乙酸铵缓冲溶液用什么过滤

液相色谱怎样改善分离度 乙酸铵

用乙酸铵作流动相离子抑制色谱，可做抑制剂，可以防止被分离物质峰异常影响定量。 乙酸铵，结构简式CH3COONH4，又称醋酸铵。白色三角晶体，分析试剂、肉类防腐剂。 用作分析试剂、肉类防腐剂，也用作制药等。还可以作为缓冲剂和提供乙酸根配体。加入改良剂可以大大改善峰形，提高积分准确度，这里乙酸铵的作用也就是改良剂的作用，可以减少次级保留，改善峰形。

1. 2M 乙酸铵缓冲液（pH5.2)

称取154克的乙酸铵放入烧杯中

加入800ml去离子水

搅拌使其溶解后

用冰醋酸调pH值至5.2

定容到1L。

2. 0.2M 乙酸铵缓冲液（pH5.2)

称取15.4克的乙酸铵放入烧杯中

加入800ml去离子水

搅拌使其溶解后

用冰醋酸调pH值至5.2

定容到1L。

希望能帮到你！

方法提要

在pH3～9的条件下，低价铁离子与二氮杂菲生成稳定的橙色配合物，在波长510nm处有最大吸收。二氮杂菲过量时，控制溶液pH为2.9～3.5，可使显色加快。

水样先经加酸煮沸溶解难溶的铁化合物，同时消除氰化物、亚硝酸盐、多磷酸盐的干扰。加入盐酸羟胺将高价铁还原为低价铁，消除氧化剂的干扰。测定结果为总铁含量。

水样过滤后，不加盐酸羟胺，可测定溶解性低价铁含量。水样过滤后，加盐酸和盐酸羟胺，测定结果为溶解性总铁含量。

本法最低检测质量为2.5μg(以Fe计)。若取50mL水样，检测下限为0.05mg/L。

钴、铜超过5mg/L，镍超过2mg/L，锌超过铁的10倍时有干扰。铋、镉、汞、钼和银可与二氮杂菲试剂产生浑浊。

仪器

分光光度计。

试剂

盐酸。

乙酸铵缓冲溶液(pH为4.2)称取250g乙酸铵(NH4Ac)溶于150mL水中，再加入700mL冰乙酸，混匀备用。

盐酸羟胺溶液(100g/L)。

二氮杂菲溶液(1.0g/L)称取0.1g二氮杂菲(又名1，10-二氮杂菲，邻二氮菲或邻菲啰啉，有水合物及盐酸盐两种，均可用)溶于加有2滴HCl的水中，稀释至100mL。此溶液1mL可测定100μg以下的低铁。

铁标准储备溶液ρ(Fe)=100μg/mL称取0.7022g硫酸亚铁铵［(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O］溶于少量水，加3mLHCl，转入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

铁标准溶液ρ(Fe)=10.0μg/mL吸取10.00mL铁标准储备溶液，稀释至100mL。使用时现配。

所有玻璃器皿每次使用前均需用稀硝酸浸泡除铁。

校准曲线

取8个150mL锥形瓶，分别加入0mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL铁标准溶液，加水至50mL。

分别加入4mL(1+1)HC1和1mL盐酸羟胺溶液，小火煮沸浓缩至约30mL，冷却至室温后移入50mL比色管中。加2mL二氮杂菲溶液，混匀后再加10.0mL乙酸铵缓冲溶液，加水至50mL，混匀，放置10～15min。于波长510nm处，用2cm比色皿，以纯水为参比，测量吸光度，绘制校准曲线，

分析步骤

吸取50.0mL混匀的水样(含铁量超过50μg时，可取适量水样加纯水稀释至50mL)于150mL锥形瓶中。以下按校准曲线步骤操作，从曲线上查出样品管中铁的质量。

水样中总铁(TFe)的质量浓度的计算参见公式(81.9)。

注意事项

1)总铁包括水体中悬浮性铁和微生物体中的铁，取样时应剧烈振摇均匀，并立即吸取，以防止重复测定结果之间出现很大的差别。

2)乙酸铵试剂可能含有微量铁，故缓冲溶液的加入量要准确一致。

3)若水样较清洁，含难溶亚铁盐少时，可将所加各种试剂量减半，标准系列与试样应一致。

量的水使成100ml，即得。

两者不可能配制成PH=3.2的缓冲溶液，因为

PH=PKa-lg(c1/c2) 这里的PH直必须在PH=PKa+±1之间,这里的PKa=4.757,那么两者之间所配制成的缓冲溶液的PH值应该在5.757---3.757之间.

