DMEM/F12培养液配制

【M199培养基组成成分】

无机盐：氯化钠、氯化钙、氯化钾、无水磷酸二氢钠、六水合氯化镁等。

氨基酸：L-盐酸精氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-谷氨酰胺、L-酪氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸等。

维生素：维生素B1、维生素B2、维生素b12、维生素C、D-生物素、盐酸吡哆醛等。

其 它：无水葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤、亚油酸、硫辛酸、苯酚红等。

【M199培养基配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容

器。加注射用水(水温20℃～30℃)到47.5 升，轻微搅拌溶解。

⑵ 加入114.5克碳酸氢钠。

⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至50 升。

⑷ 如果必要，用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH 至所需值。

⑸ 用 0.2μm 滤膜正压过滤除菌。

⑹ 溶液应在2℃-8℃下避光保存。

成分（mg/L） MD400 成分（mg/L） MD400

氯化钙165 L-苏氨酸95

氯化钾330 L-色氨酸16

硝酸钾0.076 L-酪氨酸71.5

无水硫酸镁97.67 L-缬氨酸94

氯化钠4505 D-葡萄糖4500

无水磷酸二氢钠108.7 酚红15

五水亚硒酸钠0.0173 HEPES 5958

L-丙氨酸25 丙酮酸钠110

L-精氨酸盐酸盐84 维生素H 0.013

L－天门冬酰胺25 烟酰胺4

L－天门冬氨酸30 盐酸吡哆醛4

L-胱氨酸盐酸盐91.24 D-泛酸钙4

L-谷氨酸75 核黄素0.4

L-谷氨酰胺584 氯化胆碱4

甘氨酸30 盐酸硫胺4

L-组氨酸盐酸盐42 叶酸4

L-异亮氨酸105 i-肌醇7.2

L-亮氨酸105 维生素B12 0.013

L－赖氨酸盐酸盐146

L-蛋氨酸30 pH（无碳酸氢钠） 4.9±0.3

L-苯丙氨酸66 pH（加碳酸氢钠） 7±0.3

L-脯氨酸40 渗透压（无碳酸氢钠） 225±5％

L－丝氨酸42 渗透压（加碳酸氢钠） 276±5％

以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

产品代号：MD207-050

一．【组成成分】

成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L

无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042

五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105

九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1

七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081

氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55

氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035

无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24

氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98

无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65

磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6

七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02

L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2

L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031

L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219

甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17

L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365

L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【产品指标】

外观 粉红色固体粉末

溶解性 完全溶解，溶液澄明。

pH值

①加NaHCO3 6.60～7.20

②不加NaHCO3 5.50～6.10

水分（%） ≤5.0

渗透压（mOsm/kgH2O）

①加NaHCO3 274～302

②不加NaHCO3 238～263

细菌内毒素（EU/ml） ≤10

微生物检查（CFU/g） ≤1000

细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似

细胞数量 加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。

三.【配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升，轻微搅拌溶解。

⑵ 加入2.438克碳酸氢钠。

⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至1升。

⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。

⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌。

⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存。

四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏。

产品代号：MD207-050

一．【组成成分】

成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L

无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042

五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105

九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1

七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081

氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55

氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035

无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24

氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98

无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65

磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6

七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02

L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2

L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031

L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219

甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17

L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365

L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【产品指标】

外观 粉红色固体粉末

溶解性 完全溶解,溶液澄明.

pH值

①加NaHCO3 6.60～7.20

②不加NaHCO3 5.50～6.10

水分（%） ≤5.0

渗透压（mOsm/kgH2O）

①加NaHCO3 274～302

②不加NaHCO3 238～263

细菌内毒素（EU/ml） ≤10

微生物检查（CFU/g） ≤1000

细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似

细胞数量 加10％小牛血清培养4天,细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml.

三.【配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水将袋内残留培养基洗下,并入容器.加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升,轻微搅拌溶解.

⑵ 加入2.438克碳酸氢钠.

⑶ 轻微搅拌溶解,加注射用水至1升.

⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值.

⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌.

⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存.

四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏,干燥、密封、避光贮藏.

DMEM培养基成分

成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L

无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042

五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105

九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1

七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081

氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55

氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035

无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24

氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98

无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65

磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6

七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02

L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2

L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031

L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219

甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17

L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365

L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

DMEM培养基配制方法

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水将袋内残留培养基洗下,并入容器.加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升,轻微搅拌溶解.

⑵ 加入2.438克碳酸氢钠.

⑶ 轻微搅拌溶解,加注射用水至1升.

⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值.

⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌.

⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存.

一．【组成成分】

成分 mg/L 成分 mg/L成分 mg/L

无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042

五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25硫辛酸 0.105

九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1

七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081

氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55

氯化镁 28.64L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035

无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24

氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98

无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65

磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6

七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02

L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2

L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031

L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219

甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17

L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151胸苷 0.365

L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升，轻微搅拌溶解。

⑵ 加入2.438克碳酸氢钠。

⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至1升。 ⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。 ⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌。 ⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存。

三．【贮藏】

2℃－8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏

F12和F12K培养基的区别：

F12K为F-12的Kaighn's改进型，区别在于提高了氨基酸和丙酮酸的含量，主要用来培养分化的大鼠和鸡细胞以及原代人肝细胞的生长。

F12培养基：

无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042

五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105

九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1

七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081

氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55

氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035

无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24

氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98

无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65

磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6

七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02

L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2

L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031

L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219

甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17

L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365

L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68