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苯酚硫酸法注意事项

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2023-01-26 06:50:24

苯酚硫酸法注意事项

最佳答案
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2026-04-12 14:08:59

问题一:苯酚-硫酸法的注意 (1)此法简单、快速、灵敏、重复性好,对每种糖仅制作一条标准曲线,颜色持久。(2)制作标准线宜用相应的标准多糖,如用葡萄糖,应以校正系数0.9校正μg数。(3)对杂多糖,分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。(4)测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1――0.3之间。比如:小于0.1之下可以考虑取样品时取2克,仍取0.2ml样品液,如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。

问题二:苯酚硫酸法测定多糖需要注意哪些问题 苯酚硫酸法测定多糖需要注意哪些问题

原理

多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物.再以比色法测定.

试剂

1. 浓硫酸:分析纯,95.5%

2. 80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存.

3. 6%苯酚:临用前以80%苯酚配制.(每次测定均需现配)

4. 标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖.

5. 15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存.

6. 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存.

7. 6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水.

8. 6mol/L 盐酸

问题三:硫酸苯酚法测多糖有什么要特别注意吗 苯酚硫酸法测定多糖需要注意:①、试管要洗干净,苯酚硫酸法很灵敏,试管没有刷干净会有很大影响。②、操作手法一致,尤其是硫酸加入的方式和速度,要尽量一致。建议用移液管移取,直接松开按住上面的手指,让其自行流下。最后加入硫酸后,立即摇匀和隔段时间摇匀,室温和冰浴,这些都不是造成平行样不平行的原因,只要处理样品方法是一样的,切勿一个样一种方法。③加硫酸必须要快,建议用5mL的移液枪,另外样品的稀释浓度要合理。⑤药品要求:A、 浓硫酸:分析纯,95.5% B、80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。C、 6%苯酚:临用前以80%苯酚配制.(每次测定均需现配)D、标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖。E、15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。F、 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。G、 6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。H、6mol/L 盐酸。⑥酚要4℃冰箱保存,拿出来到室温后用,加浓硫酸后一定要摇匀,水浴温度和时间尽量一致,冷水冲凉的时间也尽量一致,试样温度不一样对吸光度也有影响,还有可以的话样品和标曲同时做,误差就小了。

问题四:苯酚-硫酸法的介绍 苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。

问题五:苯酚硫酸法测多糖,苯酚硫酸怎么配制 苯酚硫酸法测多糖,苯酚硫酸怎么配制

在单因素试验基础上,选择对多糖含量测定结果产生显著影响的4个显色因素:6%苯酚用量、浓硫酸用量、反应温度、水浴显色时间进行正交试验,获得传统苯酚-硫酸法测定多糖含量的最佳显色条件是1 mL 6%苯酚溶液、7 mL浓硫酸、4℃反应温度、30 min水浴显色.改进后的多糖含量测定的显色条件即按照1:7的比例直接配制苯酚-硫酸显色液,在4℃条件下加入样品溶液,在90℃水浴进行30 min显色后,于490 nm处测定吸光度,计算多糖含量.通过传统最佳显色方法的验证试验和改进后的显色方法测定多糖含量的结果比较,表明改进后的方法具有操作简便、精密度高、准确度高、实用性强的优势.

最新回答
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2026-04-12 14:08:59

1. 浓硫酸:分析纯,95.5%

2. 80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。

3. 6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。(每次测定均需现配)

4. 标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖。

5. 15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

6. 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。

7. 6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。

8. 6mol/L 盐酸

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2026-04-12 14:08:59
先配置80%苯酚:80g苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20g水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。

再配置6%苯酚:取75ul的80%苯酚于烧杯中,加入960ul水(每次测定均需现配),测定的时候就用6%的苯酚来测!

希望帮到你!

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2026-04-12 14:08:59
蛋白质会影响此方法的测定结果,故需要除去。

三氯乙酸是一种有机酸,使多糖提取液中的蛋白质与有机酸作用而变性沉淀。 该法是 在多糖水提液中滴加 5 %~10 %与多糖水提取液等体积的三氯乙酸,混匀静置过夜,离心除 去胶状沉淀,重复以上的操作直至溶液不再继续混浊为止,得无蛋白质的多糖。 三氯乙酸浓度越大,除蛋白质效果越好,但对多糖的影响也越大,可能是三氯乙酸对多糖结构具有破坏作用,使多糖降解,而且这种破坏作用随着三氯乙酸浓度增大而增强。 植物多糖常采用三氯乙酸法除蛋白质,也可先用蛋白水解酶,使样品中的蛋白质部分降解后再用 Sevag 法效果更好;微生物多糖去除蛋白常采用 Sevag 法、三氟三氯乙烷法;也可用盐析法、有机溶剂萃取等方法除蛋白。

