三氯乙酸和乙腈的在牛奶三聚氰胺测定中的作用

首先告诉你一点就是既然铁是被腐蚀了，肯定发生了化学反应，而化学反应是经由反应物粒子之间的有效碰撞造成的，因此不存在不接触就能腐蚀铁的现象。所以应该考虑到以上物质的挥发性。我觉得原因可能有两个。第一个是三氯乙酸腐蚀铁。虽然三氯乙酸常温下是固体，但需要指出的是，这种物质即使在固态也有刺激性气味，说明还是有三氯乙酸分子逃逸到空气中，因而这些分子动能相对较高的分子也可以运动到天花板上腐蚀铁（三氯乙酸强的酸性）。还有一种情况，甲醇若保存不当，会被氧化，其氧化产物之一的甲酸也是挥发性强的中等强度的酸，也能腐蚀铁。

与乙腈互溶的溶剂有：乙酸，丙酮，苯，正丁醇，四氯化碳，氯仿，二氯乙烷，二氯甲烷，DMF，DMSO,dioxane,EA, EtOH,EtOEt,Methanol,丁酮，异丙醇，二丙醇，四氯乙烷，THF,toluene,三氯乙完，水，二甲苯。

由于硝基甲烷不是很常用，所以不太清楚。

回答

稀释液：0.05%三氯乙酸：乙腈 (95:5)需要配置4L，怎么配置呀？

稀释液：0.05%三氯乙酸：乙腈(95:5)需要配置4L，怎么配置呀

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一般指两种液体能以任何比例互相溶解 的现象,微观角度：溶剂分子和溶质分子或离子相互分散开来.（个人理解）

实际上肯定会有一些的,绝对不溶于任何溶剂的物质根本没有.但理论上认为没有.

因为理论上认为没有,所以不影响计算.

要检测乳与乳制品中的三聚氰胺最准的方法是先用红外光谱仪（振动光谱）对样品中含有的三聚氢胺的结构进行定性检测后（这种检测是非常规检测，只在极少数情况下采用），再利用普通显微镜对形态进行观察，这样就可以准确判定其是否含有三聚氰胺。显微镜法检测三聚氰胺的步骤有以下几步：第一步是从收购的牛奶底部取样；第二步是把样品用离心机离心3min；第三步是留下离心后的最后一部分（0.1ml）；第四步用吸管把收取的样品移入到载波片了；第五步是将载波片放到显微镜下用目镜16倍×物镜10倍观测，这样就可以定性检测出被检样品是否含有三聚氰胺（最小观测值0.2mg/100ml）。

http://q.yesky.com/group/review-17543201.html

世界卫生组织饮用水标准

A 饮用水中的细菌质量*

有机体类 指标值 旧标准

所有用于饮用的水 大肠杆菌或耐热大肠菌 在任意100ml水样中检测不出

进入配水管网的处理后水 大肠杆菌或耐热大肠菌

在任意100ml水样中检测不出

在任意100ml水样中检测不出

总大肠菌群 在任意100ml水样中检测不出 在任意100ml水样中检测不出

配水管网中的处理后水 大肠杆菌或耐热大肠菌

在任意100ml水样中检测不出

总大肠菌群 在任意100ml水样中检测不出。对于供水量大的情况，应检测足够多次的水样，在任意12个月中95%水样应合格。

* 如果检测到大肠杆菌或总大肠菌，应立即进行调查。如果发现总大肠菌，应重新取样再测。如果重取的水样中仍检测出大肠菌，则必须进一步调查以确定原因。

B 饮用水中对健康有影响的化学物质

（一）无机组份

项目 指标值

(mg/l)

旧标准

(mg/l) 备注

锑 0.005(p)*

砷 0.01**(p) 0.05 含量超过6×10-4将有致癌的危险

钡 0.7

铍 NAD&

硼 0.3

镉 0.003 0.005

铬 0.05(p) 0.05

铜 2(p) 1.0 ATO#

氰 0.07 0.1

氟 1.5 1.5 当制定国家标准时，应考虑气候条件、用水总量以及其它水源的引入。

铅 0.01 0.05 众所周知，并非所有的给水都能立即满足指标值的要求，所有其它用以减少水暴露于铅污染下的推荐措施都应采用。

锰 0.5(p) 0.1 ATO

汞（总） 0.001 0.001

钼 0.07

镍 0.02

NO3- 50 10 每一项浓度与它相应的指标值的比率的总和不能超过1。

NO2- 3(p)

硒 0.01 0.01

钨 NAD

（二）有机组份

项目

指标值

(μg/l)

旧标准

(μg/l)

备注

氯化烷烃类

四氯化碳 2 3

二氯甲烷 20

1，1-二氯乙烷 NAD

1，1，1-三氯乙烷 2000(p)

1，2-二氯乙烷 30** 10 过量致险值为10-5

氯乙烯类

氯乙烯 5** 过量致险值为10-5

1，1-二氯乙烯 30 0.3

1，2-二氯乙烯 50

三氯乙烯 70(p) 10

四氯乙烯 40 10

芳香烃族

苯 10** 10 过量致险值为10-5

甲苯 700 ATO

二甲苯族 500 ATO

苯乙烷 300 ATO

苯乙烯 20 ATO

苯并[a]芘 0.7** 0.01 过量致险值为10-5

氯苯类

一氯苯 300 ATO

1，2-二氯苯 1000 ATO

1，3-二氯苯 NAD

1，4-二氯苯 300 ATO

三氯苯（总） 20 ATO

其它类

二-（2-乙基已基）已二酸 80

二-（2-乙基已基）邻苯二甲酸酯 8

丙烯酰胺 0.5** 过量致险值为10-5

环氧氯丙烷 0.4(p)

六氯丁二烯 0.6

乙二胺四乙酸（EDTA） 200(p)

次氮基三乙酸 200

二烃基锡 NAD

三丁基氧化锡 2

（三）农药

指标

指标值

(μg/l)

旧标准

(μg/l)

备注

草不绿 20** 过量致险值为10-5

涕灭威 10

艾氏剂/狄氏剂 0.03 0.03

莠去津 2

噻草平/苯达松 30

羰呋喃 5

氯丹 0.2 0.3

绿麦隆 30

DDT 2 1

1，2-二溴-3-氯丙烷 1** 过量致险值为10-5

2，4-D 30

1，2-二氯丙烷 20(p)

1，3-二氯丙烷 NAD

1，3-二氯丙烯 20** 过量致险值为10-5

二溴乙烯 NAD

七氯和七氯环氧化物 0.03 各0.1

六氯苯 1** 0.01 过量致险值为10-5

异丙隆 9

林丹 2 3

2-甲-4-氯苯氧基乙酸（MCPA） 2 100

甲氧氯 20

丙草胺 10

草达灭 6

二甲戊乐灵 20

五氯苯酚 9(p) 10

二氯苯醚菊酯 20

丙酸缩苯胺 20

达草止 100

西玛三嗪 2

氟乐灵 20

氯苯氧基除草剂，不包括2，4-D和MCPA

2，4-DB 90

二氯丙酸 100

2，4，5-涕丙酸 9

2-甲-4-氯丁酸（MCPB） NAD

2-甲-4-氯丙酸 10

2，4，5-T 9

（四）消毒剂及消毒副产物

消毒剂

指标值(mg/l)

旧标准(mg/l)

备注

一氯胺 3

二氯胺和三氯胺 NAD

氯 5 ATO.在pH＜8.0时，为保证消毒效果，接触30分钟后，自由氯应＞0.5mg/L。

二氧化氯 由于二氧化氯会迅速分解，故该指项标值尚未制定。且亚氯酸盐的指标值足以防止来自于二氧化氯的潜在毒性。

碘 NAD

消毒副产物

指标值

(μg/l)

旧标准

(μg/l)

备注

溴酸盐 25**（p） 过量致险值为7×10-5

氯酸盐 NAD

亚氯酸盐 200（p）

氯酚类

2-氯酚 NAD

2，4-二氯酚 NAD

2，4，6-三氯酚 200** 10 过量致险值为10-5，ATO

甲醛 900

3-氯-4-二氯甲基-5-羟基

-2（5H）-呋喃酮（MX） NAD

三卤甲烷类 每一项的浓度与它相对应的指标值的比率不能超过1。

三溴甲烷 100

一氯二溴甲烷 100

二氯一溴甲烷 60** 过量致险值为10-5

三氯甲烷 200** 30 过量致险值为10-5

氯化乙酸类

氯乙酸 NAD

二氯乙酸 50(P)

三氯乙酸 100(P)

水合三氯乙醛 10(P)

氯丙酮 NAD

卤乙腈类

二氯乙腈 90(p)

二溴乙腈 100(p)

氯溴乙腈 NAD

三氯乙腈 1(p)

