40g/L硫酸肼溶液怎么配

浊度标准液的配置1.试剂1.1 硫酸肼｛（N2H4）H2SO4｝1.2 六次甲基四胺{（CH2）6N4 }1.3 蒸馏水2.仪器设备及玻璃器材2.1 电子天平2.2 100mL容量瓶2.3 100mL烧杯2.4 漏斗2.5 漏斗支架2.6 玻璃棒2.7 0.2μm滤膜2.8 250mL试剂瓶、试剂标签纸3.配置方法3.1零浊度水的配置将蒸馏水通过0.2μm滤膜过滤，收集于用滤过水荡洗两次的烧杯中，存放于试剂瓶中，并贴上标签。3.2 400NTU浊度水的配置3.2.1 1g/100mL硫酸肼溶液称取1.000g硫酸肼｛（N2H4）H2SO4｝溶于水，定容至100mL。注：硫酸肼，有毒，致癌！！！配置过程中应十分小心。3.2.2 10g/100mL六次甲基四胺溶液称取10.00g六次甲基四胺{（CH2）6N4 }溶于水，定容至100mL。3.2.3 400NTU浊度水的配置吸取5.00mL硫酸肼溶液（3.2.1）与5.00mL六次甲基四胺溶液（3.2.2）于100mL容量瓶中，混匀。于25±3℃静置反应24h。冷后用水稀释至标线，混匀。此溶液浊度为400NTU，可保存1个月。3.3 100NTU浊度水的配置量取25mL 400NTU浊度水（3.2.3）至于100mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。此溶液浊度为100NTU，可保存1个月。

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浊度标准液的配置

浊度标准液的配置

1.试剂

1.1 硫酸肼｛（N2H4）H2SO4｝

1.2 六次甲基四胺{（CH2）6N4 }

1.3 蒸馏水

2.仪器设备及玻璃器材

2.1 电子天平

2.2 100mL容量瓶

2.3 100mL烧杯

2.4 漏斗

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2.5 漏斗支架

2.6 玻璃棒

2.7 0.2μm滤膜

2.8 250mL试剂瓶、试剂标签纸

3.配置方法

3.1零浊度水的配置

将蒸馏水通过0.2μm滤膜过滤，收集于用滤过水荡洗两次的烧杯中，存放于试剂瓶中，并贴上标签。

3.2 400NTU浊度水的配置

浊度计所用的零度水制作完毕后，以1.000g的硫酸肼加入100mL的零度水溶液，获得标准的硫酸肼溶液，以10.00g的六次甲基四胺加入100mL的零度水溶液，获得标准六甲基四胺溶液。

浊度计所需的标准浊度溶液就是将5.00mL的硫酸肼溶液和5.00mL的六次甲基四胺溶液，装入100mL标准容量瓶中，摇匀并静置到24小时后，再以零度水注满到稀释刻度，混合形成新的溶液，即是标准的浊度溶液。

73.11.8.1 砷钼蓝光度法

方法提要

将煤样与艾氏卡试剂混合烧结，用硫酸和盐酸溶解烧结物，加入还原剂，使五价砷还原成三价砷，加入锌粒，使砷形成氢化砷气体随氢气释出，然后被碘溶液吸收并氧化成砷酸，加入钼酸铵-硫酸肼溶液使之生成砷钼蓝，然后用光度法测定。本法适用于褐煤、烟煤和无烟煤中砷的测定。

仪器

砷测定仪图73.48，在每个测定仪中加入10.0μg或20.0μg砷标准溶液，按分析步骤进行测定，然后与直接法(砷标准溶液不经过氢化砷发生步骤，而直接显色)的测定结果相比较，计算其回收率，选择回收率相差不超过10%者使用。

分光光度计波长830nm或700nm(当使用200～1000nm波长范围的分光光度计时，测定波长用830nm当使用420～700nm波长范围的分光光度计时，测定波长用700nm)。

