网上买的甲醛测试仪和甲醛试纸、测试盒是否可靠

以下简单记：A.正丁醇、B.乙酸、C.甘油、D.丙酮、E.乙醛、F.异丙醇、G.苯酚、H.苯甲醛；

1、分别取A~H样品少许，加入2，4-二硝基苯肼，生成沉淀者为D、E、H（记为一组）；无沉淀者为A、B、C、F、G（记为二组）。

2、取一组中物质各少许，加入碘液和10%NaOH，生成黄色沉淀者为D、E；无黄色沉淀者为H。取D、E各少许，加入Fehling试剂，生成砖红色沉淀者为E，无沉淀生成者为D。

3、取二组中物质各少许，加入溴的饱和溶液，生成白色沉淀者为G，无沉淀生成者为A、B、C、F。取A、B、C、F加入5%NaHCO3，有二氧化碳气体放出者为B，无气体生成者为A、C、F。取A、C、F，加入碘液和10%NaOH，生成黄色沉淀者为F，无黄色沉淀生成者为A、C。取A、C少许，加入5%K2Cr2O7，然后加入10%NaOH，加热，在试管口放湿润的蓝色石蕊试纸，能生成使蓝色石蕊试纸变红的气体（二氧化碳）者为C，无气体者为A。

1、二苯胺磺酸钠指示液：

取二苯胺磺酸钠0.2g，加水100ml使溶解，即得。

2、二苯偕肼指示液：

取二苯偕肼1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

3、双硫腙指示液：

取双硫腙50mg，加乙醇100ml使溶解，即得。

4、石蕊指示液：

取石蕊粉末10g,加乙醇40ml，回流煮沸1小时,静置，倾去上层清液，再用同一方法处理二次，每次用乙醇30ml，残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml，煮沸，放冷，滤过，即得。变色范围 pH4.5~8.0(红→蓝)。

5、甲酚红指示液：

取甲酚红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液5.3ml使溶解，再加水稀释至100ml，即得。变色范围 pH7.2~8.8(黄→红)

6、甲酚红-麝香草酚蓝混合指示液：

取甲酚红指示液1份与0.1%麝香草酚蓝溶液3份,混合，即得。

甲基红指示液取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH4.2~6.3(红→黄)。

7、甲基红-亚甲蓝混合指示液：

取0.1%甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2%亚甲蓝溶液8ml，摇匀，即得。

8、甲基红-溴甲酚绿混合指示液：

取0.1%甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30ml，摇匀，即得。

9、甲基橙指示液：

取甲基橙0.1g，加水100ml使溶解，即得。变色范围 pH3.2~4.4(红→黄)。

10、甲基橙-二甲苯蓝FF混合指示液：

取甲基橙与二甲苯蓝FF各0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

11、邻二氮菲指示液：

取硫酸亚铁0.5g，加水100ml使溶解,加硫酸2滴与邻二氮菲0.5g,摇匀，即得。本液应临用新制。

12、茜素磺酸钠指示液：

取茜素磺酸钠0.1g，加水100ml使溶解，即得。变色范围 pH3.7~5.2(黄→紫)

13、荧光黄指示液：

取荧光黄0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。

14、钙黄绿素指示剂：

取钙黄绿素0.1g，加氯化钾10g，研磨均匀，即得。

15、钙紫红素指示剂：

取钙紫红素0.1g，加无水硫酸钠10g,研磨均匀，即得。

16、姜黄指示液：

取姜黄粉末20g，用冷水浸渍4次，每次100ml,除去水溶性物质后，残渣在100℃干燥，加乙醇100ml，浸渍数日，滤过，即得。

17、结晶紫指示液：

取结晶紫0.5g，加冰醋酸100ml使溶解，即得。

18、酚酞指示液：

取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。变色范围 pH8.3~10.0(无色→红)。

19、铬黑T指示剂：

取铬黑T 0.1g，加氯化钠10g，研磨均匀，即得。

20、淀粉指示液：

取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。本液应临用新制。

21、硫酸铁铵指示液：

取硫酸铁铵8g，加水100ml使溶解，即得。

22、溴酚蓝指示液：

取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH2.8~4.6(黄→蓝绿)。

23、溴麝香草酚蓝指示液：

取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH6.0~7.6(黄→蓝)。

24、麝香草酚酞指示液：

取麝香草酚酞0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。变色范围 pH9.3~10.5(无色→蓝)。

