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制备小鼠染色体标本时,秋水仙素,氯化钾,乙醇,冰乙酸的作用分别是什么

缥缈的毛衣
踏实的保温杯
2023-01-26 01:30:30

制备小鼠染色体标本时,秋水仙素,氯化钾,乙醇,冰乙酸的作用分别是什么?

最佳答案
甜美的胡萝卜
瘦瘦的小懒虫
2026-04-19 02:12:16

蛙骨髓细胞染色体玻片标本的制作

一、实验目的

1、了解动物细胞染色体制片的原理。

2、学习蛙骨髓细胞染色体制片的方法。

3、观察蛙染色体的数目和形态。

二、实验原理

小型动物染色体制片最好、最有效的材料就是骨髓组织。在骨髓细胞中,有丝分裂指数相当高,可直接得到中期细胞。为提高有丝分裂指数,实验前,于动物腹腔内注射一定量的秋水仙素溶液,取骨髓后,经低渗处理、固定、滴片、空气干燥后即可获得良好的中期分裂相。

三、实验材料、

蛙类

四、器具及药品

注射器,离心管、解剖器、离心机,冰箱、电子天平,显微镜,搪瓷缸,载玻片,烧杯,滴管,秋水仙素,KCl,甲醇、冰乙酸,乙醇。

五、实验步骤

一离心法(适合于个体大的蛙)

1、前处理

目的:改变细胞质的粘度,抑制或破坏纺锤体的形成,使染色体缩短和分散,获得较多中期分裂相。

实验前8-20小时,将蛙称重,按每克体重10-40ug的剂量(无尾类10-20ug,有尾类30-40ug)经腹腔注射秋水仙素溶液,秋水仙素溶液浓度100-1000ug/ml,按蛙大小来配。

2、取骨髓细胞

将蛙麻醉,用手术剪剥开腹腔,取下四肢骨,剔净肌肉,放到盛有0.046mol/l的KCl的小烧杯中洗一下,用镊子夹出来,剪掉两端关节,将装有0.046mol/l的KCl的注射器从骨一头插入,冲骨髓细胞于干净的离心管内,反复冲洗几次,直到骨变白为止。注意这一过程不要让组织块掉入离心管。

3、低渗处理

目的:使细胞吸水膨胀,细胞膜易破裂,有助于染色体的分散。

当骨髓细胞全部冲入离心管后,开始计时,即低渗开始。室温下低渗处理30-40分钟,在此过程中,要用吸管反复吹打。

另外取预先洗净的载玻片放入盛有蒸馏水的搪瓷缸中,置冰箱中冰冻。

4、固定

目的:尽快杀死细胞,使细胞尽可能保持原有的状况,并且还可以去掉细胞质。

将离心管两两平衡后,对称放入离心机内,以1000转/分离心10分钟,轻轻取出,弃上清液,沿管壁缓慢加入现配卡诺氏固定液6ml左右,并用吸管吹散细胞团,固定30分钟,平衡后再离心,弃上清液,加卡诺氏固定液进行第二次固定。

注意,固定液要现配,每次离心前都要平衡,离心的时间、速度均同第一次。由于每离心一次,细胞要损失30%左右,因此对个体小的蛙第二次固定也可省去,但固定次数少,细胞质不易去掉,影响效果,固定次数多,离心后细胞损失多。这一茅盾的解决有待多次实验的摸索,原则上大型蛙可固定2-3次,小型蛙1次。

最新回答
眯眯眼的手链
懦弱的乌冬面
2026-04-19 02:12:16

①用作反应溶剂,如卤代烃的消去反应。

②反应物,如乙醇的消去反应,生成乙酸乙酯的反应等。

③有时候将乙醇作为迅速脱水的试剂(但多用于无机实验),因乙醇的沸点低且与水互溶,可将过滤后残留的大部分水替换为乙醇。

④洗涤反应容器的试剂。

储存运输

储存方法

存储于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放,切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