图73.48 砷测定仪

试剂

艾氏卡试剂用2份质量的轻质氧化镁与1份质量的无水碳酸钠混合而成。

无砷金属锌 颗粒状，粒度约5mm。

盐酸。

硫酸。

碘化钾溶液 称取3gKI溶于17mL水中，使用前配制。

氯化亚锡溶液称取8gSnCl2·2H2O溶于12mLHCl中。

乙酸铅棉将脱脂棉在400g/L的PbAc溶液中充分浸泡，取出挤干，在80～100℃烘干，存放在干燥器中备用。

碘溶液 称取9gKI和1.5gI2用少量水溶解后，稀释至1000mL。

钼酸铵溶液称 取10g钼酸铵溶解于1000mL5mol/LH2SO4中。

硫酸肼溶液 称取1.2g硫酸肼溶于1000mL水中。

钼酸铵-硫酸肼溶液 将钼酸铵溶液和硫酸肼溶液按等体积混合，使用前配制。

碳酸氢钠溶液称取40gNaHCO3溶于1000mL水中。

氢氧化钠溶液c(NaOH)=6mol/L。

砷标准溶液ρ(As)=10.0μg/mL称取0.1320g已在105～110℃干燥约2h的优级纯三氧化二砷，溶于2mLNaOH溶液中，加入约50mL水，待完全溶解后，再加2.5mL6mol/LH2SO4，用水稀释至1000mL，该溶液含砷100μg/mL。再加水稀释配制成10.0μg/mL砷标准溶液。

校准曲线

分取0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL砷标准溶液(10.0μg/mL)于砷测定仪中，分别加入10mL6mol/LH2SO4、20mL(1+1)HCl，用水稀释至50mL。加2mLKI溶液和1mLSnCl2溶液，摇匀，在室温下放置15min。于吸收器中准确加入3mL碘溶液、1mLNaHCO3溶液和6mL水，将吸收器插入装有乙酸铅棉的吸收器套管中。往烧瓶中加入5g锌粒，立即将吸收器套管与烧瓶连接好，用适当方法确认接口不漏气后，使发生过程持续约1h。取出吸收器，加入5mL钼酸铵-硫酸肼溶液，并用洗耳球从吸收器侧孔打气约10次，使溶液充分混匀。将吸收器在沸水浴中加热20min，取出，冷却至室温。用1cm比色池，在波长830nm(或700nm)处，以空白试剂溶液为参比，用分光光度计测定吸光度，绘制校准曲线。

分析步骤

称取1g(精确至0.0001g)粒度小于0.2mm的空气干燥煤样，置于预先盛有2g艾氏卡试剂的瓷坩埚中，用玻璃棒搅匀，再用1g艾氏卡试剂盖上。将坩埚放入高温炉中，在约2h内由室温加热到(800±10)℃，并在此温度下保持2～3h，取出冷却至室温。将烧结物转移到砷测定仪圆烧瓶中，用20mL6mol/LH2SO4分2～3次冲冼坩埚，再用30mL(1+1)HCl分数次洗坩埚，摇动烧瓶使烧结物充分溶解，然后按校准曲线操作，测得砷量。同时做空白试验。

按下式计算空气干燥煤样中砷的含量:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:w(Asad)为空气干燥煤样中砷的质量分数，%m1为煤样溶液中砷的量，μgm2为艾氏卡试剂空白溶液中砷的量，μgm为空气干燥煤样的质量，g。

73.11.8.2 氢化物发生-原子吸收光谱法

方法提要

煤样与艾氏卡试剂混合烧结，用盐酸溶解烧结物，用碘化钾将五价砷还原为三价砷，再用硼氢化钠将三价砷还原为氢化砷，以氮气为载气将其导入石英管原子化器，用原子吸收光谱法测定。

仪器

原子吸收光谱仪。

自动氢化物发生器能自动进行洗涤、量液、加液，精度达0.5%。

氮气纯度99.9%以上。

试剂

硼氢化钠溶液称取18g硼氢化钠溶于1000mL5g/LNaOH溶液中，用时现配。

碘化钾溶液将300gKI溶于1000mL水中。

氢氧化钠溶液c(NaOH)=6mol/L。

砷标准溶液ρ(As)=100.0μg/mL称取0.1320g已在100～105℃干燥约2h的优级纯三氧化二砷，溶于2mLNaOH溶液中，待完全溶解后，加入约50mL水，摇匀，移入1000mL容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。

砷空白溶液称取15g(精确至0.01g)艾氏卡试剂，放入100mL蒸发皿中，将皿置入高温炉中，由室温慢慢加热到500℃，在此温度下保持约1h，升高温度至(800±10)℃，并保持约3h，取出蒸发皿，冷却至室温，将烧结物转移到盛有100～150mL热水的400mL烧杯中，用25mLHCl溶解皿内残渣，并转移到烧杯中。用水将残渣全部冲入烧杯中，再用75mLHCl分3次洗涤蒸发皿，将洗液转移到烧杯中，搅拌使残渣全部溶解，冷却至室温，转移到500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，溶液移入塑料瓶中贮存。

硫代硫酸钠饱和溶液。

其他试剂同73.11.8.1砷钼蓝光度法。

校准曲线

吸取10.0mL砷标准溶液置于100mL容量瓶中，用砷空白溶液稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL含砷10.0μg。再用砷空白溶液稀释配制ρ(As)=0.20μg/mL的砷校准溶液。

