羟脯氨酸是什么

定义：脯氨酸羟化后的产物，为3-羟基脯氨酸(3Hyp)或4-羟基脯氨酸(4Hyp)。胶原中约50%的脯氨酸被羟基化成为4Hyp和少量3Hyp。也存在于弹性蛋白、牙齿珐琅、补体C1和伸展蛋白中。在天然蛋白质中尚未发现D-羟脯氨酸。目前vikki胶原蛋白的羟脯氨酸含量是12.8，是已经测出的最高的

羟脯氨酸是胶原蛋白特有氨基酸，人体无法合成 是胶原蛋白重要组成部分 NIPPI深海红鲷鱼胶原蛋白肽是目前鱼胶原蛋白肽里面羟脯氨酸含量最高的。羟脯氨酸是是胶原组织的主要成分之一，且为胶原中特有的氨基酸，有效的补充羟脯氨酸，可以有效帮助体内胶原蛋白的重建及弹性蛋白的再生和更新。胶原蛋白肽中羟脯氨酸含量更高，能被人体吸收的也就越多，对人体的帮助也就越大。体内起到功能的生理活性肽Pro-Hyp, X-Hyp-Gly, Gly-Pro-Hyp都有Hyp。

羟脯氨酸是氨基酸的一种，在溶液中等电点的时候最稳定，由于存在两性，在强酸碱中都会电离。

羟脯氨酸性质：白色片状结晶性或结晶性粉末。呈苦味中的独特甜味，能改善果汁饮料、清凉饮料等的风味的味质。有特殊风味，可作香原料。熔点274℃（分解）。易溶于水（25℃，36.1％），微溶于乙醇。

目录1 拼音2 英文参考3 概述4 尿羟脯氨酸的医学检查 4.1 检查名称4.2 分类4.3 化验取材4.4 尿羟脯氨酸的测定原理4.5 试剂4.6 操作方法4.7 正常值4.8 化验结果临床意义4.9 附注4.10 相关疾病 1 拼音

niào qiǎng pú ān suān

2 英文参考

urine hydroxyproline

3 概述

羟脯氨酸是胶原蛋白的组成成分，占其氨基酸总量的13%，胶原蛋白是构成结缔组织的主要成分，也是人体内含量最多的蛋白质，当体内结缔组织较大量增生或破坏时，如严重骨折、烧伤、重症肺结核和肝硬变、霍奇金病、甲状腺功能亢进、羟脯氨酸血症均可造成血、尿中羟脯氨酸含量的增加。

4 尿羟脯氨酸的医学检查4.1 检查名称

尿羟脯氨酸

4.2 分类

体液和排泄物检查 >尿液检查

4.3 化验取材

尿液

4.4 尿羟脯氨酸的测定原理

尿中羟脯氨酸主要以多肽形式存在，是体内胶原蛋白的分解产物。先用盐酸加热使结合型的羟脯氨酸水解成为游离的羟脯氨酸，再用氯胺T氧化使成为吡咯类化合物。后者与对二甲氨基苯甲醛作用生成红色化合物。

4.5 试剂

（1）1mg/ml羟脯氨酸标准贮存液：称取纯羟脯氨酸100mg，用0.01mol/L盐酸溶解并稀释至100ml，置棕色瓶中，冰箱保存。

（2）10μg/ml羟脯氨酸标准应用液：取羟脯氨酸标准贮存液1ml，用蒸馏水稀释至100ml，冰箱保存，可用2～3周。

（3）柠檬酸缓冲液：柠檬酸50g，醋酸钠120g，氢氧化钠34g，用蒸馏水800ml溶解，加冰醋酸12ml，调节pH为6.0，用蒸馏水稀释至1000ml。

（4）0.05mol/L氯胺T溶液：氯胺T1.41g，用少量甲醇溶解，再用甲醇稀释至100ml。

（5）3.15mol/L高氯酸溶液：取700g/L高氯酸27ml，用蒸馏水稀释至100ml。

（6）100g/L对二甲氨基苯甲醛溶液：对二甲氨基苯甲醛（PDMAB）10g，用甲醇溶解后，并用甲醇稀释至100ml。

4.6 操作方法

（1）水解：取10ml玻塞刻度试管，加入混匀的尿液样品0.5ml，加入6mol/L盐酸1.5ml，混匀，塞紧塞子，置124～126℃烤箱中水解2h。自然冷却后加入10mol/L氢氧化钠0.9ml，再用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节pH至5～7，用蒸馏水稀释至5ml，过滤。