常见缓冲溶液配制方法

乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)： 取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)： 取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)： 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

方法提要

试样经碳酸钠-氧化锌混合熔剂烧结，水浸出或王水分解，在乙酸-乙酸铵缓冲溶液中，用乙酸铅沉淀溶液中的钼酸根，钼酸铅沉淀经过滤，灼烧，称量。反应式:

(NH4)2MoO4+Pb(CH3COO)2→PbMoO4+2NH4CH3COO

此法干扰元素较多，采用两次氢氧化铵沉淀，可分离大部分干扰元素。

本方法适用于含钼大于5%的试样，不适用于含钨高的试样。

试剂和材料

硝酸。

盐酸。

冰乙酸。

氢氧化铵。

碳酸钠-氧化锌混合熔剂(2+1)。

碳酸钠溶液(10g/L)。

氯化铵洗液(20g/L)每100mL中含有2mL氢氧化铵。

乙酸铅溶液(40g/L)每100mL中含有1mL冰乙酸。

乙酸铵溶液(500g/L和30g/L)。

单宁溶液(10g/L)用时现配。

分析步骤

(1)用碳酸钠-氧化锌混合熔剂烧结分解试样

称取0.5g(精确至0.0001g)试样(如为钼精矿应预先在300℃焙烧)，置于盛有8gNa2CO3-ZnO混合熔剂的25mL瓷坩埚中，混匀后，再覆盖2g混合熔剂。在高温炉中加热至300℃并保持30min，再升至700℃烧结1h。取出冷却，倒入250mL烧杯中，并将坩埚放入其中，加约50mL热水提取。如有绿色锰酸根出现，应加几滴乙醇使锰还原，加热煮沸5～10min，取下冷却。洗出坩埚，用双层定性滤纸过滤于200mL容量瓶中，用热的碳酸钠溶液洗净烧杯，并洗残渣7～8次，用水稀释至刻度，混匀。

吸取25.0～50.0mL溶液，置于250mL烧杯中用水稀释至约20mL。加甲基红指示剂2滴，用(1+1)HCl酸化至红色，再过量2mL。

(2)用王水分解试样(适用于含少量铅的试样)

称取0.2～0.5g(精确至0.0001g)试样，置于200mL烧杯中，用水润湿后加入20mLHNO3，微热至不再产生氧化氮为止，加10mLHCl，待作用缓慢后，蒸发至5～6mL。加水50mL，用氢氧化铵中和至微酸性并加热至近沸。另准备75mL(1+1)氢氧化铵于另一盖表面皿的烧杯中，加热至近沸。在剧烈的搅拌下将含钼的微酸性溶液慢慢倒入氢氧化铵中，再用水冲洗烧杯。放置至沉淀凝聚后用快速滤纸过滤，用热的氯化铵洗液洗涤4～5次。用少量水将沉淀冲至原烧杯中，加2～3mL(1+1)HCl，加热溶解沉淀。然后按上法再用氢氧化铵分离一次，用原滤纸过滤，用热的氯化铵洗液洗涤，直至洗液不再使单宁溶液变色为止。将两次滤液合并，并煮沸赶去过量的氨，调整体积至约150mL，加甲基红指示剂2滴，以(1+1)HCl酸化后再过量2mL。

于两种分解方法制得的试液中，徐徐滴加500g/LNH4Ac溶液使红色刚变黄色后再过量15mL。加10mLHAc，加热至沸。向沸腾的溶液中慢慢地滴加乙酸铅溶液至溶液上层澄清(此时取澄清溶液1滴于白瓷板上，不再与新配制的单宁溶液作用产生棕色斑点)，再过量2～3mL。煮沸10～20min，直至钼酸铅呈结晶状，并在电热板上保温1h。沉淀用致密滤纸过滤，用热的30g/LNH4Ac溶液洗净烧杯及沉淀，直至滤液不再含有铅离子(用20g/LNa2S溶液检验)。将沉淀置于已恒量的瓷坩埚中，小心烘干与灰化，在600℃灼烧15～20min，称量，再灼烧至恒量。

