加2ml含0.3m盐酸胍的95%乙醇洗涤蛋白质沉淀怎么配
蛋白质的提取
准备试剂：异丙醇含0.3M盐酸胍的95%乙醇无水乙醇1%SDS。
操作步骤：
1.取沉淀DNA后剩余的上清，用异丙醇沉淀蛋白质。每使用1ml TRIzol加1.5ml异丙醇，室温放置10分钟，2～8℃12000×g离心10分钟弃上清。
2.用含0.3M盐酸胍的95%乙醇洗涤蛋白质沉淀。每使用1mlTRIzol加2ml洗涤液，室温放置20分钟，2～8℃7500×g离心5分钟，弃上清，重复两次。用2ml无水乙醇同样方法再洗一次。
3.真空抽干蛋白质沉淀5～10分钟，用1%SDS溶解蛋白质，反复吸打，50℃温浴使其完全溶解，不溶物2～8℃10000×g离心10分钟除去。分离得到的蛋白质样品可用于Western Blot或-5至-20℃保存备用。
注意事项：
1.蛋白质沉淀可保存在含0.3M盐酸胍的95%乙醇或无水乙醇中2～8℃一个月以上或-5至-20℃一年以上。
2.用0.1% SDS在2～8℃透析三次，10000×g离心10分钟取上清即可用于Western Blot。
常见问题分析：
得率低：
A.样品裂解或匀浆处理不彻底。
B.最后得到的蛋白质沉淀未完全溶解。
蛋白质降解：组织取出后没有马上处理或冷冻。
电泳时条带变形：蛋白质沉淀洗涤不充分。
| （1）物理性质一是指物质不需要经过化学变化就表现出来的性质，二是指物质没有发生化学反应就表现出来的性质．由题意可知“透明或半透明树脂状固体，无特殊气味，易溶于水”这些性质属于物理性质． 故答案为：透明或半透明树脂状固体，无特殊气味，易溶于水． （2）盐酸聚六亚甲基胍中各元素的原子个数比为：C：H：N：Cl=7：16：3：1，故选C：H：N：Cl=7：16：3：1． （3）盐酸聚六亚甲基胍中氯元素的质量分数为：
（4）HClO中氯元素的含量为：
355×20%÷
故答案为：105． |
反应温度为170-230度，放出的不是氨气，而是氰胺。由于氰胺又可以发生二聚生成双氰胺，2 NH2 CN = NH2-C（=NH）-NH-CN
故净反应为NH2-C（=NH）-NH-CN + 2 NH3 HCl = 2 NH2-C（=NH）-NH2（HCl）
氨气实际上是高温时候，氯化铵分解产生的，并且全部参与了反应。
B、在RNA聚合酶的作用下，核糖核苷酸依次连接形成RNA，B错误；
C、病毒没有细胞结构，不能独立生存，因此不能用培养基培养病毒，C错误；
D、ABOB能抑制病毒的DNA和RNA聚合酶的活性，可见其作用于基因的复制与转录阶段，D错误．
故选：A．
羧基在水中部分电离；而胍基接近强碱，几乎完全形成阳离子。所以此时胍基上的氮难有亲核的力量。又：羧基和胍基的反应是要脱去水的，在水溶液中因为有水，平衡大大向反应物偏移。
因此醋酸和盐酸胍在不太浓的水溶液中是不易反应的。
如试图合成羧基和胍基缩合的产物，须用醋酸胍在醋酸条件下加热回流脱水。一般而言羧基和胍基的缩合反应，其条件都在无水体系里（甚至是熔融），常需酸催化脱水；但因胍基在酸性条件下主要以盐的形式存在，反应速率不快，需长时间回流，还要避免副产物。
注：可用羧酸酯同醇溶的游离胍基进行亲核反应，速率稍快，可以作为代替。
意见建议：治疗指南讲的阿司匹林和辛伐他丁一同应用可以预防脑血栓的发生。
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