用紫外测乙醇在一个波长范围（250nm-260nm）的吸光度，怎么测
1、λ=589.3nm和18.35°C下，乙醇的折射率为1.36242，即吸光度。
2、如何测定乙醇含量及各种方法：
乙醇含量的测定有物理方法和化学方法。
物理方法有气相色谱法、密度瓶法、酒精计法、折射计测定法。
化学方法重铬酸钾比色法、莫尔氏盐法、碘量滴定法。
乙醇的分子式为C H OH，也可写为EtOH，Et代表乙基。是醇类的一种，是酒的主要成份，俗称酒精，它在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体，它的水溶液具有特殊的、令人愉快的香味，并略带刺激性。乙醇的用途很广，可用乙醇来制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70%——75%的乙醇作消毒剂等。
乙醇是一种很好的溶剂，既能溶解许多无机物，又能溶解许多有机物，所以常用乙醇来溶解植物色素或其中的药用成分，也常用乙醇作为反应的溶剂，使参加反应的有机物和无机物均能溶解，增大接触面积，提高反应速率。例如，在油脂的皂化反应中，加入乙醇既能溶解氢氧化钠，又能溶解油脂，让它们在均相（同一溶剂的溶液）中充分接触，加快反应速率，提高反应限度。
乙醇的物理性质主要与其低碳直链醇的性质有关。分子中的羟基可以形成氢键，因此乙醇黏度很大，也不及相近相对分子质量的有机化合物极性大。室温下，乙醇是无色易燃，且有特殊香味的挥发性液体。
作为溶剂，乙醇易挥发，且可以与水、乙酸、丙酮、苯、四氯化碳、氯仿、乙醚、乙二醇、甘油、硝基甲烷、吡啶和甲苯等溶剂混溶。此外，低碳的脂肪族烃类如戊烷和己烷，氯代脂肪烃如1，1，1-三氯乙烷和四氯乙烯也可与乙醇混溶。随着碳数的增长，高碳醇在水中的溶解度明显下降。
由于存在氢键，乙醇具有潮解性，可以很快从空气中吸收水分。羟基的极性也使得很多离子化合物可溶于乙醇中，如氢氧化钠、氢氧化钾、氯化镁、氯化钙、氯化铵、溴化铵和溴化钠等。氯化钠和氯化钾则微溶于乙醇。此外，其非极性的烃基使得乙醇也可溶解一些非极性的物质，例如大多数香精油和很多增味剂、增色剂和医药试剂。
用全光谱扫描，得到的峰值就是最大吸收波长，最大吸收波长就是用来作测量波长，原因是使用最大吸收波长作为测量波长可使得所有物质有一个统一的选择过程，并且误差经过验证是最小的。
在不同波长下测量待分析离子溶液的分光度，根据数据制作吸收曲线，曲线最高点对应的波长即为定量分析所用测量波长。因为在最大吸光度下测量，数据更大，能减小误差，也方便实验数据的记录与处理。
扩展资料：
注意事项：
波长计的频率定度需通过校准实现。商品波长计出厂时都对其刻度进行过定度校准，以保证满足其技术指标。使用一段时问后，可能因机械结构和环境变化造成刻度出现偏差，需要通过校准或周期计量来检验其精度。
校准波长计最直接的方法是利用精度更高的计数式频率计测量同一频率，比较两者的差值。
另一种校准波长计的方法是利用矢量网络分析仪，这可能是最省事的方法。因为矢网的频率定度具有很高精度，对精度为的波长计是足够。
参考资料来源：百度百科-波长
（2） 将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）.调波长调节器至所需波长.
（3） 开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右,预热20min .
根据溶液浓度大小,选择液层厚度合适的吸收池.
2．校正（!）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭）,调节[0% T]旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收池盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光率[100% T] 旋钮,使数学显示为“100.0”.
（2）如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性.当改变灵敏度 后必须重新校正“0”和“100”.
（3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后,如将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“.000”,即可进行下面吸光度A的测量；如将选择开关置于“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值,即可进行下面浓度c的测量.
3．测定（1） 吸光度A的测量.将要测A的试样溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A.
（2） 浓度c的测量.将要测c试样溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值c.
4．结束测量完毕,关闭电源,将各调节旋钮恢复至初始位置.取出吸收池洗净,晾干,存于专用盒内.
注意事项：（1） 使用前,使用者应该首先了解本仪器的结构和原理,以及各个旋钮之功能.
（2） 仪器接地要良好,否则显示数字不稳定.
（3） 如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间）,当稳定后,重新调整“00.0”和“100”即可工作.
（4） 仪器左侧下角有一只干燥剂筒,应保持其干燥,发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用.
（5） 当仪器停止工作时,关掉电源,电源开关需同时切断,并罩好仪器
希望以上对你有所帮助.
比如先以100nm为间隔，找到最大吸收波长的区段，在以20nm为间隔寻找，一般这样重复三次就能得到很高的精确度了。波长一般精确到10nm即可。
如果是DAD检测器，全扫描一遍就ok了
检测单一物质，一般选择该物质的最大吸收波长度。你现在同时检测问的是三种成分物质，要参考这三种物质的最大吸收波长，以此选择一个合适的波长使三种物质的检测限和灵敏度都能达到一个合适的要求。
检测波长的选择涉及答到以下2方面的因素：
1，目标物质在该波长处有较大（往往不是最大）吸收，用PDA检测可以测出。
2，与目标物质同时经专过检测器流通池的其他物质（主要是流动相与样属品溶剂）在该波长有较小吸收，此时可以进行校正。
（1） 波长 由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm，或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正，钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别，使用时应注意。 （2）吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定 ，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。 波长/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收系数 的规定值
124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数 的许可范围
123.0～126.0
142.8～146.2
47.0～50.3
105.5～108.5
（3） 杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。 试剂浓度%（g/ml）测定用波长（nm）透光率 %碘化钠
1.00 220 <0.8 亚硝酸钠5.00340<0.8
测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度，或由仪器在规定波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度会偏低；狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增大为准，由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数，或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。当溶液的pH值对测定结果有影响时，应将供试品溶液和对照品溶液的pH值调成一致。 （1） 鉴别和检查 分别按各品种项下的方法进行。 （2） 含量测定 一般有以下几种。 按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分规定量的100%±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度∶ CX=（AX/AR）CR 式中
CX为供试品溶液的浓度； AX为供试品溶液的吸光度； CR为对照品溶液的浓度； AR为对照品溶液的吸光度。 供试品溶液加入适量显色剂后测定吸光度以测定其含量的方法为比色法。 用比色法测定时，应取数份梯度量的对照品溶液，用溶剂补充至同一体积，显色后，以相应试剂为空白，在各品种规定的波长处测定各份溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，再根据供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应的浓度，并求出其含量。 也可取对照品溶液与供试品溶液同时操作，显色后，以相应的试剂为空白，在各品种规定的波长处测定对照品和供试品溶液的吸光度，按上述（1）法计算供试品溶液的浓度。 除另有规定外，比色法所用空白系指用同体积溶剂代替对照品或供试品溶液，然后依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理制得。
2、紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
