苯酚红如何配制

溶液的配制方法：取0.1 g苯酚红与5.7 mL 0.05 mol/L的NaOH溶液在研钵中研匀后用纯水溶解制成250 mL试液。

酚红的作用: 酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,但是酚红具有一定的固醇类激素样作用,如雌激素样作用,尤其对于所培养的哺乳类动物细胞,可能发生的固醇类反应不可忽视。

1g苯酚红溶于约1300ml水、约350ml乙醇、500ml丙酮。用这三种溶剂直接溶解，不可能达到0.5%的浓度。苯酚红做酸碱指示剂的时候，一般配成0.1%。

称取1.6g1，10-菲罗啉及1g硫酸亚铁铵(或0.7g硫酸亚铁)，溶于100mL水中，贮存于棕色瓶中。

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其他指示剂和指示液的制备

8.1 百里香酚蓝-酚酞混合指示液

取3份体积百里香酚蓝溶液(1g/L)和2份体积酚酞溶液(1g/L)混合均匀。

8.2 甲基红-亚甲基蓝混合指示液

将50mL甲基红溶液(2g/L)和50mL亚甲基蓝溶液(1g/L)混合。

8.3 酸性铬蓝K-萘酚绿B混合指示剂

称取0.1g酸性铬蓝K，0.1g萘酚绿B和20g干燥氯化钾，置于研钵中，充分研磨混匀，贮存于棕色广口瓶中。

8.4 溴百里(香)酚蓝-苯酚红混合指示液

0.08g溴百里酚蓝和0.1g苯酚红溶于20mL乙醇中，加水50mL，用氢氧化钠溶液(4g/L)调至pH为7.5(红紫色)，再以水稀释至100mL。

8.5 溴甲酚绿-甲基橙混合指示液

6份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)和1份体积甲基橙溶液(1g/L)混合。

8.6 溴甲酚绿-甲基红混合指示液

3份体积溴甲酚绿溶液(1g/L)与1份体积甲基红溶液(1g/L)混合，摇匀，贮存于棕色瓶中。

8.7 1，10-菲罗啉-硫酸亚铁铵混合指示液

称取1.6g1，10-菲罗啉及1g硫酸亚铁铵(或0.7g硫酸亚铁)，溶于100mL水中，贮存于棕色瓶中。

8.8 甲基红指示液(1g/L)

称取0.10g甲基红，溶于乙醇，用乙醇稀释至100mL。

8.9 溴甲酚绿指示液(2g/L)

称取0.20g溴甲酚绿溶解于6mL氢氧化钠溶液(4g/L)和5mL乙醇中，用水稀释至100mL。

8.10 甲基橙指示液(1g/L)

称取0.10g甲基橙，溶于70℃水中，冷却，用水稀释至100mL。

8.11 酚酞指示液(10g/L)

称取1.0g酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100mL。

8.12 溴(甲)酚蓝指示液(1g/L)

称取0.10g溴酚蓝，溶于乙醇，用乙醇稀释至100mL。

8.13 钙指示液(钙羧酸指示剂)

称取0.20g钙指示剂〔2-羟基-1-(2-羟基-4-磺酸-1-萘偶氮)-3-萘甲酸〕(C21H14N2O7S)或其钠盐与10g在105℃干燥的氯化钠，置于研钵中研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。

8.14 铬黑T指示剂

将1.0g铬黑T与100.0g干燥的氯化钠，置于研钵中，研细混匀。贮存于棕色磨口瓶中。

8.15 铬黑T指示液(5g/L)

称取0.50g铬黑T和4.5g氯化羟胺，溶于乙醇中，用乙醇稀释至100mL，贮存于棕色瓶中。可保持数月不变质。

8.16 百里香酚蓝指示液(1g/L)

溶解0.10g百里香酚蓝于2.2mL氢氧化钠溶液(4g/L)和5mL乙醇中，稀释至100mL。

8.17 孔雀绿指示液(1g/L)

称取0.10g孔雀绿，溶于水，稀释至100mL。

8.18 二甲酚橙指示液(2g/L)

称取0.20g二甲酚橙，溶于水，稀释至100mL。

8.19 二苯偶氮碳酰肼指示液(5g/L)

将0.50g二苯偶氮碳酰肼(C13H12ON4)溶于乙醇，用乙醇稀释至100mL。溶液贮存于冰箱中。

8.20 对硝基苯酚指示液(1g/L)

称取0.10g对硝基苯酚，溶于乙醇，用乙醇稀释至100mL。

8.21 苯酚红指示液(0.2g/L)

将0.05g苯酚红，2.85mL氢氧化钠溶液(2g/L)和5mL乙醇一起温热，待溶解后，加入50mL乙醇，用水稀释至250mL。

8.22 达旦黄指示液(0.4g/L)

称取0.04g达旦黄，溶于乙醇中，用乙醇稀释至100mL。

8.23 硫酸铁铵指示液(80g/L)

溶解8.0g硫酸铁铵〔NH4Fe(SO4)2.12H2O〕在约75mL水中，过滤，加几滴硫酸，稀释至100mL。

8.24 淀粉指示液(10g/L)

8.24.1 1g可溶性淀粉与5mg红色碘化汞混合，并用足够冷的水调成稀薄的糊状，在不断搅拌下，慢慢注入100mL沸水中，煮沸混合物，充分搅拌至稀薄透明的流动形式，冷却后使用。

8.24.2 将1g可溶性淀粉与5mL水制成糊状，搅拌下将糊状物加入100mL水中，煮沸几分钟后冷却，使用期限二周。溶液中加入几滴甲醛溶液，使用期限可延长数月。

无机盐：氯化钠、氯化钙、氯化钾、无水磷酸二氢钠、六水合氯化镁等。

氨基酸：L-盐酸精氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-谷氨酰胺、L-酪氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸等。

