DNA的纯化与分离

香水里含有苯吗

香水里含有苯吗，苯是一种对我们身体有害的化学物质，它可以造成癌症的并发，日常生活中一定要注意苯的存在，很多人喜欢用的香水里面也含有这种成分，下面分享香水里含有苯吗。

香水里含有苯吗1

香水中含有微量铜对皮肤有害，因为铜在皮肤上经阳光一晒就会发生化学反应，会导致皮肤红肿、刺痛，诱发皮炎等等皮肤病。

香水中含有苯，苯是生产香水过程中的一种溶剂，苯对人体的危害是巨大的，甚至可以诱发白血病。

香水中含有人工香料

香水的香气主要是由香料散发出来，香水香料分为天然香料和人工合成香料，其中人工合成香料成本低，加工速度快，所以有不法企业用人工合成香料生产廉价香水。人工合成香料对人体有害。

香水中含有化学添加剂

为了达到更好的美容效果以及拥有更长的保质期，香水中往往添加有防腐剂、抗干燥剂、抗氧化剂、表面活性剂等等，这些成分对人体是有害的。

很多不合格香水中邻苯二甲酸酯，这是致癌物质，如果过度使用不但增加癌症发病几率，还会破坏粘膜，导致皮肤过敏。

很多不合格香水中含有铅，化妆品中添加铅会有更好的美容效果，因此有些香水生产企业会在香水中添加铅，所以，购买时一定要注意鉴别。

很多不合格香水中会含有汞，汞会在皮下蓄积，时间久了会加速皮肤老化，导致更年期提前。

香水有毒吗

不少人，特别是女士很喜欢给自己喷洒香水，以为香水能够给自己增添魅力。香水厂家也在不遗余力地大做广告，使得“春天气息”、“清新山涧”、“柠檬香型” 充溢我们的生活。此外，我们的日常用品中，比如洗发水、化妆品、婴儿护肤品、空气清新剂、洗涤用品中也多有香水的成分。

但很少有人会考虑香水等芳香剂的安全性，更没有几个人会知道制造芬芳剂至少需要5000 多种化学成分。每种香水的化学成分会多达600多种。在这5000多种化学成分中，只有不到20%做过毒性试验，结果是都含有毒性，被不少国家列为危险品。其它未测成分是否有毒，尚未可知。

如果用比较精密的仪器，可在居室中检测到芳香剂所含100多种成分(芳香剂最常用的化学成分有150种)，其中多数成分已知有毒性。

已经有研究发现芳香剂的化学成分对健康有害，对皮肤、肺脏和大脑的危害尤为显著。很多人投诉用过芳香剂后产生荨麻疹、皮炎等副作用。芳香剂对慢性肺病特别是哮喘病人的影响很大。据统计，高达75%(大约900万病人)的哮喘病例是由香水诱发的。香味同记忆有关联，这就意味着芳香剂对大脑组织有影响。

此类影响即为神经毒害作用。比如，香水和其它芳香剂中富含的沉香醇成分可诱发情绪低沉、沮丧甚至是危及生命的呼吸系统疾病等症状。医学界做的一项试验证明了香味对人大脑的影响：柑橘类水果的香味比多数抗抑郁药物的作用都明显。这表明，香味有影响心理状态的作用，应当同安定、盐酸阿米替林等药物一样归属精神药物。

香味的化学成分可以通过口、鼻以及皮肤吸收进入人体。这些成分可以通过血液循环达到全身各部位。敏感人群极易引发头疼(特别是偏头痛)、打喷嚏、流眼泪、呼吸困难、头晕、喉咙痛、胸闷、活动过度(在儿童中尤为显著)等症状。

需要特别指出的是，儿童比成年人更易受芬芳剂影响。遗憾的是，市场上几乎所有的婴幼儿用品都添加了芬芳剂。家长经常喷洒香水的话，会毒化身边孩子所呼吸的空气，引起孩子注意力不集中、学习障碍、活动过度，严重的甚至会诱发惊厥、发育迟缓等危害。

妇女长期使用香水，会使香水的化学成分在体内积累，哺乳期时就会通过奶水损害婴儿健康。

香水应该怎么分辨真假

第一，每瓶香水都有生产批号。不管是正版标准装还是小样，在瓶底都有张透明塑料纸，上有品名、规格和产地介绍假香水没这张纸，也没刻纹。

第二，正版香水瓶底和外包装盒底有统一编号，假如瓶底是GC118，盒底也一定是GC118。假香水瓶底和盒底没有编号。

第三，如果你以前用过这款香水，那么对其的香味一定很熟悉，你可以在用的时候感觉一下他的基调是否一样仿的香水一般前味比较象，而到了后味味道就有区别了。

第四，注意香水瓶的密封情况，瓶口与瓶盖要严密无间隙。正品香水包装整齐，图案清晰，瓶外观无裂纹等。原装品牌香水贴有白色的标签，写中文，主要是进口的批号、品牌供应商、净含量、保质期。

香水的保存方法

尽早用完是最基本的方法，不过一般好的香水若好好保存仍然可以有数年的寿命，以下再提供您一些保存香水时应注意的地方：

1、香水应该存放在阴凉的地方，避免放在热空气及光线下，若将香水置于高温处，会使香水色调及香味产生变化，若想长久保存香水，可将香水加以外包纸包住，置于冰箱冷藏库中。

2、尽量避免摩擦及轻摇香水瓶。

3、不要以脏手指直接碰触瓶口，这样可能会破坏香水的原味。

4、香水用过后，瓶盖一定要拧紧，以避免香水的香气挥发怠尽。

5、香水的.保存温度建议在10°C到27°C之间。

PS:香水通常可存放一年左右，贮存于室温下即可。如果发现香味变淡，或发生酸味就应该丢弃。

使用香水有哪些禁忌

1、香水不要洒在易被太阳晒到的暴露部位。因为香水中的香料有些是从天然植物中提取的挥发油，这些挥发油中有的含有呋喃香豆精的成份，如香柠檬油等，若喷洒在面部以及易被太阳晒到的部位，日光中的短波紫外线就会与皮肤上喷洒的这些化学物质相结合，出现光化学反应，最后导致脸上出现皮肤炎症和点状黑斑。

2、香水不宜直接擦在脸上及过敏性皮肤上面。由于香水含有较多量的酒精，尤其是 花露水，酒精含量更多些，刺激性较大，故脸部及易过敏的皮肤和婴儿皮肤都不宜直接擦在上面。

