GC-2014C气相色谱热导池检测器的能检测乙醇水吗?什么条件下分离较好?我测试的为什么乙醇老是拖尾?
检测水分不如直接买一台卡尔费休试水分测定仪。峰拖尾的话你把分流比开大一点,然后流量也开大一点试一下,看看有没有好点。还有如果是手动进样的话,速度快点。热导检测器理论上是可以检测到水分的。
产生的原因有很多,需要一个个排除寻找原因。
1、请先检查一下进样隔垫是不是漏气了
2、打开进样器,将衬管取出,用丙酮浸泡清洗,再将衬管活化、干燥,重新装入进样器中
3、检查色谱柱前端是否平齐,是否已经沾污,若有,切除一小段,重新安装色谱柱。
4、微量注射器使用时是否做好了清洗和润洗?进样技术是否不够熟练?
想要准确的测定乙醇的含量,就要把乙醇中可能含有的所有杂质峰都与乙醇峰尽量达到分离(分离度大于1.5)。而乙醇中具体会含有何种物质,应该参考乙醇的生产工艺来推断在生产过程中引入了何种物质,可能会生成何种物质等等。
那么想要使各种物质都与乙醇达到分离,就要通过调整色谱条件来做到。在不同的色谱条件下,同一物质的保留情况会发生变化。而当色谱条件变化时,不同物质的保留时间变化情况也是不一致的。也就是说,变化一个色谱条件,就会引起一系列连锁反应,导致各物质的相对保留时间出现变化,峰型也会有变化,直接影响就是各个峰之间出现分离度的变化。所以我们不能断言某种物质一定会干扰乙醇测定,因为这种物质在不同色谱条件下的与乙醇峰的分离度是不一样的。
以上所说的是用外标法测定含量。如果用面积归一化法来计算乙醇含量的话,就要考虑可能含有的杂质在该检测器下的响应值问题,因为某些物质在FID下响应值是很小的(四氯化碳,氯仿等等),这样的话,就无法得知该杂质的量,导致计算结果的不准确。就要更换检测器针对性的对该杂质进行定量检测,并在含量计算中进行扣除。同时也要注意各物质的分离度问题。
看来是柱子的问题了,分离效果不好了
换根柱子试试或者换个仪器试试,就能分出是仪器还是柱子问题了
有几个小的杂质峰?是样品里的?还是外部引入的?“与主峰离的比较近,导致杂质峰偏高,所得的数据主峰含量偏低,”是什么意思?分不开还是怎么的?
关于峰拖尾班里有相关资料的,你可以查一下。
第一:增加柱长,减少内径,增加膜厚。或者是更换新的、柱效更高的色谱柱。但如果你的色谱柱不能更换的话,这种办法就行不通了。
第二:改变分离条件。比如用低温起使的程序升温。40度-3分钟-10度/分钟--50度-20度/分钟-150度。这样的一个条件尝试一下。
第三,减少进样量,如果峰高能达到要求的话,进样量小一些分离会更好。
1、气源检查检:查发生器或者气体钢瓶是否处于正常状态;检查脱水过滤器、活性炭以及脱氧过滤器,定期更换其中的填料。
2、管线泄漏:检查定期检查管线是否泄漏,可使用肥皂沫滴到接口处检查。
3、气化室的维护:气化室包括:进样室螺帽、隔垫吹扫出口、载气入口、分流气出口、进样衬管。不同的部件有不同的维护方式:
1)进样室螺帽、隔垫吹扫出口、载气入口及分流气出口4个部件需按厂家要求定期清洗:把这几个部件从气化室上拆卸下来,放在盛有丙酮溶液的烧杯中浸泡并超声2小时,晾干后使用;若有损坏应及时更换。
2)进样衬管必须定期进行清洗,先用洗液清洗,然后用丙酮溶液浸泡,再用电吹风吹干备用,及时添加石英棉。
4、若有损坏应及时更换。
5、检测器的维护:检测器的收集器、检测器接收塔、火焰喷嘴、检测器基部、色谱柱螺帽等处,须用丙酮溶液清洗,一般超声2小时,至清洗干净,清洗后用电吹风吹干备用。
6、柱温箱的维护:柱温箱的外壳、容积区间,可用脱脂棉蘸乙醇擦洗。
DB-624,固定相为6%氰丙基苯、94%二甲基硅氧烷,它对活性化合物惰性优异、键合交联、可用溶剂清洗.所以,乙醇可以用来清洗色谱柱,在老化温度时,还可以清理柱子.
拓展:提基因组DNA的时候常出现拖尾,最可能的就是提的DNA中掺杂有蛋白质,蛋白质会拽DNA的泳动。所以一定要注意提取基因的操作,减少蛋白质等杂质的出现。其他可能的原因有以下:
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
3、可能是原液浓度太大造成的;
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENPbuffer,文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA