5%苯酚的配置: 取苯酚100 g,加铝片0.1 g和NaHCO3 0.05g,蒸馏,收集182℃馏分,称取次馏分5 g,加水溶解
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取苯酚100
g,加铝片0.1
g和NaHCO3
0.05g,蒸馏,收集182℃馏分,称取次馏分5
g,加水溶解
5克苯酚,95克酒精。
苯酚是有机物,它几乎不溶于水,所以用水是不能配置出5%的苯酚的,一般他是用一些酒精,汽油等有机溶质或者是双氧水等一些非极性共价键组成的物质的溶剂里面。需要说明的是5%的苯酚溶液,里面的溶剂不一定就是指水,只不过水是日常最常用的溶剂而已。
扩展资料:
苯酚分子由一个羟基直接连在苯环上构成。由于苯环的稳定性,这样的结构几乎不会转化为酮式结构。
苯酚共振结构如右上图。酚羟基的氧原子采用sp2杂化,提供一对孤电子与苯环的6个碳原子共同形成离域键。大π键加强了烯醇的酸性,羟基的推电子效应又加强了O-H键的极性,因此苯酚中羟基的氢可以电离出来。
参考资料来源:百度百科-苯酚
苯酚100g,铝片0.1g,碳酸氢钠0.05g,加热蒸馏,收集182℃蒸馏液,然后称取5g,定容100mL。
苯酚的沸点是182度。用一般的蒸馏装置就可以,水冷凝。收集蒸馏液,如果是苯酚是液体,那用烧杯直接称取液体5g,加水,然后倒入100ml容量瓶,用水洗涤烧杯,补满就行了
【实验原理】
植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶
性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合
成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且
在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于
甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白
质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
【实验仪器及试剂】
1.仪器:分光光度计、电炉、铝锅、20mL刻度试管、刻度吸管、记号笔、吸
水纸适量。
2.试剂:
(1)90%苯酚溶液:称取90g苯酚(AR),加蒸馏水10mL溶解,在室温下
可保存数月。
(2)9%苯酚溶液:取3mL 90%苯酚溶液,加蒸馏水至30mL,现配现用。
(3)浓硫酸(比重1.84)。
(4)1%蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。加
少量水溶解,移入100mL容量瓶中,加入0.5mL浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度。
(5)100ug/L蔗糖标准液:精确吸取1%蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶
中,加水定容。
【实验步骤】
1.标准曲线的制作: 取20mL刻度试管11支,从0-10分别编号,按表27
-1加入溶液和水,然后按顺序向试管内加入1mL 9%苯酚溶液,摇匀,再从管
液正面以 5-20s。加入5 mL浓硫酸,摇匀。比色液总体积为8 mL,在恒温下
放置30min。显色。然后以空白为参比,在485nm波长下比色测定,以糖含量
为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。
2.可溶性糖的提取 取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取0.10-
0.30g,共3份,分别放入3支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封
口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25mL容量瓶中,反复冲
洗试管及残渣,定容至刻度。
3.测定吸取0.5mL样品液于试管中(重复2次),加蒸馏水1.5mL,同制作标
准曲线的步骤,按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液,显色并测定光密度。由标准
线性方程求出糖的量,按下式计算测试样品中糖含量。
式中:C一标准方程求得糖量(ug)
α一吸取样品液体积(mL)
V-提取液量(mL)
n一稀释倍数
W一组织重量(g)
可溶性糖含量(%)=从标准曲线查得糖的量(μg)×提取液体积(ml)×稀
释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100
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粗多糖的检验方法
1、方法原理
粗多糖在硫酸的作用下,水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,与苯酚
缩合成有色化合物,用分光光度法测定样品在粗多糖含量。
2、主要设备和仪器
设备721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)
试剂
葡萄糖标准液:精确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖0.1000g,置100mL容量瓶中加热蒸馏水溶解稀释至刻度,其浓度为1.0mg/mL,用稀释成浓度为0.1mg/mLd的标准工作液。
5%苯酚溶液:取苯酚100g,沙浴蒸馏,收集180℃-182℃溜分,称取此馏分5g,用水溶解后,定容至100mL棕色容量瓶中备用(现用现配)。
3、测定步骤
3.1、最大吸收波长的选择
精密吸取0.04mg/mL无水葡萄糖溶1.0 mL,置10mL具塞试管中,加入蒸馏水使体积为2.0mL,再加苯酚试液1.0mL,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0mL,摇匀后放置5min,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如加上法配制空白。用721分光光度计在470-510nm测定吸光度,测定最大吸收波长为490±nm。
3.2、标准曲线的绘制
精密吸收浓度为0.1mg/mL的葡萄糖标准标准工作液0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL,分别置于10mL具塞试管中,各加蒸馏水使体积为2.0mL,再加苯酚试液1.0mL,摇匀,迅速滴加浓硫酸
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5.0 mL,摇匀后放置5min,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。以蒸馏水代替糖溶液如上法配制空白。用721分光光度计,1cm比色皿,在490nm处测定吸光度,绘制葡萄糖浓度-吸光度工作曲线。结果浓度在0.010-0.04mg/mL范围内与吸光度呈现性关系。
回归方程Y=7.52×10-3X+1.13×10-3, Y=0.9997(n=6)。
3.3、含量测定
3.31、多糖的提取与精制 取300mL,用氟仿多次萃取,以除去蛋白质,加活性炭1%脱色,抽滤,滤液加入95%乙醇,使含醇量达80%,静置过夜。过滤,残渣用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤,真空干燥,即得粗多糖。
3.32、供试液的配制 精密称取粗多糖粉末0.2000g
1、计算:n=m/M , c=n/v , p(密度)=m/v (先计算出5%的苯酚要其质量为多少)
2、称量或量取:固体试剂用托盘天平或电子天平称量,液体试剂用量筒。
3、溶解:应在烧杯中溶解,待冷却后转入容量瓶中。苯酚先放在60℃水浴锅溶解,使其成为液体状态,在用移液管取出需要的克数,定容至需要的容量瓶就可以了。
4、转移:由于容量瓶的颈较细,为了避免液体洒在外面,用玻璃棒引流。
5、洗涤:用少量蒸馏水洗涤2到3次,洗涤液全部转入到容量瓶中。
6、定容:向容量瓶中加入蒸馏水,在距离刻度2到3cm时,改用胶头滴管加之刻度线。
扩展资料:
化学性质
可吸收空气中水分并液化。有特殊臭味,极稀的溶液有甜味。腐蚀性极强。化学反应能力强。与醛、酮反应生成酚醛树脂、双酚A,与醋酐;水杨酸反应生成醋酸苯酯、水杨酸酯。还可进行卤代、加氢、氧化、烷基化、羧基化、酯化、醚化等反应。
苯酚在通常温度下是固体,与钠不能顺利发生反应,如果采用加热熔化苯酚,再加入金属钠的方法进行实验,苯酚易被还原,在加热时苯酚颜色发生变化而影响实验效果。
参考资料:百度百科-苯酚
需要说明的是5%的苯酚溶液.他里面的溶剂不一定就是指水,只不过水是我们日常最常用的溶剂而已!
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