经系统抑制剂。首先引起兴奋，随后抑制。急性中毒：急性中毒多发生于口服。一般可分为兴奋、催眠、麻醉、窒息四阶段。患者进入第三或第四阶段，出现意识丧失、瞳孔扩大、呼吸不规律、休克、心力循环衰竭及呼吸停止。慢性影响：在生产中长期接触高浓度该品可引起鼻、眼、粘膜刺激症状，以及头痛、头晕、疲乏、易激动、震颤、恶心等。长期酗洒可引起多发性神经病、慢性胃炎、脂肪肝、肝硬化、心肌损害及器质性精神病等。皮肤长期接触可引起干燥、脱屑、皲裂和皮炎。

燃爆危险：该品易燃，具刺激性。

急救措施

皮肤接触：脱去污染的衣着，用流动清水冲洗。

眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。

吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。就医。

食入：饮足量温水，催吐。就医。

消防措施

危险特性：易燃，其蒸气与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂接触发生化学反应或引起燃烧。在火场中，受热的容器有爆炸危险。其蒸气比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方，遇火源会着火回燃。

灭火方法：尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。

灭火剂：抗溶性泡沫、干粉、二氧化碳、砂土。

泄漏应急处理

应急处理：迅速撤离泄漏污染区人员至安全区，并进行隔离，严格限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器，穿防静电工作服。尽可能切断泄漏源。防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。

小量泄漏：用砂土或其它不燃材料吸附或吸收。也可以用大量水冲洗，洗水稀释后放入废水系统。

大量泄漏：构筑围堤或挖坑收容。用泡沫覆盖，降低蒸气灾害。用防爆泵转移至槽车或专用收集器内，回收或运至废物处理场所处置。

操作处置与储存

操作注意事项：密闭操作，全面通风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴过滤式防毒面具（半面罩），穿防静电工作服。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。防止蒸气泄漏到工作场所空气中。避免与氧化剂、酸类、碱金属、胺类接触。灌装时应控制流速，且有接地装置，防止静电积聚。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。

储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

常用消毒方法有浸泡法和擦拭法。将待消毒的物品放入装有乙醇溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染医疗器械等物品的消毒，用70%的乙醇溶液浸泡10min以上。对外科洗手消毒，用75%的乙醇溶液浸泡5 min。对皮肤的消毒，用75%乙醇棉球擦拭。

勿用于手术器械的消毒灭菌。勿用于涂有醇溶性涂料表面的消毒。浸泡消毒时，物品勿带过多水分，同时应将表面黏附的有机物清除。

GMP车间使用的主要有5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等，其控制主机根据车间具体要求