25、麝香草酚蓝指示液：

取麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液4.3ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH1.2~2.8(红→黄)；pH8.0~9.6(黄→紫蓝)。答案来自

实验基本原理

RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中，可以分离混合物中不同分子量的RNA分子，凡是无法确定分子量。只有在变性情况下，RNA分子完全伸展，其泳动率才与分子量成正比。

判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带，且28s rRNA的亮度应为18s rRNA的两倍。

实验试剂

1、0.1%DEPC水：200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀，室温放置过夜，高压灭菌。

2、10x电泳缓冲液：吗啉代丙烷磺酸（MOPS）0.4mol/L（pH 7.0）；NaAc 0.1mol/L；乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L；

3、50mL变性琼脂糖凝胶（1%）：10x电泳缓冲液5 mL；琼脂糖0.5 g；0.1%DEPC水36.5 mL；加热溶解，稍冷却，加入8.5 ml 37%甲醛。

4、上样缓冲液：50%甘油，1mmol/LEDTA，0.4% 溴酚兰，0.4%二甲苯蓝。

5、甲酰胺（去离子）。

操作步骤

1、将制胶用具用70%乙醇冲洗一遍，晾干备用。

2、制胶：称取0.5g琼脂糖粉末，加入放有36.5mL的DEPC水的锥形瓶中，加热使琼脂糖完全溶解。稍冷却后加入5ml的10x电泳缓冲液、8.5ml的甲醛。然后在胶槽中灌制凝胶，插好梳子，水平放置待凝固后使用。

3、加样：在一个洁净的小离心管中混合以下试剂：电泳缓冲液（10x）2μl、甲醛3.5ml、甲酰胺10ml、RNA样品3.5μl。混匀，置60℃保温10min，冰上速冷。加入3μl的上样缓冲液混匀，取适量加样于凝胶点样孔内。同时点RNA标准样品。

4、电泳：打开电泳仪，稳压7.5V/cm电泳。

5、电泳结束后通过紫外透视仪观察。

注意事项

本实验中必须保持RNase污染以免RNA降解。所有试剂用DEPC水配制，用具也用DEPC水冲洗，并灭菌。

一、实验目的

掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。

二、实验原理

RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1% 琼脂 糖凝胶即可。

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三、实验材料、器具及药品

蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪，电泳槽，电子 天平 ， 移液器 ，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。 琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，0.5μg/ml溴化乙锭（EB）10X载样缓冲液。

四、实验步骤

（1）用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶，加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。

（2）在超净工作台上，用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。在 实验台 上再加入5μl 1×TAE电泳缓冲液及1μl 的10X载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔。

（3）打开电源开关，调节电压至100V，使RNA由负极向正极电泳，约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。

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RNA的变性琼脂糖凝胶检测

试剂 ：

（1）MOPS缓冲液（10*）:0.4mol/L 吗啉代丙烷磺酸（MOPS） (Ph7.0)，0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA 。

（2）上样染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝，0.4%二甲苯蓝。

（3）甲醛。

（4）去离子甲酰胺。v电泳槽清洗：去污剂洗干净（一般浸泡过夜）——水冲洗——乙醇 干燥 ——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。

操作：

（1） 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍，晾干备用。

（2） 配制琼脂糖凝胶。

①称取0.5g琼脂糖，置干净的100ml 锥形瓶中，加入40ml蒸馏水，微波炉内 加热 使琼脂糖彻底溶化均匀。

②待胶凉至60--70 ℃，依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul 溴化乙锭，混合均匀。

③灌制琼脂糖凝胶。

（3） 样品准备：

① 取 DEPC处理过的500ul小离心管，依次加入如下试剂： 10x MOPS缓冲液2ul，甲醛3.5ul,甲酰胺（去离子）10ul，RNA 样品 4.5ul,混匀。

② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟，再置冰上2分钟。

③ 向管中加入3ul 上样染料，混匀。

（4）上样。

（5）电泳：电泳槽内加入1XMOPS缓冲液，于7.5V/ml 的电压下电泳。

（6）电泳结束后，在紫外灯下检查结果。

石蕊指示液：变色范围 pH4.5～8.0（红→蓝）。

酚酞指示液：变色范围 pH8.3～10.0（无色→红）。

酸碱pH指示剂配制方法及变色范围

1、石蕊指示液：取石蕊粉末10g,加乙醇40ml,回流煮沸1小时，静置，倾去上层清液，再用同一方法处理2次，每次用乙醇30ml,残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml煮沸，放冷，滤过，即得。 变色范围 pH4.5～8.0（红→蓝）。

2、酚酞指示液：取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 变色范围 pH8.3～10.0（无色→红）。

酸碱pH指示剂配制方法及变色范围

1、儿茶酚紫指示液：取儿茶酚紫0.1g，加水100ml使溶解，即得。 变色范围 pH6.0～7.0～9.0（黄→紫→紫红）。

2、中性红指示液：取中性红0.5g，加水使溶解成100ml，滤过，即得。 变色范围pH6.8～8.0（红→黄）。

3、孔雀绿指示液：取孔雀绿0.3g，加冰醋酸100ml使溶解，即得。 变色范围 pH0.0～2.0（黄→绿）；11.0～13.5(绿→无色) 。

4、石蕊指示液：取石蕊粉末10g,加乙醇40ml,回流煮沸1小时，静置，倾去上层清液，再用同一方法处理2次，每次用乙醇30ml,残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml煮沸，放冷，滤过，即得。 变色范围 pH4.5～8.0（红→蓝）。

5、甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH4.2～6.3（红→黄）。

6、甲基红－亚甲蓝混合指示液：取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％亚甲蓝溶液8ml，摇匀，即得。

7、 甲基红－溴甲酚绿混合指示液：取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％溴甲酚绿的乙醇溶液30ml，摇匀，即得。

8、甲基橙指示液：取甲基橙0.1g，加水100ml使溶解，即得。 变色范围 pH3.2～4.4（红→黄）。

9、甲基橙－二甲苯蓝FF混合指示液：取甲基橙与二甲苯蓝FF各0.1g,加乙醇100ml使溶解，即得。

10、甲基橙－亚甲蓝混合指示液：取甲基橙指示液20ml,加0.2％亚甲蓝溶液8ml,摇匀，即得。

11、甲酚红指示液：取甲酚红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液5.3ml使溶解，再加水稀释至100ml，即得。 变色范围 pH7.2～8.8（黄→红）。

12、甲酚红－麝香草酚蓝混合指示液：取甲酚红指示液1份与0.1％麝香草酚蓝溶液3份,混合，即得。

13、四溴酚酞乙酯钾指示液：取四溴酚酞乙酯钾0.1g，加冰醋酸100ml,使溶解，即得。 对硝基酚指示液 取对硝基酚0.25g，加水100ml使溶解，即得。

14、刚果红指示液：取刚果红0.5g,加10％乙醇100ml使溶解，即得。 变色范围 pH3.0～5.0（蓝→红）。

15、苏丹Ⅳ指示液：取苏丹Ⅳ0.5g,加氯仿100ml使溶解，即得。

浅玫瑰色结晶性粉末，熔点200~202℃， 易溶于乙醇﹑醚﹑甲醇及稀氢氧化碱溶液。 溴麝香草酚蓝试纸

稍溶于苯﹑甲苯及二甲苯，微溶于水，几乎不溶于石油醚。 在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈黄色。

溴麝香草酚蓝是一种酸碱指示剂，变色范围pH6.0(黄)～7.6(蓝)。

普通水是中性，pH也就是7左右，差不多呈淡蓝.

溶有二氧化碳后，由于会形成碳酸，碳酸是弱酸，因此pH不会降太多，变黄。

当中过渡颜色是绿色或检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，并使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。