3、香水不宜总是直接洒在皮肤上，因为皮肤若长期受酒精的刺激可能会产生过敏现象。所以应变换使用方法，可根据情况，有时将香水洒在衣料上散发香味。

4、香水不宜过浓或洒得过多，不然会适得其反，还易导致嗅觉障碍症，于精神不利，另外也易给人一种孤傲浮华、孤芳自赏的感觉。

5、香水不宜涂在额上、腋下和鞋内等易出汗的部位。因为这些部位汗液多，易将香水冲淡，而且汗味和香味混合会产生怪异气味。

6、香水不宜喷洒在毛皮、黄金和珍珠等服饰品上，因为香水会使它们失去天然光泽。

7、两种不同的香水不宜混在一起使用，混合后的香味会使原来的每一种香水都失去纯味，且很可能闻起来极不舒服。

香水里含有苯吗2

苯的物理性质

苯在常温下为一种无色、有甜味的透明液体，也就是说，这种液体是没有颜色的，而且还带有一些甜甜的味道，其密度小于水，具有强烈的芳香气味。这个就是这种物质最主要的一种物理表现了，从视觉，味觉，嗅觉，这三个方面来展现它的物理性质。简单来讲，这个苯的化学元素，其实是一种由含碳量高的物质不完全燃烧获得的，是一种有一定的毒性的物质。一般这种物质都是从石油，煤焦油中提取出来的，是一种石油化工的原料，而且这个原料的用途也是非常的广泛的，因为这个物质的密度小于水，所以不溶于水，而且具有的这些特质，让苯这个物质，在塑料制品里被广泛的应用，虽然苯是有芳香的，是一种芳香化合物，但是这个物质是有毒的，而且还是致癌物质清单中的一种，所以在用的时候一定要注意防护。这就是所谓的香水有毒，越迷人的越危险。

苯的沸点为80、1℃，也就是说，在温度达到这个度数的时候，苯就会沸腾，熔点为5、5℃。苯的熔点是比较低的，一般的情况下，都是属于液体的状态，因为它的熔点比较低，属于这个就是比较容易被熔化的，因为这个状态下的苯是非常的不稳定的，是比较易挥发的，因为这个沸点温度比较低，属于易挥发，不易储存，需要放入特定的容器里。苯的这样的一种物理性质，让苯成为一种很好的有机溶剂，是工业上一种常用的溶剂，主要用于金属脱脂，不过，因为苯是一种有毒的物质，所以在使用的时候，肯定是按照指定的要求去做的，所以现在很多的运用中，都是按照安全的方式进行的。

我们单单的只了解这个的物理性质的话，其实还是不怎么全面的来表现的，因为苯这种元素也是我们不经常接触的，制药一些化工厂里，才会运用到，所以就是可以给大家来例举一些会用到的，比较常见的几种物质，可以制取塑料、橡胶、纤维、染料、去污剂、杀虫剂等的原料。这些物质都是苯和其他的元素发生的一些反应生成的另一种物质所以具备了其他的特质。

苯是一种良好的有机溶剂，因为这个是根据苯的一些物理的性质来运用的。溶解有机分子和一些非极性的无机分子的能力很强，这是被大多数当做的有机溶剂的一种选择方式，除甘油，乙二醇等多元醇外能与大多数有机溶剂混溶，也就是说，在所有的有机溶剂中，只有提到的这几种，大多数的有机溶剂都是可以和苯混溶的，而且不会产生一些比较强烈的反应的。除碘和硫稍溶解外，无机物在苯中不溶解。这个的意思就是大多数的无机物是不会再苯中溶解的。但是碘和硫是会有一点点的溶解的。

苯，这种物质是我们不常见的，但是又是时时刻刻都会出现在我们的生活之中的，就好像咱们暂时离不开的塑料制品是一样的道理的，而且还可以做橡胶，还可以跟其他物质反应，然后形成像燃料，染料，杀虫剂等物质，反正，很多的化工制品，都离不开的。所以说，虽然这个是一种有毒的香水，但是这也是我们离不开的一些元素物质。

香水里含有苯吗3

10大“深藏不露”毒素

1、面包中的防腐剂

面包松软可口，在很多人看来是顿健康早餐。但你知道吗，面包除了含小麦、牛奶和糖以外，还有一种名叫丙酸钙(E282)的防腐剂。这种防腐剂在20多年前被悄悄引入面包中，它是种无色、无味的白色粉末，人们无法通过外观、气味和味道分辨出来。它对*的危害是一点点慢慢积累起来的，研究证明，它与上肠道失调和偏头痛有关，还会导致孩子学习困难和持续性疲劳。

2、漱口水中的酒精

漱口水能帮助清洁牙齿和口腔，带来清新口气。但其中一种必不可少的原料——酒精，却可能使身体更容易受到致癌物质的伤害。澳大利亚国家癌症研究所2009年公布的研究报告表明，漱口水的酒精含量为25%或者更高，它与口腔、舌头和咽喉的癌变相关。

3、洗护产品中的二乙醇胺(DEA)

沐浴露、润肤乳虽然能起到清洁皮肤的作用，却会在不知不觉中伤害你的健康。其中含有一种叫二乙醇胺的物质，它被用作溶剂、乳化剂、洗涤剂、保湿剂。加拿大作家莎碧娜·德维塔在2002年出版的《拯救面子：香料塑造无皱纹肌肤》一书中介绍，在护肤乳中，二乙醇胺被用作软化剂，但它会和产品中的硝酸盐发生化学反应，形成潜在致癌物——亚硝胺。此外，二乙醇胺还可能刺激皮肤和黏膜。

4、牙膏中的氟化物

市面上的牙膏或多或少都含有氟化物，它能起到预防蛀牙的功效。但氟化物也是一种潜在的“毒药”，即使只摄入极小的量，也会对健康造成不利影响，甚至引起中毒，且毒性可以日渐累积。美国国家癌症研究所一项研究发现，氟化反应与美国每年发生的癌症死亡病例相关。对此，首都医科大学附属北京口腔医院预防科博士王鹏提醒，一定要正确使用含氟牙膏，成人每天别超过3、4毫克，7岁到15岁儿童别超过1、9毫克到2、1毫克，3岁以下的孩子刷牙时容易误吞牙膏，建议暂时不要使用含氟牙膏。

5、指甲油中的甲醛

近年来，街头的美甲店越来越多，对美丽的热衷让很多人忽视了指甲油散发出的刺鼻气味。实际上，这种气味的元凶就是我们常挂在嘴边、避之唯恐不及的甲醛。接触时间长了，会造成眼睛、鼻子、咽喉发炎，咳嗽、哮喘发作，呼吸急促、恶心、呕吐、皮疹、鼻出血、头痛和头晕等。从1987年起，国际癌症研究机构(IARC)就把甲醛列入了2A级致癌物。美国环境保护局(EPA)也声明，长期高频率使用含甲醛的物质，会有潜在致癌危险。

6、染发剂中的对苯二胺

时尚男女不断变换头发的颜色、中老年人为显年轻把花白头发染成黑色，殊不知市场上大多数染发剂中都用了一种化学物质——对苯二胺，它能帮助上色、让发色鲜亮，但也会导致皮肤过敏，甚至致癌。北京武警总医院血液科主任李昕权提醒，如果染发时需要加热，对健康危害更大，因为对苯二胺经加热后，会通过头皮进入毛细血管，随着血液循环可能会引起白血病等血液疾病。此外，对苯二胺还易诱发皮肤癌、膀胱癌等。染发时，最好在发际旁边的皮肤上涂抹一些润肤露，这样沾上药水后很容易洗掉；如果头发局部花白，没必要全头都染黑，可以只染变白的部位，以减少对头皮的刺激和伤害程度。

