茶多酚的提取步骤

补充一下...如果要制取茶多酚,要用绿茶,别的茶多酚含量低,如果是工业制取茶多酚的原料是绿茶的茶碎茶末,或者绿茶老叶

茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以黄烷醇类物质（儿茶素）最为重要。 茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。本草千叶IT茶中含有丰富的茶多酚 (学名Camellia sinensis)。研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外，被健康及医学界誉为“辐射克星”。

1、物理性质

茶多酚在常温下呈浅黄或浅绿色粉末，易溶于温水(40℃一80℃)和含水乙醇中；稳定性极强，在pH值4—8、250℃左右的环境中，1.5个小时内均能保持稳定，在三价铁离子下易分解。1989年被中国食品添加剂协会列入GB2760-89食品添加剂使用标准，1997年列为中成药原料。

2、化学性质

茶多酚是从茶叶中提取的全天然抗氧化食品，具有抗氧化能力强，无毒副作用，无异味等特点。

茶多酚是指茶叶中一大类组成复杂、分子量及其结构差异很大的多酚类及其衍生物混合物，主要由儿茶素、黄酮醇、花色素、酚酸及其缩酚酸等组成的有机化合物，以儿茶素为主的黄烷醇类化合物占茶多酚总量的60%一80%，其中含量最高的几种组分为L—EGCG(50%-60%)、L—EGC(15%-20%)、L—ECG(10%-15%)和L—EC(5%-10%)。

茶多酚提取、分离工艺研究

茶多酚(Tea Polyphenol简写TP)是一类以儿茶素(Catechine)类为主体的多酚类化合物，在茶叶中含量一般为8％-20％。由于其酚性羟基易氧化而提供质子H＋，而具有抗氧化和消除自由基作用。茶多酚抗氧化能力比人工合成的抗氧化剂BHA、BHT和PG强，且安全无毒，是一种理想的天然抗氧化剂。研究还证明：TP有多种生理活性作用：降血脂、抗血栓；降血糖；降血压；抗突变、防癌；抗菌、抗病毒以及抑制口臭等。

对茶多酚的提取工艺国内外做过不少研究，但应用于工业化生产尚存在一些问题。我

们利用低级绿茶为原料、进行了5种茶多酚精制试验，对茶多酚提取、分离工艺进行考察，初

步找出一条比较合理的工艺，可作为工业化生产茶多酚的参考。

1材料与方法

1．1 绿茶：市售7级绿茶。

试剂：硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、均为分析纯。乙醇：食用级。

1．2 茶多酚含量测定：采用GB8313-87 ·

1．3 茶多酚提取：

9倍量60%乙醇 滤液1

绿茶粉末—————→过滤＜ 5倍量60%乙醇 滤液2

75℃3h滤渣——————→过滤＜

75℃2h 滤渣（弃）

回收乙醇 离心

合并滤液————→溶液—→上清液(分5份)

