工业制无水乙醇的原理

原理：使水分与生石灰结合后再进行蒸馏，后得到无水乙醇。无水乙醇是指一种物质，其结构简式是CH3CH2OH，乙醇是纯净物。而无水乙醇是纯度较高的乙醇水溶液，含量百分之99.5的叫无水乙醇。乙醇即酒精，它在常温常压下是一种易挥发的无色透明液体，低毒性，纯液体不可直接饮用。乙醇的水溶液具有酒香的气味，并略带刺激性，味甘。

（1）本实验要求无水操作,要求严密,防止大气中的湿气进入本体系 （2）不可行。如果塞紧,回流系统就成了封闭系统。封闭系统受热后,将会发生过热、冲料、爆炸、着火（酒精可燃）等意外事故 （3）不可行。氯化钙可以用作吸水剂,但它受热后又可使结合的水再释出,达不到干燥的目的,且氯化钙也可以吸附乙醇 （4）氧化钙跟水发生反应生成的氢氧化钙是不挥发的,受热也不分解,所以不影响蒸馏纯乙醇 （5）冷凝管内管管壁等仪器的表面尚附有湿气,因此最初的几毫升蒸馏液可能含有的水分相对多一些,纯度达不到99.5%,所以另外收集,以免影响所收集乙醇的纯度（每空3分） （1）整个实验过程需要避开水,因而要防止大气中的水蒸气进入装置。（2）如果用塞子把冷凝管上端塞紧,则会导致系统成为密闭系统,会导致实验事故。（3）无水氯化钙吸水后生成的产物会在受热时失水,达不到目的。（4）氧化钙与水反应生成的Ca（OH） 2 不挥发,而且受热不分解,不影响蒸馏乙醇。（5）需要考虑仪器内壁附着的水滴,使得所得乙醇的浓度降低。

回流，也称为冷凝回流。即蒸汽上升至换热器中冷凝成液体再回流到装备中。其作用有三

防止可挥发的物料因汽化而流失；

维持一定的操作压力；

维持一定的操作温度，

所以其应用于凡是在操作温度下有可汽化物料但又不允许流失；同时需要维持一定的操作温度和压力的情况。

这个问题太笼统了，由于糖蛋白中糖含量可以由90%以上到1%以下，只要含有糖和蛋白且以共价键连接都可以叫糖蛋白，糖含量较多的当然性质就像糖，蛋白含量占主要的就和蛋白的性质相近。无水乙醇是可以沉淀蛋白的，在我们具体操作中，也可以用乙醇来沉淀多糖，所以，原理上说，无水乙醇是可以沉淀糖蛋白的，但是大多是大分子的，分子量过小的话很难沉淀下来

实验D-2恒温技术与粘度实验目的1．掌握测定粘度的原理和方法。2．学会用奥式粘度计测定无水乙醇的粘度。实验原理液体粘度大小用粘度系数（）来表示。在化工生产中,输送流体使用泵的所需功率大小与流体的粘度有关。在高分子化学中它可用来测量高分子的分子量（粘均分子量）。一定体积V的液体流过半径为r，长度L的毛细管所需的时间由流体力学的波华须尔(Poiseuille)公式可知：图D2-1水银定温计与恒温槽式中P为毛细管两端的推动力。在S.I制中粘度的单位为帕秒；C.G.S制中为泊（达因秒/厘米2）。因P，r，L很难精确测量，物化中常采用相对校准的方法。即用两种液体，体积V相同，使用同一毛细管测量，设流过的时间分别为t1和t2，则：所以1：2= 1t1 ：2t2 ；而推动力P=gh；h为推动液体流动的液位差。如两液体测量时液位差相同；则有：如1 和 1，t1；（如水，1 和 1见附表，t1由实验测得）已知，再测得待测液体的密度（方法见实验“滴重法测液体表面张力”，本实验测乙醇的粘度，它的密度见附表）和时间就可计算出待测液体的粘度。实验仪器与药品恒温槽一套，奥氏粘度计一根，移液管两支，50ml烧杯两个，洗耳球一个，停表一个，分析纯无水酒精。实验步骤1.把恒温槽温度调节到实验指定温度。2.用移液管移取10毫升无水酒精于预先洗净烘干的奥氏粘度计中。在奥氏粘度计有刻度球的一端联结一乳胶管，将奥氏粘度计垂直架在恒温槽中。3.用洗耳球通过乳胶管抽气，使液面上升。当液面超过奥氏粘度计小球上刻度后（不能流入乳胶管，以免污物使酒精粘污或污物堵塞毛细管）。放开洗耳球，液面下降，用秒表记下液面流经上刻度到下刻度所需地时间。连续测定三次，误差不能超过1秒。4.将奥氏粘度计中酒精倒入回收瓶后，放入烘箱烘干（约需一刻钟，检查毛细管中应确无残留液体）.冷却后用移液管移取10毫升蒸馏水,测量操作与酒精相同。

乙醇和水的密度及水的粘度表

温度/C 5 10 15 20 25 30 35

水密度/g·cm-3 0.99999 0.99973 0.99913 0.99823 0.99708 0.99568 0.99404

乙醇密度/g·cm-3 0.80207 0.79788 0.79367 0.78945 0.78522 0.78097 0.7808

水的粘度/厘泊 1.519 1.307 1.139 1.002 0.8904 0.7975 0.7194

实验数据处理实验数据记录室温： 恒温槽温度(目标)：实验温度下水的密度酒精密度：恒温槽温度控制质量测定 液体粘度测定观察项目 最高温度 最低温度液体名称 水 乙醇温度流经毛细 观察管时间/秒 值 平均值 平均值恒温槽平均温度 粘度/厘泊恒温槽温度波动* （C） *例如写成30.05±0.05C.其中30.05为恒温槽平均温度；±0.05C为温度波动范围。思考题1． 为什么测定粘度时温度要保持恒定？2． 在用奥氏粘度计测量粘度时，为什么水和酒精用移液管移取相同体积？这个体积是否是波华须尔公式中的V？

3． 如果夏天，（例如室温30C）实验需要调节在28C；而实验室没有空调，你准备如何按排实验，绘出实验装置示意图。参考资料[1] 北京大学化学系物化教研室,物理化学实验.(第三版)313-319页.北京大学出版社(1995).[2] 钱人元等,粘度法测高聚物分子量,化学通报,7,396(1955).[3] 崔献英等,物理化学实验,23-28页.中国科学技术大学出版社(2000)[4] Hugh W. Salzberg et. al., Physical Chemistry Laboratory: Principles and Experiments,P351,MACMillan Publishing Co.,INC.(New York).

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无水乙醇粘度的测定

实验D-2恒温技术与粘度

实验目的

1．掌握测定粘度的原理和方法。

2．学会用奥式粘度计测定无水乙醇的粘度。

实验原理

液体粘度大小用粘度系数（）来表示。在化工生产中,输送流体使用泵的所需功率大小与流体的粘度有关。在高分子化学中它可用来测量高分子的分子量（粘均分子量）。一定体积V的液体流过半径为r，长度L的毛细管所需的时间由流体力学的波华须尔(Poiseuille)公式可知：

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图D2-1水银定温计与恒温槽

式中P为毛细管两端的推动力。在S.I制中粘度的单位为帕秒；C.G.S制中为泊（达因秒/厘米2）。因P，r，L很难精确测量，物化中常采用相对校准的方法。即用两种液体，体积V相同，使用同一毛细管测量，设流过的时间分别为t1和t2，则：

所以1：2= 1t1 ：2t2 ；而推动力P=gh；h为推动液体流动的液位差。如两液体测量时液位差相同；则有：

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如1 和 1，t1；（如水，1 和 1见附表，t1由实验测得）已知，再测得待测液体的密度（方法见实验“滴重法测液体表面张力”，本实验测乙醇的粘度，它的密度见附表）和时间就可计算出待测液体的粘度。

实验仪器与药品

恒温槽一套，奥氏粘度计一根，移液管两支，50ml烧杯两个，洗耳球一个，停表一个，分析纯无水酒精。

实验步骤

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1.把恒温槽温度调节到实验指定温度。

2.用移液管移取10毫升无水酒精于预先洗净烘干的奥氏粘度计中。在奥氏粘度计有刻度球的一端联结一乳胶管，将奥氏粘度计垂直架在恒温槽中。

3.用洗耳球通过乳胶管抽气，使液面上升。当液面超过奥氏粘度计小球上刻度后（不能流入乳胶管，以免污物使酒精粘污或污物堵塞毛细管）。放开洗耳球，液面下降，用秒表记下液面流经上刻度到下刻度所需地时间。连续测定三次，误差不能超过1秒。