取6个100mL容量瓶，分别加入0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL砷校准溶液和5.00mL、4.00mL、3.00mL、2.00mL、1.00mL、0.00mL砷空白溶液，混匀。各加入10mLHCl，混匀，再加入5mLKI溶液，用水稀释至约50mL，混匀，放置约30min。于瓶中滴加饱和硫代硫酸钠溶液至碘退色，用水稀释至刻度，摇匀。

将氢化物发生器的原子化器安装到原子吸收光谱仪的燃烧器上方，使石英管的轴心与燃烧器狭缝上下对正并平行，调节燃烧器的上下、前后位置和转角，使石英管的轴心与原子吸收光谱仪的主光轴重合，连好气路。根据所使用的氢化物发生器具体情况，合理选定工作参数。一般为:每次测定用5mL试液、2mL硼氢化钠溶液，载气流速1L/min。

采用砷空心阴极灯作单色光源，单色器波长193.7nm。用空气-乙炔焰加热石英管原子化器。灯电流、狭缝宽度等参数，应根据仪器的具体情况，调到最佳状态。

按仪器操作说明以校准系列空白调零后，对校准系列溶液进行氢化物发生-原子吸收光谱法测定。绘制校准曲线。

分析步骤

称取1g(精确至0.0001g)粒度小于0.2mm的空气干燥煤样，置于已加有3g艾氏卡试剂的瓷坩埚中于(800±10)℃烧结，烧结操作与本节73.11.8.1砷钼蓝光度法相同。将烧结物转移至盛有20～30mL热水的150mL烧杯中，于坩埚中加入5mLHCl，将残存物充分溶解后倒入烧杯中，用水将坩埚中残渣冲洗到烧杯中，再用15mLHCl分3次洗涤坩埚，洗液转移到烧杯中，搅拌溶解。待溶液冷却后，全部移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。吸取5.00mL试液置于100mL容量瓶中，按校准系列分析步骤进行预还原、氢化物发生和原子吸收光谱法测定。测得砷量。同时做空白试验。

按下式计算空气干燥煤样中砷的含量:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:w(Asad)为空气干燥煤样中砷的质量分数，%m1为从校准曲线上查得试样溶液的砷含量，μgm0为从校准曲线上查得空白试验溶液的砷含量，μgV1为测定时所取的试液体积，mLV为试液总体积，mLm为空气干燥煤样的质量，g。

注意事项

1)当灰分大于40%，或砷含量大于10μg或全硫含量大于8%时，称样量为0.5g。

2)有些样品在用盐酸提取时会有固体残渣存在，但不影响测定结果。

73.11.8.3 氢化物发生-原子荧光光谱法

方法提要

将煤样与艾氏卡试剂混合烧结，用盐酸溶解烧结物，用硫脲-抗坏血酸还原，再用硼氢化钠将三价砷还原为氢化砷，用原子荧光光谱法测定。

仪器

原子荧光光谱仪灯电流30～35mA，负高压300V，载气流量300mL/min，屏蔽气流量800mL/min。砷高强度空心阴极灯。

试剂

硫脲-抗坏血酸混合还原剂称取10g硫脲溶于200mL水，再溶解10g抗坏血酸，现用现配。

砷标准溶液ρ(As)=10.0μg/mL先按73.11.8.1砷钼蓝光度法配制ρ(As)=100.0μg/mL砷标准溶液，再用砷空白溶液稀释成ρ(As)=10.0μg/mL砷标准溶液。

硼氢化钾溶液20g/L。

其他试剂同73.11.8.1砷钼蓝光度法。

校准曲线

分取含砷0.0μg、2.5μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、30.0μg的砷标准溶液分别置于100mL容量瓶中，用(1+4)HCl稀释至刻度，摇匀，以下操作与本节73.11.8.2氢化物发生-原子吸收光谱法相同。分取5.00mL清液，加2.5mL(2+3)HCl和2.5mL硫脲-抗坏血酸混合还原剂，摇匀，放置5min后，在原子荧光光谱仪上按工作条件测量砷的荧光信号，绘制校准曲线。

分析步骤

称取1g(精确至0.0001g)粒度小于0.2mm的空气干燥煤样，加3g艾氏卡试剂于(800±10)℃烧结，烧结物用盐酸溶解，移入100mL容量瓶中，以下操作同校准曲线，测得砷量。

