层析液和无水乙醇的关系

无水乙醇只是把叶绿体中的色素提取出来(例如我们已知的四种，β胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b)，然后用层析液能够依据他们在层析液中移动速度不同，在硅胶板上进行展开，你就能看到4中不同的色素分开了。

（2）光合色素存在于图甲的[Ⅲ]光合膜中，其中叶绿素主要吸收红光和蓝紫光．图乙过程发生在图甲的[Ⅱ]叶绿体基质中．

（3）图乙中，物质①是3-磷酸甘油酸，该物质在光反应产物ATP和NADPH的作用下形成物质②3-磷酸丙糖．若3个CO2分子进入卡尔文循环可形成6个物质②分子，其中有5个物质②3-磷酸丙糖分子经过一系列变化再生成RuBP，其余的离开循环，可在叶绿体内作为合成淀粉、蛋白质和脂质等大分子物质的原料．

如果用无水乙醇做层析液 那么溶剂和层析液岂不是一样了?! 照你那么说直接把纸条蘸到过滤后的色素滤液里不是更省事?

层析液依据样品的质量不同而由各种有机溶剂组成。如

（1）20份汽油、2份丙酮、2份石油醚、1份苯。将滤纸条直接用该层析液进行层析，就可以得到比较理想的效果。

（2）9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合。

（3）汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

（4）体积分数为95%的酒精或93号汽油。

你所说的无水乙醇只是层析液中的组分之一，还需依据色素的理化性质与极性的实际，再复配其他机溶剂才能成为实用的层析液。

例如几种层析液对色素分离效果的比较

本人在翻阅生物学资料时，发现介绍无水汽油、四氯化碳等层析液分离色素的效果都很好，其果真如此吗？因此我有意设计了一个比较实验，通过探索、讨论，试图找到一种分离色素的最佳层析液。

2．1 实验设计 我设计了四种处理，以实验室每一纵行为一个处理，两种层析液分离色素的效果比较。一种为新增加的层析液，为A∶CCl4；B∶无水汽油；C∶石油醚：丙酮10∶1，D∶无水汽油∶苯10∶1。

2．2 实验过程 分两步进行： 2．2．1 分离色素 分别取两只 100 毫升烧杯，各加入 3 毫升层析液，同时加入带色素汁液的滤纸条进行纸层析，计时。要求认真观察，记录好实验现象，并将色素分离后的滤纸条编号。

3 实验结果及分析

3．1 实验结果 第一种处理：层析液①分离色素效果明显优于层析液②A，资料中的层析液 2 分钟即把色素分离开，5 分钟效果已非常明显，而用四氯化碳需 10 分钟，且胡萝卜素、叶黄素分不开；

第二种处理：层析液①优于层析液②B，无水汽油使分离开来的胡萝卜素、叶黄素颜色非常浅，且叶绿素 a、叶绿素 b 很难分开；

第三种处理：层析液②C 略优于层析液①，两者虽都能将叶绿体中四种色素分离开来，而层析液②C 在时间上略快于层析液①；

第四种处理：层析液②D 分离色素的效果不及层析液①。该层析液分离开色素必须在 10 分钟以上，且叶绿素 a、叶绿素 b 界限不太清。

3．2 分析 通过以上四种层析液与资料中的层析液的对比可知，只有层析液②石油醚：丙酮10∶1的效果优于层析液①，而有些在刊物上介绍的无水汽油、CCl 4 等层析液分离色素的效果并不理想。我认为是色素在CCl 4 、无水汽油单一层析液中溶解度差别太大，故有些色素在层析时分离效果较差。石油醚：丙酮10∶1配制而成的层析液分离色素的时间短于技术要求的，且省去了有毒的苯试剂，是一种较好的层析液。

希望以上实验资料对你有所参考作用。

如果用无水乙醇做层析液 那么溶剂和层析液岂不是一样了？！ 照你那么说直接把纸条蘸到过滤后的色素滤液里不是更省事？

（2）第一步：由于黄瓜幼苗是无关变量，所以要选择同一品种且长势相近，苗龄相同的植株．

第二步：设计对照实验中单一变量的原则，就是两烧杯中分别加入完全培养液、缺磷的不完全培养液．

第三步：也要注意无关变量的原则，选取叶片时，要选取等量的叶片，由于色素荣誉有机溶剂，所以提取时用无水乙醇提取，方法是纸层析法，比较两者的

色素带中类胡萝卜素色素带的宽度和颜色的深浅．

结果的预测：

（1）A、B两组类胡萝卜素色带宽度和颜色一致，说明缺磷导致的叶色暗绿，不是由于类胡萝卜素缺乏所致．

（2）A组比B组类胡萝卜素色带宽度大、颜色深（或B组缺少类胡萝卜素色带），说明缺磷导致的叶色暗绿，是由于类胡萝卜素缺乏所致．

答案：

实验假设：缺磷导致类胡萝卜素缺乏，引起叶色暗绿

第一步：同一品种且长势相近，苗龄相同

第二步：A、B两烧杯中分别加入完全培养液、缺磷的不完全培养液，置于相同且适宜的条件下培养，培养到两组黄瓜苗叶片出现差异时．

第三步：选取等量叶片    无水乙醇     纸层析     A、B两组色素带中类胡萝卜素色素带的宽度和颜色的深浅．

实验结果预测：

（1）A、B两组类胡萝卜素色带宽度和颜色一致，说明缺磷导致的叶色暗绿，不是由于类胡萝卜素缺乏所致；

（2）A组比B组类胡萝卜素色带宽度大、颜色深（或B组缺少类胡萝卜素色带），说明缺磷导致的叶色暗绿，是由于类胡萝卜素缺乏所致．