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4.将奥氏粘度计中酒精倒入回收瓶后，放入烘箱烘干（约需一刻钟，检查毛细管中应确无残留液体）.冷却后用移液管移取10毫升蒸馏水,测量操作与酒精相同。

乙醇和水的密度及水的粘度表

温度/C 5 10 15 20 25 30 35

水密度/g·cm-3 0.99999 0.99973 0.99913 0.99823 0.99708 0.99568 0.99404

乙醇密度/g·cm-3 0.80207 0.79788 0.79367 0.78945 0.78522 0.78097 0.7808

水的粘度/厘泊 1.519 1.307 1.139 1.002 0.8904 0.7975 0.7194

实验数据处理

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实验数据记录

室温： 恒温槽温度(目标)：

实验温度下水的密度酒精密度：

恒温槽温度控制质量测定 液体粘度测定

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观察项目 最高温度 最低温度液体名称 水 乙醇

温度流经毛细

观察管时间/秒

值

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平均值 平均值

恒温槽平

均温度 粘度/厘泊

恒温槽温度

波动* （C）

*例如写成30.05±0.05C.其中30.05为恒温槽平均温度；±0.05C为温度波动范围

制备无水乙醇（共13篇）

以下是网友分享的关于制备无水乙醇的资料13篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。

无水乙醇的制备篇一

无水乙醇的制备

一、实验目的

1、2、

学习实验室用氧化钙制备无水乙醇的方法，掌握无水回流、无水蒸馏等常规无水操作。

二、实验原理

用氧化钙与95%乙醇中的水反应从而脱去水，通过无水蒸馏操作制得无水乙醇

CaO + H2O ==Ca(OH)2

三、实验装置

很多有机化学反应需要在反应体系的溶剂或液体反应物的

1

沸点附近进行，这时就要用回流装置(见下图)。回流加热前应先放人沸石，根据瓶内液体的沸腾温度，可选用水浴、油浴或石棉网直接加热等方式。在条件允许下，一般不采用隔石棉网直接用明火加热的方式。回流的速率应控制在液体蒸气浸润不超过两个球为宜（回流冷凝管长度的1/3）。

四、实验仪器与药品

电热套、磨口玻璃仪器一套、95％乙醇、氧化钙、无水氯化钙、无水硫酸铜

五、实验步骤

1、回流加热除水

在50mL圆底烧瓶中，加入20mL95％乙醇，慢慢放入8g 小颗粒状的生石灰和约0.1g氢氧化钠。装上回流装置，冷凝管上接有盛有无水氯化钙干燥管。加热回流约1h。

2、蒸馏

回流毕，改为蒸馏装置将干燥的三角烧瓶作接受器，接引管支口上接有盛有无水氯化钙干燥管，加热蒸馏。蒸馏完毕，称量计算产率。

3、蒸馏制得的无水乙醇用无水硫酸铜检验含水量。

4、测产品的折光率。（见折光率的测定）。

六、实验注意事项

1、实验所用仪器需彻底干燥；

2、所用氧化钙应为小颗粒状；

3、加热温度要适当，控制好回流速度；

4、干燥管中的棉花不要塞得太紧，干燥剂用粒状无水氯化钙。七、物理常数

无水乙醇的制备篇二

实验室制备方法：

一般先用精馏的方法把酒精提纯到95.57%的纯度，然后在95.57%酒精中加入生石灰(氧化钙) 加热回流，使酒精中的水跟氧化钙反应，生成不挥发的氢氧化钙来除去水分，然后再蒸馏，这样可得99.5%的无水酒精。如果还要去掉残留的少量水，可以加入金属镁来处理，可得100%乙醇，也叫做绝对酒精，即是无水乙醇。

工业制备方法

在普通酒精中加入一定量的苯，再进行蒸馏。于64.9 ℃沸腾，蒸出苯、乙醇和水的三元恒沸混合物(比例为74∶18.5∶7.5) ，这样可将水全部蒸出。继续升高温度，于68.3 ℃蒸出苯和乙醇的二元混合物(比例为67.6∶32.4) ，可将苯全部蒸出。最后升高温度到78.5 ℃，蒸出的是无水乙醇。

