蛋白质的沉淀反应，乙醇引起的变性与沉淀为什么加盐酸

首先，只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性，低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构（氢键）破坏而沉淀析出，类似于盐析。其次，变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了，应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%，而且最后蛋白会再溶解。因此，这个实验不足以证明蛋白质变性。

后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点，增大蛋白质的溶解度，进而使蛋白质再溶解。

其次，乙醇使得蛋白质的二级、三级、四级结构变化，但是不改变蛋白质的一级结构，也就是说，蛋白质还是原来的两性物质（既有酸性又有碱性，所以能够溶于酸和碱）。

好了

1号管有乙醇，还有缓冲液（缓冲液就是由酸碱组成的），1号管沉淀了，你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊。

所以你需要二号三号管来证明，酸和碱都没有使蛋白质沉淀（因为变性的蛋白质被酸碱溶解了），而且中和之后就发现沉淀出现了，说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱。

至于甲基红，是为了指示酸碱度，你不是要中和嘛，没有指示剂你怎么滴定？

首先需要明白什么是蛋白质变性，所谓蛋白质变性就是在某些理化因素的影响下,蛋白质的空间结构发生变化,从而引起蛋白质理化性质和生物功能改变。

乙醇在医学方面可做为一种消毒剂，乙醇作用于细菌细胞首先起到脱水作用，乙醇分子进入到蛋白质分子的肽链环节，使蛋白质发生变性沉淀；这种作用在70%的含量下显得更强。乙醇可导致蛋白质分子间易形成氢键。

一定浓度的酒精才可以使蛋白质变性（比如医院用的75%的乙醇消毒液），并不是所有浓度的酒精都可以使蛋白质变性，有些浓度的酒精只会使蛋白质沉淀析出而已。

乙醇在医学方面可做为一种消毒剂,乙醇作用于细菌细胞首先起到脱水作用,乙醇分子进入到蛋白质分子的肽链环节,使蛋白质发生变性沉淀；

这种作用在70%的含量下显得更强.乙醇可导致蛋白质分子间易形成氢键。

蛋白质变性：

1、原因

变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏，都是变性的结果。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮等；能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。

2、变性结果

（1）、生物活性丧失

蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力等生物学功能。生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时蛋白质的空间结构只要轻微变化即可引起生物活性的丧失。

（2）、某些理化性质的改变

蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子内部的疏水基团由于结构松散而暴露出来,分子的不对称性增加蛋白质分子凝聚从溶液中析出，因此粘度增加，扩散系数降低。

蛋白质含量，离子强度，溶液pH值，乙醇浓度，溶液温度。

1。蛋白质含量，愈高，共沉多；反之，分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了，成本高。

2。离子强度：这与介电强度有关。

3。怠掸糙赶孬非茬石长将溶液pH值：调到目标蛋白等电点周围。

4。乙醇浓度：一般来说乙醇浓度多少，与目标蛋白的分子量有关：比如8%，可沉淀纤维蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，当然，乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快，防止局部过浓。要边加边摇动。

否则，共沉多！或者局部变性。

5。溶液温度：必须低温，乙醇反应是个放热反应，如果温度高，可引起蛋白质变性，不可逆的变形。

这五变参数，要综合，动态的调整，可达到精确分离蛋白质的作用。