维生素：维生素B1、维生素B2、维生素b12、维生素C、D-生物素、盐酸吡哆醛等。

其 它：无水葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤、亚油酸、硫辛酸、苯酚红等。

【M199培养基配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容

器。加注射用水(水温20℃～30℃)到47.5 升，轻微搅拌溶解。

⑵ 加入114.5克碳酸氢钠。

⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至50 升。

⑷ 如果必要，用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH 至所需值。

⑸ 用 0.2μm 滤膜正压过滤除菌。

⑹ 溶液应在2℃-8℃下避光保存。

名称 变色pH范围 颜色变化 配制方法 百里酚蓝0.1% 1.2-2.8

8.0-9.6 红-黄

黄-蓝 0.1g指示剂与4.3mL 0.05mol/LNaOH溶液一起研匀，加水稀释成100mL 甲基橙0.1% 3.1-4.4 红-黄 将0.1g甲基橙溶于100mL热水 溴酚蓝0.1% 3.0-4.6 黄-紫蓝 0.1g溴酚蓝与3mL 0.05mol/L NaOH 溶液一起研磨均匀，加水稀释成100mL 溴甲酚0.1% 3.8-5.4 黄-蓝 0.01g指示剂与21mL0.05mol/L NaOH溶液一起研匀，加水稀释成100mL 甲基红0.1% 4.8-6.0 红-黄 将0.1g甲基红溶于60mL乙醇中，加水至100mL 中性红0.1% 6.8-8.0 红-黄橙 将中性红溶于乙醇中，加水至100mL 酚酞1% 8.2-10.0 无色-淡红 将1g酚酞溶于90mL乙醇中，加水至100mL 百里酚酞0.1% 9.4-10.6 无色-蓝色 将0.1g指示剂溶于90mL乙醇中加水至100mL 茜素黄0.1%混合指示剂 10.1-12.1 黄-紫 将0.1g茜素黄溶于100mL水中 甲基红-溴甲酚绿 5.1 红-绿 3份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液与1份0.1%甲基红乙醇溶液混合 百里酚酞-茜素黄R 10.2 黄-紫 将0.1g茜素黄和0.2g百里酚酞溶于100ml乙醇中 甲酚红-百里酚蓝 8.3 黄-紫 1份0.1%甲酚红钠盐水溶液与3份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液。 甲基黄0.1 2.9-4.0 红-黄 0.1g指示剂溶于100mL90%乙醇中 苯酚红0.1 6.8-8.4 黄-红 0.1g苯酚红溶于100mL60%乙醇中 化学式：C20H14O4

酚酞为白色或微带黄色的细小晶体。熔点258-262℃，相对密度1.27。溶于乙醇（难溶于水而易溶于酒精。因此通常把酚酞配制成酒精溶液使用），溶于稀碱溶液呈深红色，溶于酸性溶液颜色不发生变化,微溶于醚，不溶于水，无臭，无味。由邻苯二甲酸酐和苯酚在加入脱水剂的条件下加热至115-120℃进行缩合制得。 中文名称：钙指示剂；酸性媒介黑R；铬蓝黑R；依来铬蓝黑R；酸性铬蓝黑R；铬蓝黑 R；酸性媒介黑 R；酸性铬蓝黑 R

英文名称：Acid mordant black R； Eriochrome blue black R； 1-Naphthalenesulfonic acid, 3-hydroxy-4-[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)azo]-, monosodium salt； C.I. Mordant black 17； 3-hydroxy-4-[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)azo]-1-naphthalenesulfonic aci monos； 3-hydroxy-4-(2-hydroxy-1-naphthylazo)-1-naphthalenesulfonic acid, sodium salt；calcon-carboxylic acid

CAS：2538-85-4

分子式：C20H14N2NaO5S

分子质量：416.37 CAS: 493-52-7

分子式: C15H15N3O2

分子量: 269.31

熔点: 179-182℃

中文名称: 甲基红

性质描述: 有光泽的紫色结晶或红棕色粉末。熔点180-182℃。易溶于乙醇、冰醋酸，几乎不溶于水。

生产方法: 由邻氨基苯甲酸重氮化后，与N，N-二甲基苯胺反应而得。

用途: 甲基红是常用的酸碱指示剂之一，常浓度为0.1%乙醇溶液，pH4.4（红）-6.2（黄）。也用于原生动物活体染色。 1、从红萝卜皮中提取酸碱指示剂 刮下红萝卜的红皮后，用95%的酒精浸泡一天左右，过滤取出它的滤液即酸碱指示剂。按检验的需要制作pH1-14的标准液若干个，每个标准液取10ml分置于试管中，再分别加入红萝卜皮浸泡液10滴，塞紧作为比色样品。在某待测溶液中加入红萝卜浸泡液，颜色发生变化后再与比色样品比较，就能确定待测溶液pH值的大致范围。

2、从紫草中提取酸碱指示剂 取紫草5g，用50%的酒精浸泡一天可得到紫草素的紫色的酒精溶液即酸碱指示剂。其遇到酸碱的变色与石蕊试液相同。

3、从紫色卷心菜中提取酸碱指示剂 取约250g紫色卷心菜，洗净切碎置于不锈钢锅中加水煮沸10分钟，然后过滤冷却置于容器中即可用作酸碱指示剂。其用法可参照上述操作1的方法。

4、从米苋菜中提取酸碱指示剂，其操作方法同操作3。

5、用咖喱粉制酸碱指示剂。