靓丽的芒果
尊敬的电灯胆
2026-04-19 02:12:16
现列举不同浓度的酒精在高中生物实验中的应用如下。 (一)体积分数为50%的酒精 1.1 作用:洗去浮色。 1.2 原理:苏丹Ⅲ是弱酸性染料,易溶于体积分数为50%酒精。 1.3 应用: 脂肪的鉴定实验。在该实验中,用苏丹Ⅲ对花生子叶薄片染色后,在薄片上滴1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,可以洗去被染玻片标本上的苏丹Ⅲ染液浮色。 (二)体积分数为95%的酒精 2.1 作用: ① 解离; ② 析出提取含杂质较少的DNA。 2.2 原理: ① 解离原理:用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精1∶1混合,能使组织中的细胞相互分离开来; ② 析出提取含杂质较少的DNA的原理:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。 2.3 应用 ① 观察植物细胞的有丝分裂; ② DNA的粗提取与鉴定。 (三)体积分数为75%的酒精 3.1 作用:消毒杀菌。 3.2 原理: 体积分数为75%的酒精,能够顺利地渗入到细菌体内,吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能,以达到消毒杀菌的目的。高于体积分数为75%浓度的酒精与细菌接触时,就可能使得菌体表面迅速凝固,形成一层薄膜,阻止了酒精继续向菌体内部渗透,待到适当时机,薄膜内的细胞可能将薄膜冲破而重新复活。在此高浓度下,酒精迅速凝固蛋白质的作用往往随着其浓度升高而增强,因此,其消毒杀菌的效果也就越差。若酒精的浓度低于75%,也因不能顺利地渗入到细菌体内而彻底杀死细菌。如果使用体积分数为75%的酒精,既能使组成细菌的蛋白质凝固,又不能形成薄膜,这样,酒精可继续向内部渗透,从而达到较好的消毒效果。值得注意的是,体积分数为75%的酒精溶液的杀菌能力不是绝对很强,它对芽孢就不起作用。 3.3 应用: 学习微生物的培养技术。在接种开始时,待用肥皂将双手洗干净后,再用体积分数为75%的酒精棉球擦拭双手,然后在进行接种操作。 (四)无水酒精 4.1 作用:提取色素。 4.2 原理: 叶绿体中的各种色素均是有机物,能溶解在有机溶剂中,各色素在无水酒精中的溶解度较大,且酒精无毒,方便操作。 4.3 应用:叶绿体中色素的提取与分离。 (五)工业酒精(一般是体积分数为95%的酒精) 5.1 作用:燃烧加热。 5.2 原理: 酒精是富含能量的有机物,燃烧能产生大量的热量。 5.3 应用: 此处包括各类必须加热的实验,如生物组织中还原糖的鉴定、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取与鉴定、温度对酶活性的影响、学习微生物培养的基本技术、自身固氮菌的分离等实验。

欢喜的银耳汤
喜悦的板凳
2026-04-19 02:12:16
主要目的是去除多余杂质,提高实验准确度

提取的RNA经异丙醇沉淀后,总会含有一些未除去的蛋白和其它杂质分子,这些蛋白和杂质分子如果不除尽的话,就会直接影响所提取的RNA的纯度和稳定性。为此,就需要用70%乙醇洗涤沉淀(因为在70%乙醇里RNA是不溶的,而一些蛋白和其它杂质分子却可溶),并且最好是洗涤2次,然后高速离心后,倒去上清,即可得到较纯的RNA沉淀。

慈祥的黄豆
怡然的雨
2026-04-19 02:12:16
向 1ml 小鼠红细胞悬液中加入 5ml 浓度为 0.3mol/l 的乙醇溶液,会发生什么现象

由题干信息可知,根据红细胞悬液澄清的速度判断红细胞的溶血速度来判断葡萄糖和甘油进入细胞的速度,葡萄糖和甘油是自变量,进入红细胞的速度为因变量.<COO根据对照、单一变量的实验原则设计实验判断葡萄糖和甘油进入红细胞的速度,由于实验具有不确定性,即属于探究实验,因此结果分析时要考虑其全面性。从“相等、大于、小于”三种情况加以预测.

明理的烤鸡
可靠的斑马
2026-04-19 02:12:16

清洗老鼠粘上的胶可以使用酒精、花露水、风油精等。

以使用酒精清洗为例,具体步骤为:

1、首先要准备好适量的酒精,可以将其放入一个小喷壶中。

2、然后将酒精喷洒在有老鼠粘胶的位置,这样可以让酒精和粘胶相互作用。

3、等待一段时间后就可以使用抹布将其擦拭干净了。

实验小鼠基本特征:

实验小鼠是指遗传背景明确或来源清晰,其携带的微生物及寄生虫可控,可应用于科学研究的动物。应用最广泛主要有近交系、封闭群等。其基本特征如下:

1. 体型小、寿命仅2~3年、繁殖力强;

