重蒸苯酚是什么东西?
纯净的酚使用时不需要重蒸。市售的酚一般为红色或黄色结晶体,使用之前必须重蒸, 除去能引起DNA和RNA断裂和聚合的杂质。将苯酚置于65℃水浴中溶解,重新进行蒸馏,当温度升至183℃时,开始收集在若干个棕色瓶中,纯酚和重蒸酚都应贮存在-20℃。使用前取一瓶重蒸酚于分液漏斗中,加入等体积的lmol/LTris--HCl(pH8.0)缓冲液,立即加盖,激烈振荡,并加入固体Tris摇匀调pH(一般looml苯酚约加l克固体Tris)分层后测上层水相pH至7.6-8.0。从分液漏斗中放出下层酚相于棕色瓶中,并加一定体积0.lmol/LTris-HCl pH8.0)覆盖在酚相上,置4C冰箱贮存备用。酚是一种强腐蚀剂,能引起腐蚀性损伤,操作时应戴上眼镜和手套。如果皮肤上溅上了酚,应用大量水冲洗或用肥皂水冲洗。酚在空气极易氧化变红,要随时加盖,也可加入抗氧化剂0.1% 8一羟基喹啉及0.2%β-巯基乙醇。
又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。分子式C6-H6-O。分子量94.11。相对密度1.071。熔点40.85℃(超纯,含杂质熔点提高)。沸点181.9℃。闪点79.44℃(闭杯),85℃(开杯)。自燃点715℃。蒸气密度3.24。蒸气压0.13kPa(40.1℃)
用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体
是的,就是经过重蒸馏的苯酚,在要求苯酚纯度的实验中用,比如你所说的分子生物学实验。
楼下不带你这样误导人的,自己不了解请不要乱讲好吗?
提问的同学要是不相信可以看这篇文章,百度文库的,我随便找了一篇,你可以对照一下实验方法一栏:http://wenku.baidu.com/view/de8e9c4ce45c3b3567ec8be2.html
实际上我认为小木虫这篇帖子也不错:http://emuch.net/html/200910/1634352.html
2、其次,加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中。
3、最后加入等溶剂的1mol/ml的Tris,反复混匀后,静至分层,放出下层黄色酚液,弃上层即可。
1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb
2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)
5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。
7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。
扩展资料:
DNA提取原则:
1、保证核酸一级结构的完整性;
2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;
3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;
4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。
参考资料来源:百度百科——DNA提取
用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%(原液14.4 mol/ml),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行).
3、加入等溶剂的1 mol/ml的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层.
4、加固体Tris约1 g/100 ml酚,摇匀,去水相.
5、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)平衡数次,至PH为8.0.
6、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)于棕色瓶中4度保存.