7、湿巾中的丙二醇

不管是普通湿纸巾还是婴儿湿巾中，都含有一种常见原料丙二醇，它是一种容易渗透到皮肤中的石油化工溶剂，对身体的危害不容忽视。它会堆积于心脏、肝脏和肾脏中，导致它们畸变和损伤，还会削弱免疫系统。此外，它还会损伤细胞膜，造成皮疹、皮肤干燥、接触性皮炎和皮肤表面损伤。

8、婴儿护理产品中的发泡剂

婴儿用的护理产品，原本应该让人最放心，但事实是，其中也含有对*有害的物质。十二烷基硫酸钠是一种在化妆品和个人护理产品中最常用的发泡剂，氧化后形成十二烷基醚硫酸钠，因其对眼睛刺激性较小，常被用于温和护理产品和婴儿护理用品中。但其氧化过程中会生成一种极其有害的化合物——1，4-二氧六环，它是一种激素干扰素，在越南战争结束后，大量越南军事人员曾因此陷入癌症的痛苦之中。此外，它还是种类雌激素，被认为会增加患乳腺【癌】和子宫内膜癌的机会，并且与精子数量少且呈现病态有重大关联。

9、彩妆中的滑石粉

女性在选购化妆品时，一定要记住，最细微的粉状化妆品，如眼影、胭脂、粉底等，大部分都含有滑石粉。这是一种非常精细的润滑剂，化学性质类似于石棉，是一种已知的致癌物质，与卵巢癌和呼吸道疾病患者数量的增加有关。一份发表在《美国流行病学杂志》上的报告表明，使用滑石粉的妇女患上卵巢癌的风险会增加60%。此外，滑石粉绝对不能应用于爽身粉等婴儿护肤品里面，除了致癌外，它吸入后还可能导致急性呼吸道压力。

10、香水中的甲苯

如果你患有哮喘，一定要记住，远离指甲油、发胶、发蜡、香水这些化妆品，因为它们中几乎都含有甲苯，把它当作一种溶剂来使用。研究证明，短时间内吸入较高浓度的甲苯，可能出现眼睛及上呼吸道明显受刺激的症状，表现为眼结膜及咽部充血、头晕、头痛、恶心、呕吐、胸闷、四肢无力、步态蹒跚、意识模糊等。如果长期接触，则可能引发慢性中毒，发生神经衰弱综合征、肝肿大，或让女性月经异常、皮肤干燥、皲裂、皮肤炎等。如果你是一个特别迷恋香水的爱好者，很难放弃使用，可以考虑用植物精油来代替。

“消字笔”原理：墨水显色物质不稳定，遇空气、高温、水会自动消散。

普通的笔，墨水中含有一种化学性质稳定的显色素，能让字迹长久保存。显色物质越是浓，化学性状越是稳定，越是能让字迹清晰。

消字笔用的是一种不稳定的化学物质作为显色素，可以轻易被氧化，生成没有颜色的另一种化学物质，有的遇到水或者高温也会发生反应，变成无色无味的物质。

扩展资料

自消笔诈骗钱财可构成刑事犯罪

自消笔是服装行业的必需品，学生也可用来练字，节约纸张，其生产和销售是合乎社会发展需要的。而且，国家也没有明文规定不能生产、销售这类产品。

如果使用者明知其特性，仍用来签订合同、书写借条等，通过虚构事实和假象来获取对方财产，这种主观故意将构成刑事上的诈骗犯罪，需承担相应的法律责任。

在借据书写、签订合同、票据结算等过程中，对于合同，尽可能使用电子打印文稿；需要签字和填写票据时，自带签字笔；必要时加盖印章或按手印。

同时，生产厂家是做好预防的第一关。专业的笔套和笔芯，醒目的使用提醒，一眼就能和普通签字笔进行区分。这样既可预防诈骗，又可避免因拿错笔而造成不必要的损失。

参考资料来源：中国网--褪色笔打30万欠条变“白条” 律师称产品无罪

参考资料来源：百度百科--消字笔

一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。

假阴性，不出现扩增条带

PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。

模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处 理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应 固定不宜随意更改。

酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而 导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。

引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度 高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单 位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。

Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特 异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。

反应体积的改变：通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul，应用多 大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul 后，再做大体积时，一定要模索条件，否则容易失败。

物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计，检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一。

靶序列变异：如靶序列发生突变或缺失，影响引物与模板特异性结合，或因靶序列某 段缺失使引物与模板失去互补序列，其PCR扩增是不会成功的。

假阳性

出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。

引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。

靶序列或扩增产物的交叉污染：这种污染有两种原因：一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决：操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。必要时，在加标本前，反应管和试剂用紫外线照射，以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污染，这些小片段比靶序列短，但有一定的同源性。可互相拼接，与引物互补后，可扩增出PCR产物，而导致假阳性的产生，可用巢式PCR方法来减轻或消除。

出现非特异性扩增带

PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数 过多有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：必要时重新设计引 物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量，适当增加模板量，减少循环次 数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。

出现片状拖带或涂抹带

PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量，减少循环次数。

克隆PCR产物

1)克隆PCR产物的最优条件是什么？

最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4℃过夜。在这2种温度下，缺T-凸出端的载体会自连，产生蓝斑。室温保温1小时能满足大多数克隆要求，为提高连接效率，需4℃过夜。

2)PCR产物是否需要用凝胶纯化？

如凝胶分析扩增产物只有一条带，不需要用凝胶纯化。如可见其他杂带，可能是积累了大量引物的二聚体。少量的引物二聚体的摩尔数也很高，这会产生高比例的带有引物二聚体的克隆，而非目的插入片段。为此需在克隆前做凝胶纯化。

3)如果没有回收到目的片段，还需要作什么对照实验？

A）涂布未转化的感受态细胞。

如有菌落，表明氨苄失效，或污染上带有氨苄抗型的质粒，或产生氨苄抗型的菌落。

B）转化完整质粒，计算菌落生长数，测定转化效率。

例如，将1ug/ul质粒1:100稀释,1ul用于100ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000ul后，用100ul铺板。培养过夜，产生1000个菌落。转化率为： 产生菌落的总数/铺板DNA的总量。

铺板DNA的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数。具体而言转化用10ng DNA，用SOC稀释到1000u后含10 ng DNA，用1/10铺板，共用1 ng DNA。转化率为：

1000克隆X10（3次方） ng /铺板1 ng DNA ug=10（6次方）cfu/ ug

转化pGEM-T应用10（8次方）cfu/ ug感受态细胞

如没有菌落或少有菌落，感受态细胞的转化率太低。

C）如用pGEM-T正对照，或PCR产物，产生>20-40蓝斑（用指定步骤10（8次方）cfu/ ug感受态细胞），表明载体失去T。可能是连接酶污染了核酸酶。T4 DNA连接酶（M1801，M1804，M1794）质量标准好无核酸酶污染，不应用其它来源的T4 DNA连接酶替换。

D）用pGEM-T或pGEM-T Easy载体，连接pGEM-T正对照，转化高频率感受态细胞（10（8次方）cfu/ug）,按照指定的实验步骤，可得100个菌落，其中60%应为白斑，如产生>20-40蓝斑, 没有菌落或少有菌落，连接有问题。

