丁香酚的来源与制备
1.天然的丁香酚主要用富含丁香油的为桃金娘科植物丁香的干燥花蕾经蒸馏所得的挥发油.
再经过萃取(定含量的氢氧化钠溶液溶解分离其中的酚与非酚油,再经石油醚萃取,酸化,中和,精馏等步骤而得.
2.合成法制备丁香酚,用愈创木酚为原料,采用烯丙基氯、烯丙醇等直接烯丙基化而得。
3.工业上可以从天然精油中单离,也可由化学合成而得。但化学合成法产生的同分异构体,沸点非常接近而分离极为困难,时下以单离法为主。
天然精油单离法:
以多年生亚灌木丁香罗勒为原料,经水蒸气蒸馏得精油和水的混合物。油水混合物中加入20%的氢氧化钠,再进行水蒸气蒸馏除去非酸性物质。在50℃下将所得丁香酚钠溶液加入30%的硫酸搅拌中和至Ph=2~3(水层)。静置后分出下层粗丁香油,经减压蒸馏得丁香酚成品。
化学合成法:
将烯丙基溴、邻甲氧基苯酚、无水丙酮和无水碳酸钾加入反应釜中,加热回流数小时。冷却后加水稀释,然后用乙醚提取。提取物用10%的氢氧化钠洗涤,再用无水碳酸钾干燥。常压蒸馏回收乙醚、丙酮后进行减压蒸馏,收集110~113℃(1600Pa)的馏分,即为邻甲氧基苯基烯丙醚。将其煮沸回流1h后冷却,所得油状物用乙醚溶解,再用Lo%的氢氧化钠溶液提取,提取液经盐酸酸化后乙醚萃取。萃取液用无水硫酸钠干燥,常压蒸馏回收乙醚后即得丁香粉成品。也可由邻甲氧基苯酚与烯丙基氯在金属铜的催化和100℃下一步反应得到成品。
4.丁香油之类含有大量丁香酚的精油,加30%氢氧化钠液处理,再加无机酸或通人二氧化碳气使之析出。或使之与醋酸钠加成,以使游离出来后再经水蒸气蒸馏而得纯品。
5.丁子香酚尽管也可用合成的方法制备,但工业上一般都从植物或芳香油中分离萃出。可采用丁香罗勒为原料,丁香罗勒原产于塞舌尔、科摩罗。1965年从前苏联引入我国。在长江流域以南作为多处生亚灌本栽培。花穗中丁香罗勒油含量最高,叶次之,茎杆更次之。油中的主要成分是丁子香酚。占60-70%,尚有芳樟醇、对伞花素、罗勒烯等。合成法丁子香酚,由邻甲氧基苯酚与溴丙烯反应,再经加热重排而得。
邻甲基苯酚的官能团是羟基,有时为了和醇的官能团区分开,也就酚羟基。
(1)邻羟基苯甲酸,邻羟基苯甲酸甲酯的羟基都和苯环直接相连,也就是有酚羟基,那么可以用氯化铁溶液鉴别出邻甲氧基苯甲酸 (2)酚羟基的酸性很弱,不能和碳酸氢钠反应,但是羧基可以,那么可以用碳酸氢钠溶液鉴定邻羟基苯甲酸
邻甲基苯酚,又称邻苯酚,分子式为C7H8O,分子量为108.14,是一种无色结晶,有芳香气味,可燃。溶于约40倍的水(水中溶解度40℃时达3%,100℃时达5.3%)。溶于苛性碱液及几乎全部常用有机溶剂。
向反应混合物小心漓加1mol/L盐酸水溶液至中性。抽滤除去NaCl固体,用约10ml乙醇分两次洗涤滤渣。收集滤液,经水蒸气蒸馏蒸出三乙胺、氯仿和2-羟基-3-甲氧基苯甲醛(异香草醛),至无油珠出现为止。剩余的反应液用每次10mL乙醚萃取两次,合并萃取液,用无水硫酸钠干燥。滤去干燥剂后,水浴蒸除乙醚,得香草醛白色固体产物,产量约2.8g(76%)。粗产物进一步从乙醇中重结晶,样品用红外光谱表征其结构,指出各主要吸收峰的归属。纯的香草醛的熔点为81-83℃。
过氧化物酶活性的测定与计算(比色法)
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
一、原理
在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,该物质在 470 nm 处有最大吸收,可用分光光度计测量 470 nm 的吸光度变化测定过氧化物酶活性。 二、实验材料、试剂与仪器设备
(一)实验材料:马铃薯块茎。
(二)试剂
1 . 100 mmol / L 磷酸缓冲液 pH7.0 (见附录)。磷酸氢二钠。。。。。磷酸二氢钠。。。。。
2 .反应混合液: 100 mmol / L 磷酸缓冲液( pH7.0 ) 50 mL 于烧杯中,加入愈创木酚((邻甲氧基苯酚) 28 μl ,于磁力搅拌器上加热搅拌,直至愈创木酚溶解,待溶液冷却后,加入 30 % 过氧化氢 19 μl ,混合均匀,保存于冰箱中。
(三)仪器设备
分光光度计,研钵,恒温水浴锅, 100 mL 容量瓶,吸管, 离心机。
三、实验步骤
1 .称取植物材料1g ,剪碎,放入研钵中,加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆,以 4000 r / min 离心 10 min ,上清液转入 100 mL 容量瓶中,残渣再用 5 mL 磷酸缓冲液提取一次,上清液并入容量瓶中,定容至刻度,贮于低温下备用。
2 .取光径 1 cm 比色杯 2 只,于 1 只中加入反应混合液 3 mL 和磷酸缓冲液 1mL ,作为对照,另 1 只中加入反应混合液 3 mL 和上述酶液 1mL (如酶活性过高可稀释之),立即开启秒表记录时间,于分光光度计上测量波长 470 nm 下吸光度值,每隔 1min 读数一次。
四、结果计算
以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小,即以 ΔA 470 /[min · g (鲜重) ] 表示之。也可以用每 min 内 A 470 变化 0.01 为 1 个过氧化物酶活性单位( u )表示。 过氧化物酶活性 [u/ ( g · min ) ]=
把pH=7.0和pKa2=7.2代入,得c(H2PO4^-)=1.585*c(HPO4^2-)
磷酸盐浓度为0.01mol/L,就是c(H2PO4^-)+c(HPO4^2-)=0.01 这样可解出缓冲溶液中两种离子的浓度。
c(HPO4^2-) = 0.0039 mol/Lc(H2PO4-) =0.0061 mol/L
计算: n(P) = 0.01*1 =0.01 mol m(NaH2PO4) = 0.01*120 =1.2g NaH2PO4 + NaOH = Na2HPO4 + H2O m(NaOH) = 0.0039*1*40 = 0.156g
称取无水NaH2PO4 1.2克, NaOH 0.156克,加水溶解,再稀释至1 L即可。
邻-甲氧基苯酚 (或者2-甲氧基苯酚)在高压(50-100mbar)氢气下, 用 Pd 或者三苯基膦Ru 做催化剂, 在100°左右, 就可以得到你要的产物了。