氯乙腈（以CN计） 70

三氯硝基甲烷 NAD

* （P）—临时性指标值，该项目适用于某些组分，对这些组分而言，有一些证据说明这些组分具有潜在的毒害作用，但对健康影响的资料有限；或在确定日容许摄入量（TDI）时不确定因素超过1000以上。

** 对于被认为有致癌性的物质，该指导值为致癌危险率为10-5时其在饮用水中的浓度（即每100，000人中，连续70年饮用含浓度为该指导值的该物质的饮用水，有一人致癌）。

&NAD—没有足够的资料用于确定推荐的健康指导值。

# ATO—该物质的浓度为健康指导值或低于该值时，可能会影响水的感官、嗅或味。

C 饮用水中常见的对健康影响不大的化学物质的浓度

化学物质

备注

石棉 U

银 U

锡 U

U—对于这些组分不必要提出一个健康基准指标值，因为它们在饮用水中常见的浓度下对人体健康无毒害作用。

D 饮用水中放射性组份

项目 筛分值(Bq/L) 旧标准(Bq/L) 备注

总α活性 0.1 0.1 如果超出了一个筛分值，那么更详细的放射性核元素分析必不可少。较高的值并不一定说明该水质不适于人类饮用。

总β活性 1 1

E 饮用水中含有的能引起用户不满的物质及其参数

项目

可能导致用户不满的值a

旧标准

用户不满的原因

物理参数

色度 15TCUb 15TCU 外观

嗅和味 - 没有不快感觉 应当可能接受

水温 - 应当可以接受

浊度 5NTUc 5NTU 外观；为了最终的消毒效果，平均浊度≤1NTU，单个水样≤5NTU。

无机组分

铝 0.2mg/L 0.2mg/L 沉淀，脱色

氨 1.5mg/L 味和嗅

氯化物 250mg/L 250mg/L 味道，腐蚀

铜 1mg/L 1.0mg/L 洗衣房和卫生间器具生锈（健康基准临时指标值为2mg/L）

硬度 - 500mgCaCO3/L 高硬度：水垢沉淀，形成浮渣

硫化氢 0.05mg/L 不得检出 嗅和味

铁 0.3mg/L 0.3mg/L 洗衣房和卫生间器具生锈

锰 0.1mg/L 0.1mg/L 洗衣房和卫生间器具生锈（健康基准临时指标值为0.5mg/L）

溶解氧 - 间接影响

pH - 6.5—8.5 低pH：具腐蚀性

高pH：味道，滑腻感

用氯进行有效消毒时最好pH＜8.0

钠 200mg/L 200mg/L 味道

硫酸盐 250mg/L 400mg/L 味道，腐蚀

总溶解固体 1000mg/L 1000mg/L 味道

锌 3mg/L 5.0mg/L 外观，味道

有机组分

甲苯 24—170μg/l 嗅和味（健康基准指标值为700μg/l)

二甲苯 20—1800μg/l 嗅和味（健康基准指标值为500μg/l)

乙苯 2—200μg/l 嗅和味（健康基准指标值为300μg/l)

苯乙烯 4—2600μg/l 嗅和味（健康基准指标值为20μg/l)

一氯苯 10—120μg/l 嗅和味（健康基准指标值为300μg/l)

1，2-二氯苯 1—10μg/l 嗅和味（健康基准指标值为1000μg/l)

1，4-二氯苯 0.3—30μg/l 嗅和味（健康基准指标值为300μg/l)

三氯苯（总） 5—50μg/l 嗅和味（健康基准指标值为20μg/l)

合成洗涤剂 - 泡沫，味道，嗅味

消毒剂及消毒副产物氯 600—1000μg/l 嗅和味（健康基准指标值为5mg/L)

氯酚类

2-氯酚 0.1—10μg/l 嗅和味

2，4-二氯酚 0.3—40μg/l 嗅和味

2，4，6-三氯酚 2—300μg/l 嗅和味（健康基准指标值为200μg/l)

a.这里所指的水准值不是精确数值。根据当地情况，低于或高于该值都可能出现问题，故对有机物组分列出了味道和气味的上下限范围。

b.TCU，色度单位。

c.NTU，散色浊度单位。

色谱柱使用久了，会出现分离度降低，理论塔板数降低等柱效降低的现象，适当处理能使柱效恢复。但不是所有柱子 都能倒冲的，最好问问生产商。不了解的话，还是按下面的方法处理一下试试。