4)对照实验结果好，却没有回收到目的片段，实验出了什么问题？

A）连接用室温保温1小时，能满足大多数克隆，为提高效率，需4℃过夜。

B）插入片段带有污染，使3`-T缺失，或抑制连接，抑制转化。为此，将插入片段和pGEM-T正对照混合，再连接。如降低了对照的菌落数，插入片段需纯化，或重新制备。如产生大量的蓝斑，插入片段污染有核酸酶，使pGEM-T或pGEM-T Easy载体3`-T缺失。

C）插入片段不适于连接。用凝胶纯化的插入片段，因受UV过度照射，时有发生。UV过度照射会产生嘧啶二聚体，不利于连接，DNA必需重新纯化。

D）带有修复功能的耐热DNA聚合酶的扩增产物末端无A，后者是pGEM-T或pGEM-T Easy载体克隆所需。加Taq DNA聚合酶和核苷酸可在末端加A。详情查pGEM-T pGEM-T Easy载体技术资料（TM042）。

E）高度重复序列可能会不稳定，在扩增中产生缺失和重排，如发现插入片段高频率地产生缺失和重排，需用重组缺陷大肠杆菌菌株，如SURE细胞

PCR反应体系与反应条件

标准的PCR反应体系：

10×扩增缓冲液 　 10ul

4种dNTP混合物 　 各200umol/L

引物 　 各10～100pmol　

模板DNA 　 　0.1～2ug　

　 　Taq DNA聚合酶 　 2.5u　

Mg2+ 1.5mmol/L

加双或三蒸水至 　100ul

PCR反应五要素： 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。引物量： 每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

酶及其浓度　目前有两种Taq DNA聚合酶供应， 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶，另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时)，浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则合成产物量减少。

dNTP的质量与浓度　dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系，dNTP粉呈颗粒状，如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性，使用时应配成高浓度后，以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0～7.5，小量分装， -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中，dNTP应为50～200umol/L，尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制)，如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低)，就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合，使游离的Mg2+浓度降低。

模板(靶基因)核酸　模板核酸的量与纯化程度，是PCR成败与否的关键环节之一，传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。SDS的主要功能是： 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀； 蛋白酶K能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白，再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份，用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离，直接用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法，要防止RNase降解RNA。

Mg2+浓度　Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响，在一般的PCR反应中，各种dNTP浓度为200umol/L时，Mg2+浓度为1.5～2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高，反应特异性降低，出现非特异扩增，浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性，使反应产物减少。

PCR反应条件的选择

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。

温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。

①变性温度与时间：变性温度低，解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下，93℃～94℃min足以使模板DNA变性，若低于93℃则需延长时间，但温度不能过高，因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性，就会导致PCR失败。

②退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：

　Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T)

　复性温度=Tm值-(5～10℃)

在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合， 提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。

③延伸温度与时间：Taq DNA聚合酶的生物学活性：

　70～80℃ 150核苷酸/S/酶分子

　70℃ 60核苷酸/S/酶分子

　55℃ 24核苷酸/S/酶分子

　高于90℃时， DNA合成几乎不能进行。

PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够 的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。

1.PCR反应的最适条件

4．1 TaqDNA聚合酶

在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在370C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90C以上进行，故在每两个循环之间要加入新的DNA聚合酶，使得整过程整个实验过程很繁琐和昂贵。同时在370C，引物与DNA模板之间会发生分子非特异性结合，最终导致很多非特异性DNA片段的扩增。

Taq 酶有耐高温的特性，其最适的活性温度是720C（75-80），连续保温30分钟仍具有相当的活性，而且在比较宽的温度范围内都保持着催化DNA合成的能力，一次加酶即可满足PCR操作过程自动化的实现。

（1） TaqDNA聚合酶的热稳定性及最适延伸温度

相对分子质量为94000的TaqDNA聚合酶的酶活性较高，大约为200000Umg，在合成时有一个较高的最适温度75-80C，转换数Kcat接近150nt/(s•酶分子)。这种活性有明显的温度依赖性。TaqDNA聚合酶虽然在90C以上合成DNA的能力有限，但高温时仍比较稳定。有人试验证明在92.5C,95C,和97.5C时，PCR混合物中的TaqDNA聚合酶分别经130分钟、40分钟和5-6分钟后仍可保持50%左右的活性，其半衰期较长。所以，在一个PCR预备试验中，每次循环时上限温度为95C（试管内）处理20秒，则循环50次后TaqDNA聚合酶仍可保持65%的活性，能够保证实验的需要。

TaqDNA聚合酶具有很高的加工合成特性，其最适延伸温度在75-80C时，dNTP的掺入速度为35-100nt/(•酶分子),最长延伸长度7。6kb，如对M13上的富含GC的30-me引物，该酶在70C的延伸率高于60nt/(•酶分子), 在55C仍有较高的延伸活性，22C和37C时延伸速度分别为0。25和1。5 nt/(•酶分子)。由此可见，在低温下，TaqDNA聚合酶一表现活性明显降低，因而，导致此酶在模板链分子内局部二级结构区域的延伸能力受损或前进速率常数与解离常数的比值发生改变。在很高的温度（90C以上）时，很少DNA合成。在体外条件下，DNA在较高温度时的合成速度受到引物或引物链与模板链的双链结构稳定性的限制。温度对TaqDNA聚合酶活性的影响见表。

由于TaqDNA聚合酶的最适延伸温度高达75-80C，故退火和延伸反应温度均可提高，限制了非特异性扩增产物的出现，增加了PCR的特异性。

4．2 模板

（1） 模板的纯度 一般不要求很高，不需要达到超纯。某些扩增实验中甚至可以直接将溶细胞液煮沸加热，用蛋白质变性后的DNA溶液作模板。但DNA溶液中不能有影响扩增反应的物质存在，例如蛋白酶、核酸酶、结合DNA的蛋白质等；另一类是尿素、十二烷基硫酸钠、卟啉类物质等；还有一类是二价金属离子的络合剂（如EDTA）等，会与Mg2+络合，影响Taq DNA聚合酶的活性。上述物质的存在会影响扩增效果，甚至使扩增失败。

（2） 模板DNA的量 一般对于单拷贝的哺乳动物基因组模板来说，100ul的反应体系中有100ng的模板已足够。有时，加的模板太多，会令扩增失败。这时如果对模板稀释后再加入反应体系中，往往能获得成功。

4．3 dNTP

dNTP储备液必须为PH7.0左右,浓度一般为2mmol/L, 分装后置-20C保存.典型的PCR扩增体系中,两种dNTP的终浓度为20-200umol/L. 理论上,100ul反应液中两种dNTP的浓度为20umol/L时,足以合成12.5ug DNA或合成10pmol 400bp的DNA片段. DNTP会络合溶液中的 Mg2+, 而且大于200umol/L的dNTP会增加Taq DNA聚合酶的错配率.如果dNTP的浓度达到1mmol/L时,则会抑制Taq DNA聚合酶活性.

4．4 Mg2+浓度

Taq DNA聚合酶在合成新DNA链时,要求有游离的Mg2+,因而在PCR系统中确定Mg2+的最适浓度是必要的. Mg2+浓度太低会无PCR产物,太高又会导致非特异的产物产生. 故常需根据各自的实验预先试验,以确定本实验的最佳Mg2+浓度,保证DNA聚合酶具有良好的活性.