注：工业上也使用强酸性阳离子交换树脂(具有极性基团，

能强烈吸水) 来制取无水酒精。化工111班司会芳5801111003

无水乙醇的制备篇三

无水乙醇的制备

一、实验目的

1、通过氧化钙法制无水乙醇, 了解有机化学最常用的蒸馏技术，最基本、最常用的蒸馏技术，初步掌握回流操作。学会制备教学用无水乙醇的原理和方法；

2、学会制备教学用无水乙醇的原理和方法，同时了解其他无水乙醇的制备方法。初步掌握实验室中易燃有机物的一般防火知识；

3、初步掌握实验室中易燃有机物的一般防火知识。

二、实验原理

为了制得乙醇含量为99.5％的无水乙醇，实验室中常用最简便的制备方法是生石灰法，即利用生石灰与工业酒精中的水反应生成不挥发、一般加热不分解的熟石灰（氢氧化钙，以得到无水乙醇。为了使反应充分进行，除了将反应物混合放置过夜外，还让其加热回流一段时间。制得的无水乙纯度可达99.5％，用直接蒸馏法收集。这样的无水乙醇已能满足一般实验使用。

三、实验药品及仪器

（一）实验药品100ml、95％的乙醇、25g 生石灰、适量无水氯化钙；

（二）实验仪器250ml的圆底烧瓶一个、蒸馏瓶一个、温度计一个、冷凝管一个、接受管一个、50ml 的锥形瓶一个、电热套一个。

四、实验步骤

1、前期准备将100ml 95％乙醇、25g 生石灰装入250ml 圆底烧瓶，摇匀后用橡皮塞塞紧并放置；

2、回流将装有放置过夜的物料的圆底烧瓶加上球型冷凝管，装配好回流装置并在电热套上加热回流2h 。装配好回流装置并在电热套上加热回流2h 。注意控温，保持微沸状态。

3、蒸馏回流结束后，待反应体系稍冷，将其改装成蒸馏装置。用电热套加热蒸馏出无水乙醇。用事先已干燥且已称重的锥形瓶作为接受器，收集馏分，一直蒸馏到几乎无液滴馏出为止（成龟裂状）