1．4 精制

吸附树脂1 水洗至无色 乙醇洗脱回收乙醇蒸干

方法A：上清液—————→—————→—————→—————→———→成品

吸附树脂1 水洗至无色 NaOH液洗脱 中和 吸附树脂 水洗 乙醇洗脱 回收乙醇 蒸干

方法B：上清液————→————→—————→——→———→—→———→———→——→成品

吸附树脂1 水洗至无色 碱性乙醇洗脱 回收乙醇蒸干

方法c：上清液—————→—————→—————→—————→———→成品

吸附树脂2 水洗至无色 乙醇洗脱回收乙醇 蒸干

方法D：上清液—————→—————→—————→—————→———→成品

CaCl2溶液 离心 HCl酸化乙酸乙酯萃取回收乙酸乙酯 蒸干

方法E：上清液———————→——→沉淀————————→—————→———→成品

NaOH调节 PH=8.5

2 结果和讨论

以茶多酚的得率与含量为指标比较上述5种不同的精制方法，其结果见表1。

表1 不同精制方法茶多酚得率与含量

方法 A B C D E

得率(％) 5.4 3.7 9.8 8.0 8.9

含量 9986 99 75 90

从表1可见，综合得率和含量，方法C最佳。

吸附树脂1分子中含有多数酰胺基，在水溶液中能与酚羟基通过氢键结合而被吸附。如果化合物分子中酚羟基数目多，则被吸附越强，从而与不含酚羟基的化合物分离，故吸附树脂1所得茶多酚制品含量高。采用方法C，因乙醇洗脱液中含氨水，通过氨水和吸附树脂1的酰胺基形成新的氢键代替原有的氢键，而使茶多酚解吸下来，提高得率(9．8％)，并降低乙醇用量，而且流出液pH接近中性，在浓缩时，残余的氨水随蒸汽而蒸发掉，不影响产品质量。因此最佳提取方法为绿茶用乙醇提取后，回收乙醇，离心后的上清液，经吸附树脂1吸附，用碱性乙醇(氨水调节pH=8．5)洗脱，浓缩、蒸干，不仅提高茶多酚含量和得率，且工艺简单，成本低，无污染，适宜于工厂化生产。

从茶叶中制备茶多酚的传统方法主要分为以下三类。 所用试剂应为分析纯(AR)，水为蒸馏水。

1酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g)硫酸亚铁和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。

2 pH7.5磷酸盐缓冲液：磷酸氢二钾: 称取23.377g磷酸氢二钾，加水溶解后定容至1L。磷酸二氢钾：称取9.078g磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。取上述磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。 1 取样按《茶 取样》的规定取样。

2 试样的制备按《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定，制备试样。

3 测定步骤 (1)试液的制备按《茶 水浸出物测定》中的规定，制备试液。 (2)测定准确吸取上述(1)试液1mL，注入25mL的容量瓶中，加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL，充分混合，再加pH7.5的缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。 5、结果计算 计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算： 茶多酚(%)=(A×1.957×2)/100 × L1/(L2×M×m)式中: L1——试液的总量，mL； L2——测定时的用液量，mL； M——试样的质量，g； m——试样干物质含量百分率，%； A——试样的吸光度； 1.957——用10mm比色杯，当吸光度等于0.50时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。 如果符合重复性的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果。 重复性同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.5g。

茶多酚是茶叶中的重要品质组成，含量多少与品种、栽培条件、加工方法有关，必须掌握其测定方法。酒石酸铁比色法，方法简便、快速，重现性好，容易掌握，已列为国家标准方法。

在一定的pH条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在波长540nm处比色，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正比，可用分光光度法定量。本实验学习用酒石酸比色法测定茶多酚类物质的方法。

一、试材及用具

1．试材 茶叶磨碎试样

2．仪器 分光光度计 、实验室常规玻璃仪器（三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等）

3．试剂

（1）酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)1g与酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O）5g，加水溶解稀释至1L。该溶液可稳定10 d。

（2）pH7.5的磷酸缓冲液 先配制以下两种溶液：

a．1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液 称取11.876g的Na2HPO4·2H2O，加水溶解，稀释至1L (若用无结晶水的需称取9.47g，若用含12个结晶水的需称取23.872g，其余操作相同)。

b．1/15mol/L磷酸二氢钾溶液 称取经110℃烘箱烘2h后的KH2PO4 9.078g，加水定容至1L。

取a液85mL和b液15mL混合后，即为pH7.5的缓冲液。

二、方法步骤

1．配制标准溶液

称取茶多酚纯品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混匀，即为每毫升含1mg茶多酚的标准溶液。

2．绘制标准曲线

分别称取标准溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL于一组25mL棕色容量瓶中，各加水至5mL，再加酒石酸铁溶液5mL，加缓冲液至刻度，混匀后用10mm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测定吸光度，绘制出标准曲线。

3．茶汤制备

准确称取磨碎试样3g，加450mL沸水，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇瓶一次，过滤。洗涤残渣，滤液合并于500mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。

4．测定

准确吸取茶汤1mL，注入25mL容量瓶中，加水4mL，酒石酸铁溶液5mL，用缓冲液定容至刻度，混匀。用10mm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测吸光度，从标准曲线查得溶液含茶多酚的量。

E—测试液测得的吸光度

3.913—当吸光度等于1.0时，每mL试液中茶多酚的量（mg）

M—试样量（g）

m—试样干物率%

L1—总试液量（mL）

L2—所取试液量（mL）