2. 性情温顺,胆小易受惊,一般不咬人;

3. 喜黑暗安静环境,习惯于昼伏夜动;

4. 门齿终生生长,需啃咬坚硬物品磨牙。

为了获得高品质、标准化实验小鼠和重复率高的科学实验数据,良好的环境控制、标准化的饲料和科学化的饲养是必要条件。

完美的毛豆
端庄的树叶
2026-04-19 02:12:16
催化。两分子具有活泼氢的α-醛酮在稀酸或稀碱的催化下发生分子间缩合反应生成β-羟基醛酮即羟醛酮;若提高反应温度则进一步失水生成α,β-不饱和醛酮,这种反应叫羟醛缩合反应。这是合成α,β-不饱和羰基化合物的重要方法,也是有机合成中增长碳链的重要反应。

帅气的早晨
迅速的丝袜
2026-04-19 02:12:16
1材料和方法

1.1实验动物

健康雄性昆明种小鼠70只,体质量(25±2)g。所有小鼠先在实验室适应2d,确定其活动、进食均无异常后用于实验

1.2试剂与仪器:

氢溴酸东莨菪碱亚硝酸钠无水乙醇。Morris 水迷宫和visutrack动物行为分析软件(上海欣软)。

1.3 Morris水迷宫的方法

Morris水迷宫实验:30只小鼠按照随机数字表法随机分为三组,空白组10只,东莨菪碱组10只,乙醇组10只,Morris水迷宫实验包括定航实验和主动探索实验。前4d为定航实验,每天训练4次,每次从不同的入水点将小鼠面向池壁放入水池。水面高出平台1cm,水中加入适量墨汁,使小鼠看不到平台,温度维持在22~24℃。测试时间为90s,在平台上停留超过2s即为寻台成功。每次测试前小鼠在平台上有10s的前适应,测试完毕无论成功与否还有10s的后适应。小鼠从入水到寻台成功所需时间记作逃避潜伏期,寻台失败则逃避潜伏期记作90s,每一天训练4次结果的平均值作为当天训练的总结果。第5天为探索实验,撤去平台,选择平台所在象限对角象限作为入水点,记录90s内小鼠的穿台次数。

1.4Morris水迷宫实验模型建立

①记忆获得障碍模型在动物进行定航和主动探索实验之前15~20min,给动物腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(胆碱能M受体拮抗剂,1mg/kg).②记忆再现障碍模型于动物下次测试之前15min给小鼠灌服乙醇(35%,0.1mL/10g体质量),15min后进行重测试。主要观察指标:避暗实验中的避暗潜伏期、避暗错误次数、小鼠将头部及前爪全部伸入洞口的次数(简称探头数)Morris水迷宫实验中的每次训练定位航行逃避潜伏期的时间和主动探索穿越平台的次数。

2 Morris水迷宫实验结果

2.1定位航行实验结果

由图3可知,与空白对照组比较,随着时间的延长,东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中逃避潜伏期均显著延长(P<0.05或P<0.01),乙醇模型组小鼠逃避潜伏期也延长,但无明显差异。

由图4可知,东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中总路程仍明显增多(P<0.05或P<0.01),乙醇模型组与空白组相比无明显差异。

2.2主动探索实验结果

训练结束后,第5d为主动探索实验,撤去平台,选择平台所在象限对角象限作为入水点,记录90s内大鼠的穿台次数。由图5可见,东莨菪碱模型组穿越平台的次数较空白组明显减少(P<0.05),具有统计学意义。乙醇模型组与空白对照组相比无明显变化。

3讨论

Morris水迷宫是一种经典的学习记忆功能评价方法,定航实验和探索实验分别反映了动物的空间学习能力和空间记忆能力。本实验的定位航行和主动探索实验结果显示:东莨菪碱小鼠模型组定位航行逃避潜伏期明显延长而主动探索穿越平台的次数明显减少(p<0.01或p<0.05),乙醇模型组无明显差异(p>0.05)。提示东莨菪碱能够造成空间学习记忆障碍模型,而乙醇组不能作为空间学习记忆障碍模型的造模药物。

综上所述,本文综合比较了三种不同药物建立的学习记忆障碍模型,对其形成记忆损伤的持续时间和用药剂量进行摸索和比较,成功建立了有效的小鼠学习记忆障碍模型,在恰当的时间进行药物干预,从而更好地评价改善学习记忆障碍新药的效果。