称重(W2—W1) ×0.995

回收率＝100×0.955×0.804×100％

式中：W1——空接受器重，W2——接受器和蒸出的无水乙醇重，0.804——95.5％的工业乙醇的比重。

参考信息：回收率约为80～90％；

六、注意事项

1、必须在烧瓶中加入沸石，以防止在回流和蒸馏过程中发生爆沸；

2、蒸馏开始时，应使烧瓶内的物料缓慢加热，升温。当温度计的温度达到乙醇的沸点（78℃），再收集馏出液；

3、当烧瓶中的物料变为糊状物时，表示蒸馏已接近尾声。此时，应立即停止加热，利用电热套的余温将剩余的液体蒸出，以避免烧瓶过热破裂；

4、实验装置要安装得快速、安全、美观；注意仪器装配顺序，注意铁架台安装步骤；出入水管的安装方法；

5、所用仪器彻底已干燥过，因此同学们实验前切勿用水清洗实验仪器，做完实验后要洗干净，以便下次实验使用；

6、圆底烧瓶应先加样后夹在铁架台上，勿先夹后加样；

7、氧化钙25克已经是过量的了，勿再加多，大约25克就行

8、铁夹口应朝上，安全，勿朝下；

9、先将胶管与玻璃仪器连接好后，再装或夹球形冷凝管，装置要安装在同一平面；

10、开始实验时先通水后通电，实验结束时先断电后断水，等冷却后再关水；

11、先称锥形瓶，实验结束时要记住称锥形瓶与乙醇的重量

12、连接时力矩要尽量小，因易刺伤手；连接胶管时沾水，拆卸胶管时不要太用劲，若不好拆卸可将胶管剪断。

无水乙醇的制备篇四

化学与化工学院实验课程教案模板

（试行）

实验名称无水乙醇的制备

一、实验目的要求：

1、学习制备无水乙醇的原理和方法；熟练蒸馏和回流操作技术。

2、熟练蒸馏和回流操作技术。

二、实验重点与难点：

1、重点：制备无水乙醇的方法

2、难点：蒸馏和回流的操作

三、实验教学方法与手段：

陈述法，演示法

四、实验用品（主要仪器与试剂）：

1、仪器：圆底蒸馏烧瓶回流装置蒸馏装置锥形瓶

烧瓶

2、试剂：95%乙醇块状生石灰粒状NaOH

五、实验原理：

1、在一些要求较高的有机化学实验中，常常要使用无水试剂，如无水乙醇、无水乙醚、无水苯等等。由于无水试剂具有较强的吸水性，难以保存，因此通常在使用前制备。我们必须掌握利用普通试剂制备无水试剂的操作技术。

2、制备无水乙醇通常采用氧化钙法，该方法是利用95%乙醇为原料，加入干燥剂氧化钙进行回流，除去其中的水分，然后进行蒸馏，制得无水乙醇。这样制得的无水乙醇纯度可达99.5%。

3、制备无水乙醇也可以采用分子筛法、阳离子交换树脂法等。

六、实验步骤：

1、回流除水：在100ml圆底蒸馏烧瓶中加入95%乙醇30ml，小心加入块状生石灰4g、粒状NaOH1g，安装回流装置，加热回流40分钟。

2、蒸馏：回流结束后，稍冷，将回流装置改为蒸馏装置，加热蒸馏，开始蒸出的几毫升液体中含有少量的水分，弃去，用一个干燥的小锥形瓶接受后续的馏分，直至烧瓶中剩余很少的液体，结束蒸馏。

七、注意事项：

1、小心加入生石灰。

2、回流加热要用小火，防止迸溅。

3、试验结束用稀盐酸洗涤烧瓶。

八、思考题：

1蒸馏操作和回流操作应注意哪些问题？2蒸馏与回流时，加入沸石的目的是什么？ 3 素烧瓷片能否代替沸石？

4 如果在开始加热后发现未加入沸石应该怎么办？

无水乙醇的制备篇五

无水乙醇的制备（4）

一、实验目的

学习无水乙醇的制备方法；

掌握蒸馏装置的操作步骤。

二、实验仪器和仪器

直形冷凝管、蒸馏弯管、球形冷凝管、圆底烧瓶、氯化钙干燥管、干燥三角瓶、加热套、工业乙醇、氧化钙

三、实验原理

通常工业用乙醇为95.5%的纯度，由于95.5%的乙醇和

4.5%的水形成恒沸物，因此无法通过直接蒸馏的方法制取无水乙醇；

要把水除去，首先加入生石灰煮沸回流，是乙醇中的水和生石灰作用，生成氢氧化钙，然后将无水乙醇蒸出，得到无水乙醇。

四、实验步骤

搭建回流装置，顶端加氯化钙干燥管→加入50毫升工业乙醇，加入10克生石灰和几粒沸石→回流2小时→冷却→用直形冷凝管换下球形冷凝管，搭建蒸馏装置，接收弯管接三角瓶，尾端加干燥管→加热蒸馏至无液滴流出→称量无水乙醇的体积，计算回收率。

预实验重复三次。

五、思考题

1、无水乙醚的制备方法？

2、无水乙腈的制备方法？

参考文献：

王清廉、沈凤嘉，《有机化学实验》（第二版），高等教育出版社

1、两个干燥管不同；

2、讲解实验室中常用的无水试剂处理装置，结合了蒸馏装

置和回流装置；

3、乙醇比重计的用法；

4、讲义在17-18页上。

无水乙醇的制备篇六

1．了解氧化钙制备无水乙醇的原理和方法。

2．熟练掌握回流、蒸馏装置的安装和使用方法。

二、实验原理

普通的工业酒精是含乙醇95.6%和4.4%水的恒沸混合物，其沸点为78.15℃，用蒸馏的方法不能将乙醇中的水进一步除去。要制得无水乙醇，在实验室中可加入生石灰后回流，使水和生石灰结合后再进行蒸馏，得到无水乙醇。