通常情况下,要求反应体系中有0.5-2.5mmol/L的游离Mg2+.反应内容物中, dNTP能与Mg2+.结合,所含EDTA会与Mg2+络合,高浓度的DNA也有干扰作用,都会影响Mg2+的有效浓度.

4．5 PCR系统中的其它成分

PCR反应缓冲溶液通常用10 mmol/L Tris-HCl(PH8.3, 20C), 它是两性离子缓冲剂.此外,还有50 mmol/L KCL, 它有利于引物与模板退火.高于50mmol/L 的KCL, 或50mmol/L 的NaCl对Taq DNA聚合酶有抵制作用.明胶或血清白蛋白(100ug/ml)及非离子去污剂,如Tween20等,对Taq DNA聚合酶起稳定作用.

4．6 PCR的热循环计划

在标准反应中,将标本加热至90-95C,使DNA双链变性, 再快速冷却至40-60C使引物退火并结合到互补靶序列上,然后升温至70-75C, 在Taq DNA聚合酶的作用下掺入单核苷酸使引物沿模板延伸.每步时间从反应达到要求温度后计算. PCR反应的每一个温度循环周期都是由DNA变性引物退火和反应延伸3个步骤组成的.图中设定的反应参数是94C变性1分钟,60C退火1分钟,72C延伸1.5分钟.如此周而复始,重复进行,直到扩增产物的数量满足实验需求为止.

(1) 变性温度与时间 使靶基因模板和PCR产物完全变性是PCR成败的关键.DNA在其链分解温度时的变性只需几秒钟,但反应管内达到Tss还需一定时间,变性温度太高会影响酶活性通常情况下94-95C变性1分钟就足以使模板DNA完全变性,更高的温度可能更为有效(尤其是富含C+G的靶基因),若低于94C,则需延长变性时间.为提高起始模板的变性效果,保存酶活性,常常在加入Taq 酶之前97C先变性7-10分钟,再按94C的变性温度进入循环方式,这对PCR的成功有益处.

(2) 复性温度与时间 复性温度决定着PCR的特异性.引物复性所需的温度与时间取决于引物的碱基组成、长度和浓度。合适的复性温度应低于扩增引物在PCR条件下真实Tm值的5C，引物越短（12-15bp）,复性温度越低（40-45C）。一般来说，若降低复性温度（37C），可提高坟增产量，但引物与模板间错配现象会增多，导致非特异性扩增上升；若提高复性温度（56-70C），虽扩增反应的特异性增加，但扩增效果下降。理想的方法是：设置一系列对照反应，以确定扩增反应的最适复性温度。

（3）延伸温度与时间 Taq DNA聚合酶虽能在较宽的温度范围内催化DNA的合成，但不合适的温度仍可对扩增产物的特异性、产量造成影响。引物延伸温度一般为72C（较复性温度高10C左右），延伸时间视目标DNA片段长短和浓度而定。在最适温度下，核苷酸的掺入率为35-100nt/s，这也取决于缓冲体系、PH值、盐浓度和DNA模板的性质等，延伸1分钟对长达2kb的扩增片段是足够的，延伸时间过长会导致非特异扩增带的出现，但在循环的最后一步延伸时，为使反应完全，提高产量，可将延伸时间延长4-10分钟。

（4）循环数 循环数决定着扩增程度，常规PCR一般为25-40周期，在其他参数交已优化的条件下，最适循环数取决于靶序列的初始浓度，其相应关系参照下表

模板DNA分子数 需要热循环次数

3．0×105 25-30

1．5×104 30-35

1．0×103 35-40

50 40-45

循环次数太少，得不到一定的产物量；循环次数太多时，扩增反应的后期，产物积累的指数率下降甚至不再有正确的产物生成，正常的反应几乎停止，呈现平台效应。

影响出现平台效应的因素有：

A、反应试剂（dNTP或酶）稳定性的改变；

B、终产物（如焦磷酸）的抑制效应；

C、产物浓度超过10-5时可产生重复退火，于是会降低引物延伸速率或DNA聚合酶的活性

D、高浓度产物DNA双链的解链不宝剑。平台效应时的一种重要后果是由于错误引导，在开始时浓度不高的非特异产物会继续扩增，使结果的分析复杂化。

4．3引物的要求：

（1） 一般长15-30bp，常用20bp（理论上420=11×1011长的DNA片段才会有重复）。引物过长，扩增的效率降低。

（2） 碱基组成：C+G占50-60%（常规），尽量避免数个嘌呤和嘧啶的连续排列。

（3） 一对引物之间不能有2个以上的碱基互补，特别是3‘末端；引物之间的碱基互补会形成引物二聚体，引物本身应避免回文序列。

（4） 引物与模板退火的温度和所需的时间取决于引物的碱基组成、长度和溶液中引物的浓度。合适的退火温度是低于引物本身的实际变性温度（Tm）50C。20bp左右长度的DNA片段的Tm=(G+C) ×40C+(A+T) ×20C。退火火温度通常在55-720C下进行在标准的引物浓度（0.2umol/L）下，几秒内即可完成退火。提高退火温度可提高引物与模板结合的特异性。特别在最初几次循环中采用严谨的退火温度，有助于PCR特异性扩增。如果引物中（G+C）的含量小于50%，退火温度应低于550C。

（5） 100ul的PCR反应液中，引物的绝对量为10-100pmol。PCR反应液中2个引物浓度不等时，其浓度比为50:1，称为不对称PCR。

简并引物：由多种寡核苷酸组成的混合物，彼此之间仅有一个或数个核苷酸的差异。若PCR扩增引物的核苷酸组成顺序是根据氨基酸顺序推测而来，就需合成简并引物。

嵌套引物：利用第一轮PCR扩增产物作为第二轮PCR扩增的起始材料，同时除使用第一轮的一对特异引物外，另加1-2个新引物（处在同一个模板DNA的头两个引物之间序列）进行第二轮扩增。通过嵌套引物扩增的产物，产生错误扩增的可能性极小，所以应用嵌套引物技术能够使靶DNA序列得到有效的选择性扩增。

PCR的的应用：基因克隆、反向PCR、不对称PCR、RT-PCR、基因的体外诱变和突变检测、基因组的比较研究

洗发水的配方：

1、主表面活性剂，这主要是一些带脂肪链的盐，如十二烷基硫酸钠，还有一些像氨基酸表面活性剂的东西及皂基等。它们的作用就是清洁功能，洗净你的秀发，是香波泡沫好坏的决定者。