（2）氧化和显色可按表1操作。

（3）比色：调节波长至560nm，以空白管调零，读取标准管和测定管的吸光度。

4.7 正常值

1～5岁： 150～496μmol/24h （20～65mg/24h）

6～10岁： 270～755μmol/24h （35～99mg/24h）

11～17岁：480～1370μmol/24h （63～180mg/24h）

18～21岁：150～420μmol/24h （20～55mg/24h）

＞21岁： 114～330μmol/24h （15～43mg/24h）

4.8 化验结果临床意义

升高：甲状旁腺功能亢进症、甲状腺功能亢进症、肢端肥大症、畸形性骨炎（Paget综合征）、维生素D缺乏缺乏病（骨软化症）、转移性骨瘤、马方综合征、硬皮病、皮肌炎与多发性肌炎（皮肌炎）、进行性肌营养不良症、重度烧伤、产后（子宫收缩期）、儿童生长期等。

4.9 附注

血清测定未发现。但食物中胶原蛋白摄入量影响尿中羟脯氨酸的排泄量。

4.10 相关疾病

有多种功能。

通过氨基酸和微量元素的整合作用，对植物体内水分平衡的调节对酶的活化作用，以用脯氨酸和羟基脯氨酸抗逆性和抗衰老作用，抵御不良的生长环境，从而提高作物的产量和品质，尤其在植物生长的不良环境下更显着提高产量，增加座果率、果子着色均匀、改善品质，增强抗逆性等作用。

羟基脯氨酸是一种化学物质，化学式为C5H9NO3。

你说的这种成分我接触过，，它的英文名叫《DPHP》主要作用是：《强化肌肤保湿屏障，深层补水》意思就的说 它的保湿功能很好 ，关于补水，是深层的补水，补的不是表面的游离水，而是更深的~~~~总结来说 你买的这款产品 是 《补水，保湿双从功效》的~~~~~~ 希望对你有帮助~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~```

自己做！！

胶原海绵的羟脯氨酸含量测定

摘要：选用普通实验室均能实现的Woessner第Ⅰ法对自制胶原海绵和Gelfix(国外样品)进行了羟脯氨酸含量测定，结果表明，该方法操作简单，重复性好：自制胶原海绵的羟脯氨酸含量稳定，与国外样品的羟脯氨酸含量接近，且与胶原蛋白的羟脯氨酸含量接近，证实了两种胶原海绵的纯度均较高。

关键词：胶原海绵；羟脯氨酸；含量测定

胶原海绵是无过敏性、无菌冻干胶原，是促进伤口痊愈的特效药，还可作为各种外科手术填充剂和止血药，疗效显著，用途广泛。羟脯氨酸是胶原的特异性氨基酸，而且含量比较稳定，定量测定胶原水解后的羟脯氨酸含量乃是胶原定量所常用的方法〔1〕。

传统测定胶原特异性氨基酸含量和胶原总量的方法是化学比色法和电泳法，其操作步骤繁琐，影响因素多，样品需要量大，且准确性差。氨基酸分析仪可提供快速、准确、高灵敏度的测定方法〔2〕，但氨基酸分析仪价格昂贵，普通实验室难以实现。Kivirikko〔3〕等报道了一种测定尿液中羟脯氨酸的特殊方法，它适合于羟脯氨酸含量少的样品。Woessner〔4〕等报道了适合于从组织液、动植物中提取的蛋白质等生物材料的羟脯氨酸含量的测定方法，其中Woessner第Ⅰ法操作简便，但易受其它氨基酸影响，仅适用于羟脯氨酸含量高的样品测定。据报道，胶原蛋白的羟脯氨酸含量较高〔5〕，因此，本文选用Woessner第Ⅰ法对自制的胶原海绵进行了羟脯氨酸含量测定，以此作为质量检验的一项重要指标。Gelfix是欧洲科研大药厂生产的胶原海绵，为了对比自制的胶原海绵与国外产品的纯度，本文同时对Gelfix进行了羟脯氨酸含量测定。

1 材料与方法

1.1 试剂与器材

试剂：盐酸，氯胺T，乙二醇甲醚，醋酸，氢氧化钠，枸橼酸钠，醋酸钠，过氯酸，以上均为分析纯；氨基酸标准品，生化标准试剂；氮气：纯度为99.99%。

器材：多功能电子恒温水浴锅，上海凯乐电子设备厂；UV-160A紫外分光光度计，日本岛津；PHS-2C酸度计，天津第二分析仪器厂；LC-222鼓风干燥箱，温度波动±1℃；ZFA84-Z型旋转蒸发器，上海玻璃仪器厂；精密电子天平，美国Denver仪器公司；安培瓶；移液管；带塞试管；容量瓶。