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2026-04-12 14:08:59
纯净的酚使用时不需要重蒸。市售的酚一般为红色或黄色结晶体,使用之前必须重蒸, 除去能引起DNA和RNA断裂和聚合的杂质。将苯酚置于65℃水浴中溶解,重新进行蒸馏,当温度升至183℃时,开始收集在若干个棕色瓶中,纯酚和重蒸酚都应贮存在-20℃。使用前取一瓶重蒸酚于分液漏斗中,加入等体积的lmol/LTris--HCl(pH8.0)缓冲液,立即加盖,激烈振荡,并加入固体Tris摇匀调pH(一般looml苯酚约加l克固体Tris)分层后测上层水相pH至7.6-8.0。从分液漏斗中放出下层酚相于棕色瓶中,并加一定体积0.lmol/LTris-HCl pH8.0)覆盖在酚相上,置4C冰箱贮存备用。酚是一种强腐蚀剂,能引起腐蚀性损伤,操作时应戴上眼镜和手套。如果皮肤上溅上了酚,应用大量水冲洗或用肥皂水冲洗。酚在空气极易氧化变红,要随时加盖,也可加入抗氧化剂0.1% 8一羟基喹啉及0.2%β-巯基乙醇。

又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。分子式C6-H6-O。分子量94.11。相对密度1.071。熔点40.85℃(超纯,含杂质熔点提高)。沸点181.9℃。闪点79.44℃(闭杯),85℃(开杯)。自燃点715℃。蒸气密度3.24。蒸气压0.13kPa(40.1℃)

用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体

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2026-04-12 14:08:59

重蒸酚又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。分子式C6-H6-O。分子量94.11。相对密度1.071。熔点40.85℃(超纯,含杂质熔点提高)。沸点181.9℃。闪点79.44℃(闭杯),85℃(开杯)。自燃点715℃。蒸气密度3.24。蒸气压0.13kPa(40.1℃)用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体

和重苯酚不是同一物质

昏睡的板凳
舒心的眼睛
2026-04-12 14:08:59
苯酚重蒸的方法如下:

用80度左右的温水将其熔化,因为它的熔点应该是在四十多度。然后倒入圆底烧瓶中,置油浴或电热套中(查看其沸点,然后设置加热温度),加热使升华,上接冷凝管(可用空气冷凝,因为自来水温度太低会导致冷凝管堵塞,或者用自来水,但水流要很小才行)。

苯酚是一种具有特殊气味的无色针状晶体,有毒,是生产某些树脂、杀菌剂、防腐剂以及药物(如阿司匹林)的重要原料。也可用于消毒外科器械和排泄物的处理,皮肤杀菌、止痒及中耳炎。熔点43℃,常温下微溶于水,易溶于有机溶剂;当温度高于65℃时,能跟水以任意比例互溶。苯酚有腐蚀性,接触后会使局部蛋白质变性,其溶液沾到皮肤上可用酒精洗涤。小部分苯酚暴露在空气中被氧气氧化为醌而呈粉红色。

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2026-04-12 14:08:59
又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。分子式C6-H6-O。分子量94.11。相对密度1.071。熔点40.85℃(超纯,含杂质熔点提高)。沸点181.9℃。闪点79.44℃(闭杯),85℃(开杯)。自燃点715℃。蒸气密度3.24。蒸气压0.13kPa(40.1℃)

用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体

昏睡的皮带
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2026-04-12 14:08:59

1、计算:n=m/M , c=n/v , p(密度)=m/v (先计算出5%的苯酚要其质量为多少) 

2、称量或量取:固体试剂用托盘天平或电子天平称量,液体试剂用量筒。

3、溶解:应在烧杯中溶解,待冷却后转入容量瓶中。苯酚先放在60℃水浴锅溶解,使其成为液体状态,在用移液管取出需要的克数,定容至需要的容量瓶就可以了。

4、转移:由于容量瓶的颈较细,为了避免液体洒在外面,用玻璃棒引流。

5、洗涤:用少量蒸馏水洗涤2到3次,洗涤液全部转入到容量瓶中。

6、定容:向容量瓶中加入蒸馏水,在距离刻度2到3cm时,改用胶头滴管加之刻度线。

扩展资料:

化学性质

可吸收空气中水分并液化。有特殊臭味,极稀的溶液有甜味。腐蚀性极强。化学反应能力强。与醛、酮反应生成酚醛树脂、双酚A,与醋酐;水杨酸反应生成醋酸苯酯、水杨酸酯。还可进行卤代、加氢、氧化、烷基化、羧基化、酯化、醚化等反应。

苯酚在通常温度下是固体,与钠不能顺利发生反应,如果采用加热熔化苯酚,再加入金属钠的方法进行实验,苯酚易被还原,在加热时苯酚颜色发生变化而影响实验效果。

参考资料:百度百科-苯酚