气相色谱法——乙醇中甲醇的测定

请把问题叙述清楚。你要用气相色谱分析何种物质？是分析待测物中的乙醇吗？首先你要选好柱子类型和分析方法，把每种物质都可以分开并且被检测器检测到，那样就可以和根据面积归一化法进行计算出乙醇的含量。或者你根据外标法，用已知浓度的乙醇进行色谱分析，然后再用同样的方法对待测物进行色谱分析，通过二者的乙醇峰高或者面积进行计算，再乘以矫正因子，就可以算出乙醇的含量了。

第二，是看峰型，乙二醇极性非常强，峰是刀型峰。

峰型一样，保留时间完全一致，基本上能确定（不完全肯定）是乙二醇。

2. 内标（物），指的是内标法中用于和被测组分同步分离、净化及检测的标准品。具体说就是将一个已知质量的纯物质（叔丁醇），加入至待测样品（待检全血）溶液中，以此纯物质的量为标准，对比测定待测组分的（乙醇）含量，该纯物质（叔丁醇）称为内标（物）。

3.平行操作，是指供试检材、对照检材及空白检材在相同条件（仪器）下，采用了同样的检测方法、操作步骤同步进行检测的操作。目的是消除误差提高检测的准确性。

4. 为什么采用叔丁醇为内标？是因为叔丁醇与乙醇为同系物，叔丁醇与乙醇组分基本相同，在极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等大体一致，叔丁醇可以无限互溶。

5.什么是内标法？内标法的目的是测定被测组分在样品中的百分含量。特指在标准溶液和检样中，分别加入一定量内标物作为随行参比；根据标准品及检样与内标物响值的比值和标准品及检样中待测组分含量之间的线性对应关系求得组分含量的方法。在检测中把一定量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，对含有内标物的样品进行色谱分析，再分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按公式计算被测组分在样品中的含量。内标法是色谱分析中一种比较准确的定量方法。

6.空白检材，也叫对照检材，是指不含被检物（乙醇）的相应检材。

7.色谱图，即色谱流出曲线。是指以组份流出色谱柱的时间为横坐标，检测信号的强度为纵坐标的曲线图。

8.保留时间，是指从进样开始到出现某个组分的色谱峰最大值的时间。用RT表示，单位为分（min）或秒（s）。

9.相对保留时间，指在相同条件下，某组分的校正保留时间与另一组分校正保留时间的比值。

三

检测前的准备工作

1.试剂与样品：

（1）乙醇

（2）叔丁醇

（3）乙醇标准工作溶液

制作方法：精密吸取或称取无水乙醇标准品适量，用水配成1000mg/100ml乙醇储备液，密封，冷藏保存，使用期6个月。将乙醇储备液按倍数用水稀释制成试验中所用系列浓度的乙醇标准工作溶液，使用期3个月；

（4）叔丁醇内标工作溶液

制作方法：精密吸取或称取叔丁醇标准品适量，用水配成4mg/100ml叔丁醇内标工作溶液，密封，冷藏保存，使用期3个月。

（5）定性案件样品

制备方法：取0.10mg待检全血及0.50ml叔丁醇内标工作溶液加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。

（6）定量案件样品

制备方法：取0.10mg待检全血两份，分别添加0.50ml叔丁醇内标工作溶液加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。

（7）添加样品

制备方法：取1mg/100ml乙醇标准工作溶液0.10ml及叔丁醇内标工作溶液0.50ml加入样品瓶。

（8）空白样品

制备方法：取空白全血0.10ml及叔丁醇内标工作溶液0.50ml加入样品瓶。

想要准确的测定乙醇的含量，就要把乙醇中可能含有的所有杂质峰都与乙醇峰尽量达到分离（分离度大于1.5）。而乙醇中具体会含有何种物质，应该参考乙醇的生产工艺来推断在生产过程中引入了何种物质，可能会生成何种物质等等。

那么想要使各种物质都与乙醇达到分离，就要通过调整色谱条件来做到。在不同的色谱条件下，同一物质的保留情况会发生变化。而当色谱条件变化时，不同物质的保留时间变化情况也是不一致的。也就是说，变化一个色谱条件，就会引起一系列连锁反应，导致各物质的相对保留时间出现变化，峰型也会有变化，直接影响就是各个峰之间出现分离度的变化。所以我们不能断言某种物质一定会干扰乙醇测定，因为这种物质在不同色谱条件下的与乙醇峰的分离度是不一样的。

以上所说的是用外标法测定含量。如果用面积归一化法来计算乙醇含量的话，就要考虑可能含有的杂质在该检测器下的响应值问题，因为某些物质在FID下响应值是很小的（四氯化碳，氯仿等等），这样的话，就无法得知该杂质的量，导致计算结果的不准确。就要更换检测器针对性的对该杂质进行定量检测，并在含量计算中进行扣除。同时也要注意各物质的分离度问题。