常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。

对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水←→甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。离子交换树脂柱:高浓度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分树脂再生,油脂等少数与树脂紧密结合的物质可用低浓度碱溶液(如0.1molL的NaOH溶液)冲洗,酸性有机物吸附在固定相的用低pH缓冲液冲洗,碱性有机物用高pH缓冲液冲洗,然后再用蒸馏水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸馏水冲洗。凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分解凝胶中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸馏水←→甲醇←→蒸馏水冲洗。

已污染的色谱柱的处理:因保留强的物质污染,流动相或样品中不溶物沉积于柱头,可用下列方法洗涤:去除脂类可用四氢呋喃、乙腈或甲醇洗涤去除蛋白质可用乙腈、丙醇和1%三氯乙酸进行梯度洗脱一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脱,同时反复注入100-200ml的四氢呋喃。

柱头处理:对于柱头堵塞污染严重的情况而且用溶剂冲洗无效的色谱柱,只有打开柱子去除柱顶的填料重装:先拆下不锈钢烧结过滤器,检查柱床,常见凹陷或受污染的带色填料,剔去不规则床层和带色填料,使柱床显白色并完全水平,再用甲醇作糊状填料匀浆液,将糊状填料匀浆液滴在柱上靠重力从匀浆液中排出甲醇液,重复直到填料水平。

柱子的贮存:首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。极性色谱柱可用适当溶剂如二氯甲烷冲洗键合相色谱柱用甲醇冲洗阴离子交换色谱柱用0.002%洗必泰(双氯苯双胍己烷)的缓冲液冲洗,阳离子交换色谱柱用0.005%硫柳汞缓冲液冲洗凝胶色谱柱用缓冲液中加0.02%叠氮化钠或用20%乙醇冲洗。再将柱子两头密封,以防止溶剂蒸发使柱子干燥而引起柱子结构的几何学改变。

苦味酸法

苦味酸法是国标GB/T9567-1997《工业三聚氰胺>中规定的检测方法。将水加入试样，加热溶解后，加入苦味酸溶液，称量所生成的苦味酸三聚氰胺沉淀的质量，即测得三聚氰胺纯度含量。称试样1g（精确至0.0002g）,置于500mL锥形瓶中，同时加入400mL水，加热溶解；冷却后，加入酚酞指示液3滴，若显色，加入硫酸溶液，直至溶液颜色消失，若有不溶物，需过滤，水洗；把滤液和洗液合并，移入500mL容量瓶中，加水至刻度，仔细振摇混合后，准确吸取100mL置于500mL烧杯里；将此溶液加热至80℃，另加入已加热至80℃的100mL苦味酸溶液，冷却至室温后，保持在15℃以下约8h；用已恒重的玻砂过滤器过滤，之后，先用约100mL苦味酸三聚氰胺的饱和溶液洗涤，再用10mL水洗；在100-105℃下经2h烘干玻砂过滤器，置于干燥器中冷却后，称量（精确至0.0002g）求得沉淀物质量。。

升华法

在升华装置中将试样在负压下进行加热，让三聚氰胺完全升华后，称其残渣量，即测得三聚氰胺纯度。称取试样，置于预先干燥了的且已知质量的试样容器里；将试样容器置入减压升华装置内，待完全密闭后，开启真空装置缓缓吸引，并调节装置内的温度，经2小时升华结束；取出试样容器，冷至室温后，称量试样容器的质量。

电位滴定法

袁立勇等利用电位滴定法测定溶液中三聚氰胺的含量。硫酸溶液和三聚氰胺反应生成弱酸性化合物。以pH3为终点指示，通过硫酸溶液的消耗体积计算三聚氰胺的含量。相对标准偏差不大于0.50%。

食品中的检测方法

2007年06月14日，农行行业标准NY/T1372-2007《饲料中三聚氰胺的检测》中规定测定饲料中三聚氰胺的含量方法为高效液相色谱（HPLC）和气相色谱质谱联用法（GC-MS）。2008年10月07日，国家标准GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》[20]中规定原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺检测方法为高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱-质谱联用法[包括气相色谱-质谱法（GC-MS），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）]。2008年10月15日，国家标准GB/T22400-2008《原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法》[21]中规定了液相色谱法作为快速检测原料乳及不含添加物的液态乳制品中三聚氰胺的方法。目前，三聚氰胺的检测方法还包括试剂盒检测法（ELISA）、离子交换色谱-紫外检测法等。