1.2 实验方法

1.2.1 胶原海绵的制备：根据文献〔6-7〕所述制备出可溶性胶原材料，然后将其分散在0.1%乙酸溶液中(浓度为15～25 mg/ml)，冷冻干燥制成海绵状胶原材料。

1.2.2 Woessner第Ⅰ法

1.2.2.1 羟脯氨酸标准液的配制：准确称取羟脯氨酸标准品，加入少许0.001 mol/L盐酸溶液，配制浓度分别为1.0 μg/ml，2.0 μg/ml，3.0 μg/ml，4.0 μg/ml，5.0 μg/ml的标准液。

1.2.2.2 样品处理液的制备：准确称取胶原海绵样品约10 mg，记为W，加入6 mol/L盐酸1 ml，于安培瓶中充氮2 min，封管后于110℃加热24 h进行水解，水解后用旋转蒸发器去除盐酸，加入蒸馏水5 ml稀释，取400 μl该溶液稀释至10 ml，分别取0.6 ml，1 ml，2 ml该溶液用蒸馏水稀释至4 ml作为待测样品液，记为1#、2#、3#溶液。不取胶海绵样品，同上加入相同试剂，以同样的方式进行处理，配制空白液。

1.2.2.3 缓冲液的配制：枸橼酸钠50 g，醋酸12 ml，醋酸钠120 g，氢氧化钠34 g，加水至1000 ml，pH为6.0，冷藏保存。

1.2.2.4 氯胺T溶液的配制：准确称取氯胺1.4 g T，加入蒸馏水20 ml，加入乙二醇甲醚30 ml和缓冲液50 ml，混合均匀。

1.2.2.5 过氯酸溶液的配制：70%过氯酸27 ml，加水至100 ml。

1.2.2.6 对二甲氨基苯甲醛溶液的配制：对二甲氨基苯甲醛20 g，加乙二醇甲醚溶液至总量为100 ml，冷藏保存。有结晶析出时，使用前加温溶解。

1.2.2.7 羟脯氨酸标准曲线的测定：以0.001 mol/L HCI作为空白液，在羟脯氨酸标准液和空白液中分别加入氯胺T溶液2 ml，混合，室温下静置20 min，加入过氯酸溶液2 ml，混合，室温下静置5 min，加入对二甲氨基苯甲醛溶液2 ml，混合，60℃加热20 min，置水中冷却。以空白液作对照，测定560 nm处的吸光度。绘制出标准曲线。

1.2.2.8 胶原海绵的羟脯氨酸含量测定：按照羟脯氨酸标准曲线的测定方法，以空白液作为对照，测定待测样品液的吸光度。由羟脯氨酸标准曲线换算出样品液的浓度C(μg/ml)，按式〔(50×C)/V×W)〕%计算出胶原海绵的羟脯氨酸含量，其中C(μg/ml)为样品液的浓度，V分别为0.6 ml、1 ml、2 ml, W(mg)为样品重量。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线的测定

将浓度分别为1.0 μg/ml,2.0 μg/ml,3.0 μg/ml,4.0 μg/ml,5.0 μg/ml的羟脯氨酸标准品经氧化脱羧反应生成吡咯，以对二甲氨基苯甲醛显色，测定560 nm处的吸光度，结果见表1。绘制相应的标准曲线(见图1)，并回归出标准曲线方程为：C=5.6795*ABS-0.0233。其中C为浓度(μg/ml)，ABS为吸光度。

表1 羟脯氨酸标准品的浓度与吸光度

浓度/(μg/ml) 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0

吸光度 0.176 0.370 0.534 0.703 0.883

图1 羟脯氨酸标准曲线

2.2 自制胶原海绵的羟脯氨酸含量测定

称取三份自制胶原海绵样品，每份样品经浓盐酸水解后稀释成三种浓度，分别测定其吸光度，根据羟脯氨酸的标准曲线换算出样品处理液的羟脯氨酸浓度，再推算出胶原海绵样品的羟脯氨酸含量，实验结果见表2。