2、辅表面活性剂，由一些两性或非离子表面活性剂组成，它们的作用就是辅助主表面活性剂，清洁头发，同时可以降低刺激性，改善香波外观。

3、调理剂，该组分主要是由一些大分子量和小分子量混用的一些阳离子。头发基本上是带负电荷的，这些带正电荷的阳离子因此很容易吸附上去，带给头发柔软和易于梳理的效果。

4、顺滑剂，这在香波配方中同样重要，它一般指一些高分子量高粘度的硅油，它们吸附在每一根头发表面，形成很顺滑的薄膜，令头发顺滑、健康、自然。

5、香波都是有稠度的，这不可避免的要用到一些心头稠度的成分。

6、香精，香波的香型有较大范围，有花香调的，也有青香草香调的，视南北还有区别，不过，最终目的是一样的，就是结合产品的概念，带给消费者最佳的享受。

生产工艺流程图：

抹字水的主要成分是醋酸乙烯、聚乙烯醇、增粘剂、淀粉、食用消泡剂、卡松，对人体有害，吸入、皮肤接触及吞入都有害，对呼吸系统有刺激性。

抹字水是无色透明易燃液体，环保型，沸点：170，比重0.90，含量99.9%，主要清洗各种丝印不良的产品，及不烧面油墨的稀释，对产品表面无伤害。

扩展资料：

抹字水其蒸气浓度在高于建议暴露值时，会对眼睛和呼吸道有刺激性，造成头痛和眩晕。造成头痛和眩晕，可能有麻醉性，可能对其它中枢神经系统有影响。

抹字水经常或长期接触会使皮肤脱脂而干燥，造成不适和皮肤炎；通过皮肤接触会有中度毒性；可能通过皮肤表面吸入引致肝脏及肾脏损伤；会使眼部不适，如不及时消除，可损伤眼组织。

参考资料来源：

百度百科-抹字水

退字灵是什么组成的?

消字灵又叫:消字水,褪字灵,消字液.退字灵,去字灵.退字水,抹字水-褪字灵,擦字灵--能消除各种写在纸张或织物上的字迹和污渍及各种颜色的印刷图案和印刷字迹。

消字灵可以自己制作：

我们先准备好草酸、蒸馏水、高锰酸钾、浓盐酸、漂白粉。

先配甲液（草酸溶液），用角匙取少量草酸晶体、放入烧杯或锥形瓶中、加蒸馏水使之溶解。然后将此溶液倒入一只滴瓶中，标签注明甲液。

再配制乙淀（氯水或漂白粉溶液）。

①氯水的配制方法：将一角匙高锰酸钾晶体加入烧瓶中，然后再向烧瓶中加入浓盐酸，将烧瓶塞和导管连接好，固定在铁架台的石棉网上，用酒精灯加热。导管导入装有蒸馏水的锥形瓶中，片刻后将锥瓶中新制成的氯水装入乙滴瓶中。

②漂白粉溶液的配制：如果没有条件准备一套制氯水的装置，就可以用漂白粉溶液代替氯水。配制漂白粉溶液的方法比较简单。用角匙将漂白粉加入到烧杯中，然后加蒸馏水溶解。漂白粉的溶解度较小，因此配制的溶液有些浑浊。将此液倒入乙滴瓶中即可。

这样，消字灵就制成了。去字迹时，先用甲液滴在字迹上，然后再将乙液滴上一滴，字迹会立即消失。注意晾干后再将修改的字迹写上去。

在司法鉴定中常涉及到涂改、修改各种票据、遗嘱和其它法律文书等的检验鉴定。以确定其是否已经涂改？涂改前是否使用过褪色剂？为何种褪色剂等,目前国内仅有很少作者作过介绍，相关教材中也很少涉及此内容，故本课题针对国内消字灵的实际情况，对其进行成分剖析研究。

1实验条件

HNO3；HCl；Na3〔Co（NO2）6〗；Na2SO4；KOH(以上均为分析纯)。

GC－9A（配色谱工作站）；红外光谱仪；X衍射光谱仪。

2消字灵市场现状

目前，消字灵主要是通过“地下”渠道流入使用者。“消字灵”因地域不同可有不同的俗名：消字灵、褪色灵、褪色剂、消褪剂和涂改液等，它会因应用的载体（纸张）成分和书写色料不同有不同的配方组合，即消字灵套装，有一瓶、两瓶药水一套的，也有三瓶一套的，表1为不同字迹所用配方组合举例。

由于消字灵中的化学成分易受温度、光强度等因素的影响，其中几种成分易挥发，故消字灵的贮存时间一般很短，常温下（25℃）最多保存一百余天。

3有效成分剖析

3.1纯蓝、蓝黑、红墨水和圆珠笔笔迹消字灵的成分分析

钢笔墨水是最常用的书写墨水之一，其中纯蓝、蓝黑和红墨水一直是人们惯用的墨水，随着进口、国产签字笔的广泛应用，染料墨水也加入到了此行列；圆珠笔虽然不能作为存档的书写工具，但属于日常生活中最为常用书写工具，故这两类笔迹是消字灵使用的主要部分，应用此类消字灵主要有两种，效果也有所不同。两种消字灵为：A（两瓶一组）和B（一瓶一组）。笔者采用化学和仪器等方法分析其中的主要成分。

种类A为深色液体和无色液体各一瓶，两者pH值均为中性。取深色液体少量，以浓HCl酸化，加热挥干，再以少量的去离子水溶解，滴加Na3〔Co（NO2）6〗溶液，结果产生沉淀，示有K＋。深色液体少量,加入浓HNO3少量，震荡后放置，出现褐色沉淀；另取深色液体少量，小火加热挥干，得晶体，进行FIR的检测，于920～890nm处有一强吸收峰，400～380nm处有一弱吸收峰。综上所述，上述深色溶液为弱酸溶液。

无色溶液有两种，一种与种类B相同（检验方法见下），另一种溶液为中性，经加热后会产生气泡，根据其能与强氧化剂溶液发生反应，此溶液为过氧化氢。

种类B为无色溶液，pH为酸性，与深色溶液混合变成无色溶液；与氯化钙溶液反应生成白色沉淀，此沉淀不溶于醋酸。另取少量无色溶液，小火加热挥干，得无色晶体，进行FIR的检测，得到与HO2CCO2H．2H2O相同的红外光谱图，结合其还原性的特点，此溶液为弱酸溶液。其它特性见表2中A、B。

3.2复写纸字迹消字灵成分分析

复写纸的成分主要为颜料（或染料）和连结料，红、蓝、黑等色使用不同的色料，例如蓝色的色料主要有油蓝、油紫、铁蓝和酞菁蓝，连结料主要以大量的蜡为分散体，还有较多的磷酸三甲酯增塑剂和凡士林、有机胶质等。热敏（压敏）复写纸是目前越来越广泛使用的复写纸，案件中尚未发现，有关其检验鉴定方面的研究有待进行。普通复写纸的字迹消字是当前消字的主要对象，由于其成分相对固定，所配制的消字灵效果较好。

三瓶一组合的复写字迹消字灵是蓝黑墨水消字灵外加一种能溶解有机染料的溶剂，该溶剂为油性物质，以气相色谱分析条件：FID检测器，2％OV－17ChromsorbWAWDMCS60－80目,2.1m,INJT=250℃,CITP=150℃,H2：0.6atm，Air：0.6atm,N2：30ml/min，RANGE=1

3.3炭素墨水字迹的消字灵成分分析

炭素墨水的成分比较简单，其成色剂主要是炭黑。炭黑稳定，因此经常使用于文件存档记载。市售炭素墨水的消字灵是一瓶一组的无色液体，其pH为强酸性，以棉签醮取少量时棉纤维溶解；另取该消字灵少量，滴加KOH溶液至中性，挥干溶液，其固体残渣进行X衍射光谱检验，结果其图谱与KClO4相同，故该消字灵为简单的强酸。因其属于危险物品，不易在普通化试商店购得，故消字灵市场上每瓶的数量较少，一般为1～2ml，且价格特别贵。

4.1消字灵成分复杂，且其成分变化较大

经过对市售消字灵的调查，消字灵因配制者的素质、配制方法和原料来源的不同，其成分不尽相同。有些配制者为提高消字效果或消字后长期不留残痕，在其中加入一些辅助剂，如在A组中，KMnO4中加酸（HCl、HNO3）,在C组中加入其他有机溶剂等。综观这些消字灵，其主要的特点是具有氧化－还原能力的物质，或者具有较强渗透、挥发性的物质。这些物质放置的时间一长，自身就会发生化学反应。A组中KMnO4会产生MnO2沉淀，C组的成分会迅速挥发，这些结果易造成消字灵过快失效，。综观腐蚀类和漂白类消字灵，其来源相对简单，原料的价格很低，价格低廉，毒性较高，容易得到，所以是首选材料。

4.2消字灵不是万能的

（1）根据目前市场上消字灵的掌握情况，部分字迹尚不能完全消褪。随着科技的发展，文件、合同和票据等使用胶印、打印的情况越来越多，这些字迹的消字比较困难，效果也不佳，即使字迹有部分消褪，要重新更改或添加文字就相当困难，因为存在制作机器和色料等技术问题。

（2）腐蚀类和漂白类消字灵在消褪字迹的同时，往往容易不同程度地破坏载体。在一般人看来，用消字灵消褪的字迹不易察觉，许多时候能够混蒙过关，但是只要仔细观察或者用仪器进行鉴定，不难看出许多破绽。第一，经过任何溶剂涂擦的载体（纸张或文件），其局部表面会发生皱折，与同类的载体相比，整个面积缩小。第二，不同的消字灵因其成分的特点，消字后或多或少会在载体上留下痕迹，它随着时间的推移，这种痕迹会变得越来越明显，或黄或灰。第三，根据本文研究结果，消字灵涂擦在载体上本身没有荧光反应，但消字灵能够与大部分荧光素发生化学反应生成无荧光的物质，故使用过消字灵的载体往往局部不发荧光，这可以通过对光或紫外光观察。

4.3部分使用过腐蚀类和漂白类消字灵消褪的字迹，经实验证明可以重现

腐蚀类和漂白类消字灵消褪字迹的原理比较简单，当消字时药剂涂擦不重时，原有字迹的化学反应物尚遗留在原来的位置，我们可以通过反应的可逆性，涂擦化学溶剂进行重新显现，以揭示字迹的本来面目。

4.4自制消字灵经实验证明与市场上得到的效果相同

腐蚀类和漂白类尽管消字灵千差万别，但其主要成分不变。笔者按照本文实验结果配置了各种腐蚀类和漂白类消字灵，经消字试验比较，其结果几乎与市场上购得的消字灵完全相同，这再一次证明本文剖析结果的正确性。

漂白类腐蚀类速效消字灵配方

注：用本法制做的消字灵因是弱酸、弱碱做基料会让纸张表面变白或变黄

配方一：（重量份）A剂：漂白粉（有效含量60%）100、乙丙橡胶20、甲苯40。B剂：丙酮100、糠醛5、十二烷基硫酸钠0.5、乙二醇—甲醚1。

配方二：（重量份）A剂：漂白粉（有效含量60%）100、次氯酸钠（有效氯含量12%）80。B剂：丙酮100、拉开粉BX0.5。

将配方二的A剂按配方量将漂白粉添加于次氯酸钠溶液中，充分搅拌混合，得膏状体。

两个配方的B剂，分别按各自的配方量将各种原料混合均匀即得。

使用方法：使用配方一制得的消字灵时，先将A剂擦涂于需消字处；使用配方二制得的消字灵时，先用笔蘸以A剂刷涂于需消字处，然后，再用笔刷将各自的B剂分别刷涂于有A剂的需消字处，涂毕以布或棉花等擦拭。擦拭后可吹气促进蒸发。一般擦找后1分钟左右即可再次书写。

去除纺织品上圆珠笔油

可将烷基酚聚氧乙烯醚16%、单乙醇胺12%、三乙醇胺4.2%、烷基苯磺酸钠7.5%、仲烷基磺酸盐3.7%、醋酸7%、水15.6%混合均匀，配成去除剂。用另外的方法也可以，先取次氯酸钠8%、阴离子表面活性剂5%、碳酸钠2%和水85%制成第一种混合液，再取二氯苯10%、草酸8%、非离子表面活性剂9%、水73%制成第二种混合液。使用时，将两种混合液混合均匀，便成消字灵，可完全消除圆珠笔的油迹。但是只能用于纺织品，用于纸张表面会损坏纸张表面及变色！

消字灵又叫:消字水,褪字灵,消字液.退字灵,去字灵.退字水,抹字水-褪字灵,擦字灵--能消除各种写在纸张或织物上的字迹和污渍及各种颜色的印刷图案和印刷字迹。 在司法鉴定中常涉及到涂改、修改各种票据、遗嘱和其它法律文书等的检验鉴定。以确定其是否已经涂改？涂改前是否使用过褪色剂？为何种褪色剂等,目前国内仅有很少作者作过介绍，相关教材中也很少涉及此内容，故本课题针对国内消字灵的实际情况，对其进行成分剖析研究。 1实验条件 HNO3；HCl；Na3［Co（NO2）6〗；Na2SO4；KOH(以上均为分析纯)。 GC－9A（配色谱工作站）；红外光谱仪；X衍射光谱仪。 2消字灵市场现状 目前，消字灵主要是通过“地下”渠道流入使用者。“消字灵”因地域不同可有不同的俗名：消字灵、褪色灵、褪色剂、消褪剂和涂改液等，它会因应用的载体（纸张）成分和书写色料不同有不同的配方组合，即消字灵套装，有一瓶、两瓶药水一套的，也有三瓶一套的，表1为不同字迹所用配方组合举例。 由于消字灵中的化学成分易受温度、光强度等因素的影响，其中几种成分易挥发，故消字灵的贮存时间一般很短，常温下（25℃）最多保存一百余天。 3有效成分剖析 3.1纯蓝、蓝黑、红墨水和圆珠笔笔迹消字灵的成分分析 钢笔墨水是最常用的书写墨水之一，其中纯蓝、蓝黑和红墨水一直是人们惯用的墨水，随着进口、国产签字笔的广泛应用，染料墨水也加入到了此行列；圆珠笔虽然不能作为存档的书写工具，但属于日常生活中最为常用书写工具，故这两类笔迹是消字灵使用的主要部分，应用此类消字灵主要有两种，效果也有所不同。两种消字灵为：A（两瓶一组）和B（一瓶一组）。笔者采用化学和仪器等方法分析其中的主要成分。 种类A为深色液体和无色液体各一瓶，两者pH值均为中性。取深色液体少量，以浓HCl酸化，加热挥干，再以少量的去离子水溶解，滴加Na3［Co（NO2）6〗溶液，结果产生沉淀，示有K＋。深色液体少量,加入浓HNO3少量，震荡后放置，出现褐色沉淀；另取深色液体少量，小火加热挥干，得晶体，进行FIR的检测，于920～890nm处有一强吸收峰，400～380nm处有一弱吸收峰。综上所述，上述深色溶液为弱酸溶液。 无色溶液有两种，一种与种类B相同（检验方法见下），另一种溶液为中性，经加热后会产生气泡，根据其能与强氧化剂溶液发生反应，此溶液为过氧化氢。 种类B为无色溶液，pH为酸性，与深色溶液混合变成无色溶液；与氯化钙溶液反应生成白色沉淀，此沉淀不溶于醋酸。另取少量无色溶液，小火加热挥干，得无色晶体，进行FIR的检测，得到与HO2CCO2H．2H2O相同的红外光谱图，结合其还原性的特点，此溶液为弱酸溶液。其它特性见表2中A、B。 3.2复写纸字迹消字灵成分分析 复写纸的成分主要为颜料（或染料）和连结料，红、蓝、黑等色使用不同的色料，例如蓝色的色料主要有油蓝、油紫、铁蓝和酞菁蓝，连结料主要以大量的蜡为分散体，还有较多的磷酸三甲酯增塑剂和凡士林、有机胶质等。热敏（压敏）复写纸是目前越来越广泛使用的复写纸，案件中尚未发现，有关其检验鉴定方面的研究有待进行。普通复写纸的字迹消字是当前消字的主要对象，由于其成分相对固定，所配制的消字灵效果较好。 三瓶一组合的复写字迹消字灵是蓝黑墨水消字灵外加一种能溶解有机染料的溶剂，该溶剂为油性物质，以气相色谱分析条件：FID检测器，2％OV－17ChromsorbWAWDMCS60－80目,2.1m,INJT=250℃,CITP=150℃,H2：0.6atm，Air：0.6atm,N2：30ml/min，RANGE=1 3.3炭素墨水字迹的消字灵成分分析 炭素墨水的成分比较简单，其成色剂主要是炭黑。炭黑稳定，因此经常使用于文件存档记载。市售炭素墨水的消字灵是一瓶一组的无色液体，其pH为强酸性，以棉签醮取少量时棉纤维溶解；另取该消字灵少量，滴加KOH溶液至中性，挥干溶液，其固体残渣进行X衍射光谱检验，结果其图谱与KClO4相同，故该消字灵为简单的强酸。因其属于危险物品，不易在普通化试商店购得，故消字灵市场上每瓶的数量较少，一般为1～2ml，且价格特别贵。 4.1消字灵成分复杂，且其成分变化较大 经过对市售消字灵的调查，消字灵因配制者的素质、配制方法和原料来源的不同，其成分不尽相同。有些配制者为提高消字效果或消字后长期不留残痕，在其中加入一些辅助剂，如在A组中，KMnO4中加酸（HCl、HNO3）,在C组中加入其他有机溶剂等。综观这些消字灵，其主要的特点是具有氧化－还原能力的物质，或者具有较强渗透、挥发性的物质。这些物质放置的时间一长，自身就会发生化学反应。A组中KMnO4会产生MnO2沉淀，C组的成分会迅速挥发，这些结果易造成消字灵过快失效，。综观腐蚀类和漂白类消字灵，其来源相对简单，原料的价格很低，价格低廉，毒性较高，容易得到，所以是首选材料。 4.2消字灵不是万能的 （1）根据目前市场上消字灵的掌握情况，部分字迹尚不能完全消褪。随着科技的发展，文件、合同和票据等使用胶印、打印的情况越来越多，这些字迹的消字比较困难，效果也不佳，即使字迹有部分消褪，要重新更改或添加文字就相当困难，因为存在制作机器和色料等技术问题。 （2）腐蚀类和漂白类消字灵在消褪字迹的同时，往往容易不同程度地破坏载体。在一般人看来，用消字灵消褪的字迹不易察觉，许多时候能够混蒙过关，但是只要仔细观察或者用仪器进行鉴定，不难看出许多破绽。第一，经过任何溶剂涂擦的载体（纸张或文件），其局部表面会发生皱折，与同类的载体相比，整个面积缩小。第二，不同的消字灵因其成分的特点，消字后或多或少会在载体上留下痕迹，它随着时间的推移，这种痕迹会变得越来越明显，或黄或灰。第三，根据本文研究结果，消字灵涂擦在载体上本身没有荧光反应，但消字灵能够与大部分荧光素发生化学反应生成无荧光的物质，故使用过消字灵的载体往往局部不发荧光，这可以通过对光或紫外光观察。 4.3部分使用过腐蚀类和漂白类消字灵消褪的字迹，经实验证明可以重现 腐蚀类和漂白类消字灵消褪字迹的原理比较简单，当消字时药剂涂擦不重时，原有字迹的化学反应物尚遗留在原来的位置，我们可以通过反应的可逆性，涂擦化学溶剂进行重新显现，以揭示字迹的本来面目。 4.4自制消字灵经实验证明与市场上得到的效果相同 腐蚀类和漂白类尽管消字灵千差万别，但其主要成分不变。笔者按照本文实验结果配置了各种腐蚀类和漂白类消字灵，经消字试验比较，其结果几乎与市场上购得的消字灵完全相同，这再一次证明本文剖析结果的正确性。 漂白类腐蚀类速效消字灵配方 注：用本法制做的消字灵因是弱酸、弱碱做基料会让纸张表面变白或变黄 配方一：（重量份）A剂：漂白粉（有效含量60%）100、乙丙橡胶20、甲苯40。B剂：丙酮100、糠醛5、十二烷基硫酸钠0.5、乙二醇—甲醚1。 配方二：（重量份）A剂：漂白粉（有效含量60%）100、次氯酸钠（有效氯含量12%）80。B剂：丙酮100、拉开粉BX0.5。 将配方二的A剂按配方量将漂白粉添加于次氯酸钠溶液中，充分搅拌混合，得膏状体。 两个配方的B剂，分别按各自的配方量将各种原料混合均匀即得。 使用方法：使用配方一制得的消字灵时，先将A剂擦涂于需消字处；使用配方二制得的消字灵时，先用笔蘸以A剂刷涂于需消字处，然后，再用笔刷将各自的B剂分别刷涂于有A剂的需消字处，涂毕以布或棉花等擦拭。擦拭后可吹气促进蒸发。一般擦找后1分钟左右即可再次书写。 去除纺织品上圆珠笔油 可将烷基酚聚氧乙烯醚16%、单乙醇胺12%、三乙醇胺4.2%、烷基苯磺酸钠7.5%、仲烷基磺酸盐3.7%、醋酸7%、水15.6%混合均匀，配成去除剂。用另外的方法也可以，先取次氯酸钠8%、阴离子表面活性剂5%、碳酸钠2%和水85%制成第一种混合液，再取二氯苯10%、草酸8%、非离子表面活性剂9%、水73%制成第二种混合液。使用时，将两种混合液混合均匀，便成消字灵，可完全消除圆珠笔的油迹。但是只能用于纺织品，用于纸张表面会损坏纸张表面及变色！