按下式计算钼的含量:

岩石矿物分析第三分册有色、稀有、分散、稀土、贵金属矿石及铀钍矿石分析

式中:w(Mo)为钼的质量分数，%m1为灼烧后钼酸铅沉淀的质量，gm0为空白的质量，g0.2613为钼酸铅换算成钼的系数m为称取试样的质量，g。

注意事项

1)试样中所含铜、钴、镍、锰、锌、镁和汞对本法均无干扰。铅、钙、铌、钡、锶和银等元素能与钼酸生成不溶性的钼酸盐，钨、钒、砷、磷和铬等元素在乙酸-乙酸铵介质中能与铅盐生成不溶物，与钼酸铅一起析出，对本法都有干扰。游离的无机酸和酒石酸妨碍沉淀完全。此法虽然干扰元素较多，手续烦琐，但沉淀要求的酸度范围广，钼酸铅组成稳定，准确度高，故在分析高含量钼(钼精矿)时仍被普遍采用。

2)用碳酸钠-氧化锌混合熔剂烧结，或用王水分解，两次氢氧化铵沉淀，可分离大部分干扰元素。在热的盐酸溶液中先加入稍过量的乙酸铵，然后慢慢地加入乙酸铅溶液，即使有碱土金属和铝等元素存在，也可以得到很好的结果。当有足够量乙酸铵时，硫酸根的存在不致形成硫酸铅沉淀。

3)灼烧温度不宜过高，否则钼酸铅即成熔体，影响结果。

工作原理：

流动相通过输液泵流经进样阀，与样品溶液混合，流经色谱柱，在色谱柱中进行吸附、分离，最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号，在色谱工作站上出现相应的样品峰。

液相色谱的使用：

首先对样品进行预处理，然后进样，进样完毕后，清洗进样口，每次分析结束后，清洗通道，最后关闭仪器。

扩展资料：

液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在气相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。

此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。

主要有以下几力‘面：

①操作条件及应用范围不同

对于气相色谱，是加温操作。仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质，对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难，致使其应用受到一定程度的限制，据统计只有大约20%的机物能用气相色谱分析。

而液相色谱是常温操作，不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合相对分子量较大，难汽化，不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析，大约占有机物的70%~80%。

②液相色谱能完成难度较高的分离工作

a.气相色谱的流动相载气是色谱惰性的，基本不参与分配平衡过程，与样品分子无亲和作用，样品分子主要与固定相相互作用。而在液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样品分子，为提高选择性增加了一个因素。也可选择不同比例的两种或两种以上的液体做流动相，增加分离的选择性。

b.液相色谱固定相类型多，如离子交换色谱和排阻色谱等，作为分析时，选择余地大；而气相色谱并不可能。

c.液相色谱通常在室温下操作，较低的温度，一般有利于色谱分离条件的选择。

③由于液体的扩散性比气体的小105倍，因此，溶质在液相中的传质速率慢，柱外效应就显得特别重要；而在气相色谱中，由色谱柱外区域引起的扩张可以忽略不计。

④液相色谱中，制备样品简单，回收样品也比较容易，而且回收是定量的，适合于大量制备，但液相色谱尚缺乏通用的检测器，一起比较复杂，价格昂贵。在实际应用中，这两种技术是相互补充的。

综上所述，液相色谱具有柱效高，选择性高，灵敏性高，分析速度快，重复性好，应用范围广等优点，该法已成为现代分析技术的主要手段之一。目前在化学，化工，医药，生化，环保，农业等科学领域获得广泛的应用。

高效液相色谱应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。

(1)分离混合物

高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。

通过与试样预处理技术相配合，高效液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度，可分离并同时测定性质上十分相近的物质，能够分离复杂混合物中的微量成分。并且随着固定相的发展，还可在充分保持生化物质活性的条件下完成对其的分离。

(2)生化分析

由于高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域，并已成为解决生化分析问题最有前途的方法。

(3)仪器联用

高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。高效液相色谱一质谱联用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等：高效液相色谱一红外光谱联用也发展很快，如在环境污染分析测定水中的烃类等．使环境污染分析得到新的发展

参考资料：百度百科——液相色谱