CaO+H2O→Ca(OH)2

三、主要试剂及物理性质

95%乙醇、CaO 、NaOH 、CaCl2

四、试剂用量规格

40mL 95%乙醇40mL，10g CaO，2g NaOH

五、仪器装置

仪器：电炉、圆底烧瓶（2个，100ml和50ml）、接受管、

￥

5.9

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制备无水乙醇（共13篇）

制备无水乙醇（共13篇）

以下是网友分享的关于制备无水乙醇的资料13篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。

无水乙醇的制备篇一

无水乙醇的制备

一、实验目的

1、2、

学习实验室用氧化钙制备无水乙醇的方法，掌握无水回流、无水蒸馏等常规无水操作。

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二、实验原理

用氧化钙与95%乙醇中的水反应从而脱去水，通过无水蒸馏操作制得无水乙醇

CaO + H2O ==Ca(OH)2

三、实验装置

很多有机化学反应需要在反应体系的溶剂或液体反应物的

1

沸点附近进行，这时就要用回流装置(见下图)。回流加热前应先放人沸石，根据瓶内液体的沸腾温度，可选用水浴、油浴或石棉网直接加热等方式。在条件允许下，一般不采用隔石棉网直接用明火加热的方式。回流的速率应控制在液体蒸气浸润不超过两个球为宜（回流冷凝管长度的1/3）。

无水乙醇提取色素有两个原因，第一你已经知道了是有机物的相似相溶原理，第二是因为无水甲醇、无水乙醇是极性质子溶剂并且具备低沸点，它们对于非蛋白类色素具有极好的抓取性，类似于缚酸剂的概念，有些色素虽是有机物但却不亲绝大多数的非极性有机溶剂，比如紫甘薯、栀子蓝和叶绿素铜钠盐等等，提取环境中又有可能含有多项亲水杂质，这时候必须使用极性质子溶剂来有选择性的浸取目标物了（无水乙醇既是浸取剂，又是排障剂），甲醇有毒，乙醇和丙二醇常用但丙二醇又有胶束增溶容易引起杂质凝析，所以，乙醇是经常用于提取水溶性色素比如光合中叶绿素铜钠盐的主要溶剂。另一方面，如果是少量精密提取，我们一般不使用ar分析纯的无水乙醇，而使用无水的双脱醛乙醇，请酌情参考（比如提取红心火龙果皮中的花青素苷）。......

实验一 油镜的使用及细菌形态的观察

一、目的要求

1.复习普通光学显微镜的结构、功能和使用方法。

2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。3.观察细菌的基本形态。

二、基本原理

普通光学显微镜是利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像的～故又常被称为复式显微镜～其由机械装臵和光学系统两大部分组成。显微镜性能的优劣～不单是看它的总放大倍数～更重要的是看它分辨率的大小。分辨率,分辨力,是指显微镜能辨别物体两点间最小距离,D,的能力。最小可变距离越小～分辨率越高～其中D=λ/2NA～λ为光波波长～NA为物镜的数值孔径。可见缩短光波波长和增大数值孔径都可提高分辨率。而影响数值孔径大小的因素是镜口角,α,和介质的折射率,n,～NA=n*sinα/2。n=1.33 ～ n=1～ 水空n=1.52 ～ n=1.515～香柏油和玻璃的折射率相近～光线通过不发生折射～可见油浸系香玻

不仅能增加视野的照明度～还能增加物镜的数值孔径～从而增加显微镜的分辨力。 三、实验器材

1.菌种 球菌、杆菌、细菌三型玻片标本,7片,。2.溶液或试剂 香柏油、乙醚、乙醇 3.仪器及用品 显微镜、擦镜纸等。

四、操作步骤

1. 显微镜的放臵:略偏左、离桌缘约10cm。镜检时姿势要端正。

2. 调节光源:

3. 观察,1,低倍镜观察 ,2,高倍镜观察

,3,油镜观察:

? 用粗调节器将镜筒提起约,或使载物台下降,2cm～油镜转至下方,

? 在玻片标本的镜检部位加一滴香柏油,

?从侧面观察～转动粗调节器～徐徐上升载物台使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接,升高聚光器开足光圈～调节照明使视野的亮度合适,

? 用粗调节将载物台徐徐下降～至视野中出现物象后再用细调节调节清晰。

? 利用推进器移动标本～仔细观察并记录所观察到的结果。

4. 显微镜用毕后的处理:

?擦净镜头上的香柏油,a 先用擦镜纸擦去油镜头上的香柏油,B 再用擦镜纸沾少许乙醚酒精混合液将镜头擦2—3次～擦去镜头上的残留油迹。C 最后再用干净的擦镜纸擦拭2—3次～擦去残留的清洗液,注意沿镜头直径向一个方向擦 ,

?各部件归位,?清除掉染色玻片标本上的香柏油,按实验指导要求的方法擦, 5.实验结果分析:由学生自己总结实验是否成功～如不成功～找出原因。

五、注意事项

六、实验报告

1. 实验结果 绘出所观察到的各种细菌形态～并注明放大倍数。

2. 思考题

1,用油镜观察时应注意哪些问题,在载玻片和镜头间滴加香柏油有什么作用, 2,试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜和油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作,

3,什么是物镜的同焦现象,它在显微镜观察中有什么意义,

2

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4,影响显微镜分辨率的因素有哪些,

5,根据你的实验体会～谈谈应如何根据所观察微生物的大小选择不同的物镜进行有效的观察。

6,名词解释:数值孔径、 分辨力

绘图时应注意的问题:,1,要边观察边绘图, ,2,各部分放大数比例适当, ,3,图要真实,,4,图注尽量注在右边,,5,图形要清晰美观。

实验二 细菌的单染色法及革兰氏染色法 一、目的要求

1.学习微生物涂片、染色的基本技术2.掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术3.掌握革兰氏染色的原理、方法4.巩固显微镜油镜的使用方法。

二、基本原理

单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此方法操作简便～适于菌体形态的观察。

细菌单染色的原理:细菌单染色常用的染料:碱性染料,并不是碱～和其他染料一样是一种盐。,碱性染料电离时染料离子带正电荷。

细菌细胞在中性、碱性、弱酸性溶液中带负电荷。在细菌的组成成分中有50%以上的

II是蛋白质～组成细菌蛋白质的氨基酸等电点P值都小于7～革兰氏阳性细菌的P为2—3～

I革兰氏阴性细菌的P值为4—5～所以在中性、碱性、弱酸性溶液中～细菌通常带负电荷～易于被带正电荷碱性染料着色。常用的碱性染料有:美蓝、结晶紫、碱性复红、和番红,又称沙黄,

复染色法:是用两种或两种以上的染料对菌体进行染色的方法。革兰氏染色～芽孢染色～鞭毛染色～荚膜染色均为复染色法。

革兰氏染色的原理:革兰氏染色法是1884年丹麦病理学家Christain Gram创立的～是细菌学中重要的鉴别染色法。其方法是将细菌进行两次染色:

细菌对革兰氏染色的不同反应～主要是由于它们的细胞壁成分和结构不同。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是有肽聚糖构成的网状结构～染色过程～用乙醇处理时由于脱水作用引起网状结构孔径变小～透通性降低～使结晶紫—碘复合物被保留在细胞中不易脱色～因而呈现兰紫色,而革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低～脂类物质含量高～用乙醇处理时脂类物质溶解～细胞壁的通透性增加～结晶紫—碘复合物易被乙醇抽出～而被染上了复染液番红的颜色～因而呈现红色。

- *G细菌对革兰氏染色反应较稳定～而革兰氏阳性细菌常因条件影响发生变化。衰老或

+死亡的G细菌～往往呈阴性反应。染色操作不当～特别是用乙醇脱色过度～也会使阳性菌呈阴性反应。

三、实验器材

1(实验材料:培养16-20h的金黄色葡萄球菌,Staphylococcus aureus,或枯草芽孢杆菌

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斜面菌种(Bacillus subtilis)～培养18-24小时的大肠杆菌,Escherichia coli,

2(染色液和试剂:吕氏碱性美蓝染色液、石炭酸复红染色液,使用时将原液稀释5-10倍,、革兰氏染色液,草酸铵结晶紫、卢戈氏碘液、95%乙醇、番红染液,、水、生理盐水、无菌蒸馏水,灭6瓶250ml蒸馏水,、香柏油、二甲苯、

镁和水缓慢反应得到氢氧化镁和氢气，

而镁和乙醇很难反应的哦，镁没有那么活泼，他和水都是缓慢反应的

这个除水有点贵啊，一般确实应该是氯化钙的吧

到最后了，需要更高的要求的话，应该是用这个镁的吧