用什么方法可以测定脯氨酸在根冠生长中的作用
标准曲线的绘制
（1）在分析天平上精确称取25mg脯氨酸，倒入小烧杯内，用少量蒸馏水溶解，然后倒入250ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，此标准液中每ml含脯氨酸100μg。
（2）系列脯氨酸浓度的配制取6个50ml容量瓶，分别盛入脯氨酸原液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5及3.0ml，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，各瓶的脯氨酸浓度分别为1，2，3，4，5及6μg/ml。
（3）取6支试管，分别吸取2ml系列标准浓度的脯氨酸溶液及2ml冰醋酸和2ml酸性茚三酮溶液，每管在沸水浴中加热30min。
（4）冷却后各试管准确加入4ml甲苯，振荡30S，静置片刻，使色素全部转至甲苯溶液
（5）用注射器轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中，以甲苯溶液为空白对照，于520nm波长处进行比色。
（6）标准曲线的绘制：先求出吸光度值（Y）依脯氨酸浓度（X）而变的回归方程式，再按回归方程式绘制标准曲线，计算2ml测定液中脯氨酸的含量（μg/2ml）。
样品的测定
（1）脯氨酸的提取：准确称取不同处理的待测植物叶片各0.5g，分别置大管中，然后向各管分别加入5ml3％的磺基水杨酸溶液，在沸水浴中提取10min，（提取过程中要经常摇动），冷却后过滤于干净的试管中，滤液即为脯氨酸的提取液。
（2）吸取2ml提取液于另一干净的带玻塞试管中，加入2ml冰醋酸及2ml酸性茚三酮试剂，在沸水浴中加热30min，溶液即呈红色。
（3）冷却后加入4ml甲苯，摇荡30S，静置片刻，取上层液至10ml离心管中，在3000rpm下离心5min。
（4）用吸管轻轻吸取上层脯氨酸红色甲苯溶液于比色杯中，以甲苯为空白对照，在分光光度计上520nm波长处比色，求得吸光度值。
结果计算根据回归方程计算出（或从标准曲线上查出）2ml测定液中脯氨酸的含量（Xμg/2ml），然后计算样品中脯氨酸含量的百分数。计算公式如下：
脯氨酸含量（μg/g）＝[X×5/2]/样重（g）。
下午好，苯甲酸只能微溶于水特别在冷水环境时很容易饱和，加入少量二甲苯高速搅拌时可以稀释一部分不过最好用亲水度更高的甲苯比较好，此外水油两溶的1,4-二氧六环、1,5-戊二醇和四氢呋喃对水相分离芳香酸也有帮助。纯硫酸钠不溶于以上这些有机溶剂。
硒试剂简称DAB，学名3，3'-二氨基联苯胺，在酸性介质中与se(Ⅳ)生成黄色苤吖硒脑。反应式如下：
3，3'－二氨基联苯胺＋2H2SeO3=联苯中每个苯环的NH2变成环：－N＝Se＝N－ ＋6H2O。摩尔比为1份DAB,两份含Se物，反应生成1份显色物质，6份水。
实在打不上来，就不要难为我了吧！？
DAB是一种碱，在空气中迅速变暗，其盐酸盐为白色针状物，溶于水，其盐酸盐的水溶液可作显色液。K．L．CI】 研究了DAB与Se(It；)的显色反应，测定了砷或氧化砷中的痕量se 钢铁中的se一般用一氯代碘、氯化亚锡还原光度法，2，3-二氨基萘萃取光度法和硫代硫酸钠滴定法测定 J。这几种方法灵敏度低，测定范围窄，基本上在o．o3％ ～o．50％之间，且2，3 二氨基萘是致癌物，污染环境。鲁丹等 用氢化物原子吸收法测定了加硒碘盐中的se。
笔者将DAB光度法用于钢铁及加硒碘盐中微量se的测定，对加硒碘盐，用2mL 0．2 mol／L的乙二胺四乙酸二钠(EDTA)作掩蔽剂；对于100 mg Fe(Ⅲ)，用10 mL 0．2 mol／L EDTA作掩蔽剂 当溶液中se(Ⅳ)含量小于20t~／lOⅡlL时，用甲苯萃取Se(Ⅳ)．DAB络合物，在波长420 nIn处测定；当溶液中Se(Ⅳ)含量大于20 t~．／lO mL时，不用萃取se(Ⅳ) DAB络合物，在波长340 I1Ⅱ1处直接测定，结果满意。
方法：
取适量10tC．／．~L Se工作溶液于100 mL烧杯中，加2 mL 2．5 mol／L甲酸溶液，2 mL 0．2 mol／L EDTA溶液，加水稀释至5o mL左右，用氨水(1+1)调节DH为2～3，加2 mL0．5％DAB，放置3o～5o min，用氨水(1+1)调节pH为6～7。当溶液中Se(Ⅳ)含量小于20t~／lOInL时，将溶液移入125 InL分液漏斗中，加10 mL甲苯，剧烈摇动30 s，弃去水相，将有机相移人离心管中，在波长420 irlm处以试剂空白[不加se(Ⅳ)的甲苯溶液]作参比，测定吸光度；当溶液中Se(Ⅳ)含量大于20 异／1O mL时，加入DAB，定容于50 rnL容量瓶中，不用萃取se(Ⅳ) DAB络合物，放置30—5o udn，以不加se(Ⅳ)的试剂溶液作参比．在波长340 ilm处测定吸光度。
500ml 圆底烧瓶通过收集器 2 与回流冷凝器 3 联接，连接处均为磨口玻璃。此装置各部件的关键性尺寸如下：连接管内径为 9～11mm，收集器 2 长 235～240mm，如为直形冷凝器，约长 400mm，内径不小于 8mm，接受管容量 5ml，其圆筒形部分长 146～156mm，刻度到 O.1 ml 的细分度，指示体积的读数误差不大于 0.05ml，热源最好是变阻器控制的电热器或油浴。烧瓶上部和连接管可采取绝热措施。 另需准备止爆剂(如玻璃珠)、长刷及铜丝等。
测定法
取供试品适量(约相当于含水量 1～4ml)，精密称定，置 1 瓶中，加甲苯约 200ml，必要时加入干燥、洁净的无釉小瓷片或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，将 1 置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟镏出 2 滴。待水分完全镏 出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏 5 分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在 B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置使水分与甲苯完全分离(可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察)（甲基蓝可不用）。检读水量，并计算成供试品的含水量(％)。
注意事项
1 装置使用前，应先用铬酸洗液洗涤接受管及冷凝器，用水充分漂洗，烘干。全部仪器应保持清洁，干燥。 2 圆底烧瓶中需加入 1～2 粒止爆剂（如玻璃珠、沸石、碎瓷片等）以防爆沸。 3 注意控制电热套温度，使每秒钟馏出 2 滴。 4 蒸馏时宜先小火，控制馏出的速度,不宜太快。 5 蒸馏完成后,应充分放置至室温后,再检读水量,否则使检测结果偏高。
2）剩余的油胺和三异丙基硅烷可以用塑料离心管装着离心。
3）前提是：油胺和比重大于三异丙基硅烷，离心分离是可行的。