表2 自制胶原海绵的羟脯氨酸含量

样品

编号 1 2 3

1# 2# 3# 1# 2# 3# 1# 2# 3#

样品重量/

mg 9.9 9.9 9.9 10.1 10.1 10.1 9.9 9.9 9.9

吸光度 0.205 0.342 0.679 0.215 0.356 0.699 0.210 0.344 0.669

样品液浓度/

(μg/ml) 1.141 1.919 3.833 1.198 1.999 3.947 1.169 1.930 3.776

羟脯氨

酸含量/% 9.60 9.69 9.68 9.88 9.90 9.77 9.84 9.75 9.54

每份样品的三种浓度的测定结果均很接近，表明Woessner第Ⅰ法测定的准确度高。三份样品的测定结果接近，表明此方法重复性好；同时也说明自制的胶原海绵质量稳定。三份样品的羟脯氨酸含量分别为9.66%、9.85%、9.71%(算术平均值)，与资料报道的胶原氨基酸总量的约10%为羟脯氨酸较接近〔1〕，表明我们自制胶原海绵的纯度较高。

2.3 Gelfix的羟脯氨酸含量测定

同样称取三份Gelfix样品，按同样的方法进行羟脯氨酸含量测定，其结果见表3。

表3 Gelfix的羟脯氨酸含量

样品

编号 1 2 3

1# 2# 3# 1# 2# 3# 1# 2# 3#

样品重量/

mg 9.9 9.9 9.9 9.9 9.9 9.9 10.1 10.1 10.1

吸光度 0.205 0.342 0.679 0.206 0.346 0.678 0.215 0.344 0.679

样品液浓度/

(μg/ml) 1.141 1.919 3.833 1.147 1.942 3.827 1.198 1.930 3.833

羟脯氨

酸含量/% 9.60 9.69 9.68 9.65 9.81 9.66 9.88 9.55 9.49

三份Gelfix样品的羟脯氨酸含量分别为9.66%、9.71%、9.64%(算术平均值)，与我们自制的胶原海绵的羟脯氨酸含量接近，表明两者的纯度接近。

3 结论

3.1 Woessner第Ⅰ法操作简单，重复性好。

3.2 自制胶原海绵的羟脯氨酸含量稳定，表明其质量稳定。其羟脯氨酸含量与胶原蛋白的羟脯氨酸含量较接近，表明其纯度较高。

3.3 自制胶原海绵与国外样品的羟脯氨酸含量接近，表明两者的纯度接近。

羟脯氨酸 hydroxyproline

亚氨基酸之一，通常在第四位上带有羟基，但有时也在第3位上。由于有两个不对称的碳原子，所以有4种立体异构体。在动物胶和骨胶原中含有L-羟脯氨酸。自然界中不存在D-羟脯酸。L-别羟脯氨酸是从鬼笔鹅膏（Amanita Phalloides）中得到的有毒的多肽鬼笔环肽（phalloidine）的组成成分。一般的蛋白质不存在这种氨基酸。在自然界的羟脯氨酸的甲基衍生物中有左旋水苏碱（betonicine）、右旋水苏碱（turicine）〔这些都存在于林生水苏（Stachyssilvatica）和药水苏（betonica，officinalis）的叶和茎中〕和γ-羟古液酸（γ-hydroxyhygric acid）存在于巴豆属的 Croton gubonga的皮中。在生物体内羟脯氨酸是由脯氨酸合成的，但不是以游离状态，而是在肽链中被羟基化。它的分解作用类似脯氨酸，但以带着羟基的状态进行，所以成为4-羟基谷氨酸。

作用：

与胶原质和弹性蛋白质一样，增强弹性纤维强度

是氨基酸的结合组织，皮肤组织的联结剂

愈合疤痕的功能。

羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)是亚氨基酸之一，是一种非必需氨基酸，是胶原组织的主要成分之一，且为胶原中特有的氨基酸，约占胶原氨基酸总量的13%。胶原蛋白是体内含量最多的蛋白质，约占人体蛋白质总量1/3。利用羟脯氨酸在胶原蛋白中含量最高这一特点，通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定，可了解体内胶原蛋白分解代谢情况，即可作为结缔组织分解情况指标。很多疾病可伴有胶原代谢变化而引起血、尿及组织羟脯氨酸的含量改变。临床检验普遍使用氨基酸自动分析仪效果满意，此外还有比色法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。

中文名

羟脯氨酸

外文名

hydroxyproline

汉语读作

qiǎng fǔ'ān suān

本质

亚氨基酸之一