高效液相色谱法（HPLC)

试样中的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，提取液离心后经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，洗脱物吹干后用甲醇溶液溶解，用高效液相色谱仪进行测定。在添加浓度2mg/kg～10mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。称取5g试样，准确加入50ml 10g/L三氯乙酸溶液，加入2ml 22g/L乙酸铅溶液。摇匀，超声提取20min。静止2min，取上层提取液约30ml转入离心管。在10000r/min离心机上离心5min。分别用3ml甲醇，3ml水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取10ml离心液分次上柱，控制过柱速度在1ml/min以内。再用3ml水和3ml甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃取柱，抽干后用氨水甲醇3ml洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，准确加入甲醇溶液，涡旋震荡1min，过0.45µm滤膜，上机测定。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS和GC-MS/MS）[20]

试样经超声提取、固相萃取净化后，进行硅烷化衍生，衍生产物采用选择离子监测质谱扫描模式（SIM）或多反应监测质谱扫描模式（MRM），用化合物的保留时间和质谱碎片的丰度比定性，外标法定量。其中GC-MS法在添加浓度0.05mg/kg～2mg/kg浓度范围内，回收率在70%～110%之间，相对标准偏差小于10%；GC-MS/MS法在添加浓度0.005mg/kg～1mg/kg浓度范围内，回收率在90%～105%之间，相对标准偏差小于10%。

GC-MS法，称取1g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入25mL 1%三氯涡漩振荡30s，再加入15mL三氯乙酸溶液，超声提取15min，加入2mL乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液定容至刻度。充分混匀后，转移上层提取液约30mL至50mL离心试管，以不低于4000r/min离心10min。上清液待净化。若样品中脂肪含量较高，可以先用乙醚脱脂后再用三氯乙酸溶液提取。准确移取5mL的待净化滤液至固相萃取柱中。再用3mL水、3mL甲醇淋洗，弃淋洗液，抽近干后用3mL 5%氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，50℃下氮气吹干。

GC-MS/MS法，称取0.5g（精确至0.01g）试样，加入5mL甲醇水溶液，涡旋混匀2min后，超声提取15min-20min，以不低于4000r/min离心10min，取上清液200μL用微孔滤膜过滤，50℃下氮气吹干。取氮气吹干残留物，加入600μL的吡啶和200μL衍生化试剂，混匀，70℃反应30min后，供GC-MS或GC-MS/MS法定量检测或确证。

液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS

试样用三氯乙酸溶液提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，外标法定量。在添加浓度0.01mg/kg～0.5mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。称取1g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入8mL 1%三氯乙酸溶液和2mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，做待净化液。若样品中脂肪含量较高，可以用三氯乙酸溶液饱和的正己烷液-液分配除脂后再用SPE柱净化。将上述待净化液转移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物（相当于1g试样）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过微孔滤膜后，供LC-MS/MS测定。

试剂盒检测法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay ELISA）

试剂盒检测法即为酶联免疫吸附剂测定，是利用萃取液通过均质及震荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定的一种方法。

将三聚氰胺HRP酶标记物、标样及样品提取液加入包被三聚氰胺抗体的试验孔中孵育在30min的孵育过程中，样品中的三聚氰胺与HRP酶标记物竞争结合三聚氰胺抗体。孵育完后，倾去孔内液体洗涤除去未结合的三聚氰胺和HRP酶标记物。每孔加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30min后终止反应，用酶标仪读取450nm下各孔的OD值。比较未知样品的OD值与标样的OD值，就可计算出样品中的三聚氰胺浓度，最低可检测到10ppb以下的三聚氰胺残留，检测过程约需65min

离子交换色谱-紫外检测法

何强建立离子交换色谱-紫外检测法测定乳制品中三聚氰胺。样品用水和乙腈提取，分析时用LC-SCX离子交换色谱柱分离，浓度为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH3.0）-乙腈（70：30）为流动相，在紫外波长240nm处检测。三聚氰胺为0.5mg/L-100.0mg/L时，质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999），最低检出限为1.0mg/kg，加标回收率为93.8%～102.5%，RSD<3.5%。

其他检测法

利用抗原与抗体相互识别的原理，制作出能识别三聚氰胺的抗体试纸，将试纸插入稀释的奶制品中，则可检测出其中是否含有三聚氰胺。使用膜分离技术萃取样品溶液，然后采用紫外可见光度法或化学检验的方法检测样品中三聚氰胺的含量。