空气干燥煤样砷含量的计算参见式(73.95)。

注意事项

1)当灰分大于40%，或砷含量大于10μg或全硫含量大于8%时，称样量为0.5g。

2)有些试样会有固体残渣存在，但不影响测定结果。

了解糖酵解过程的某一中间步骤及利用抑制剂来研究中间代谢的方法。

二、实验原理

利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成2，4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物，其棕色程度与2-磷酸苷油醛含量成正比。

三、仪器 原料和试剂

（1）仪器：试管（1.5×1.5cm）、吸量管（1ml、、2ml3ml）、恒温水浴、烧杯（50ml）。

（2）原料：新鲜酵母。

（3）试剂：

①2，4-二硝基苯肼：0.1g2，4-二硝基苯肼溶于水100ml 2mol/L盐酸溶液中，贮于棕色瓶中备用。

②0.56mol/L硫酸肼溶液：称取7.28g硫酸肼溶于50ml水中，这时不会全部溶解，当加入NaOH使pH达7.4时则完全溶解。此液也可用于水合肼溶液配制，可按其分子浓度稀释至0.56mol/L，此时溶液呈碱性，可用浓硫酸调pH至7.4即可。

③5%葡萄糖溶液。

④10%三氯乙酸溶液。

⑤0.75mol/LNaOH溶液。

⑥0.002mol/L碘乙酸溶液。

四、操作步骤

（1）取小烧杯3只，分别加入新鲜酵母0.3g，并按下表分别加入各试剂，混匀。

杯号 5%葡萄糖加入量/ml 10%三氯醋酸加入量/ml 碘乙酸加入量/ml 硫酸肼加入量/ml 发酵时起泡多少

1 10 2 1 1

2 10 -- 1 1

3 10 -- -- --

（2）将各杯混合物分别倒入编号相同的发酵罐内，放入37℃保温1.5h，观察发酵管产生气泡的量有何不同。

（3）把发酵管中发酵液倾倒入同号小烧杯中并在2号和3号杯中按下表补加各试剂，摇匀放10min后和第一只烧杯中内容物一起分别过滤，取滤液进行测定。

杯号 10%三氯乙酸/ml 碘乙酸/ml 硫酸肼/ml

2 2 -- --

3 2 1 1

（4）取3个试管，分别加入上述滤液0.5ml，并按下表加入试剂和处理。

管号

滤液/ml 0.75mol/L

NaOH/ml

室温放置

10min 2，4-二硝基苯肼/ml

38℃水浴保温19min 0.75mol/L

NaOH/ml

观察结果

1 0.5 0.5 0.5 3.5

2 0.5 0.5 0.5 3.5

3 0.5 0.5 0.5 3.5

五、思考题

实验中哪一发酵管生成的气泡最多？哪一管最后生成的颜色最深？为什么？

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生物化学实验糖酵解中间产物的鉴定

生物化学实验——糖酵解中间产物的鉴定

一、实验目的

了解糖酵解过程的某一中间步骤及利用抑制剂来研究中间代谢的方法。

二、实验原理

利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成2，4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物，其棕色程度与2-磷酸苷油醛含量成正比。

三、仪器 原料和试剂

（1）仪器：试管（1.5×1.5cm）、吸量管（1ml、、2ml3ml）、恒温水浴、烧杯（50ml）。

（2）原料：新鲜酵母。

（3）试剂：

①2，4-二硝基苯肼：0.1g2，4-二硝基苯肼溶于水100ml 2mol/L盐酸溶液中，贮于棕色瓶中备用。

②0.56mol/L硫酸肼溶液：称取7.28g硫酸肼溶于50ml水中，这时不会全部溶解，当加入NaOH使pH达7.4时则完全溶解。此液也可用于水合肼溶液配制，可按其分子浓度稀释至0.56mol/L，此时溶液呈碱性，可用浓硫酸调pH至7.4即可。

③5%葡萄糖溶液。

④10%三氯乙酸溶液。

⑤0.75mol/LNaOH溶液。

⑥0.002mol/L碘乙酸溶液。

四、操作步骤

（1）取小烧杯3只，分别加入新鲜酵母0.3g，并按下表分别加入各试剂，混匀。

400NTU的标准浊度液配置操作：

溶液1：

取1．000g硫酸肼（，又名硫酸联胺），溶解于盛有蒸馏水的100mL量瓶内，并稀释到满刻度。

溶液2：

取10g六次甲基四胺，溶解于盛有蒸馏水的100mL量瓶内，并稀释到满刻度。

取5mL溶液1和5mL溶液2，放入100mL量瓶内，混均后在253℃静置24小时；然后稀释到刻度，混均，这个混悬液的浊度是400FTU的浊度标准液。

硫酸联氨，六次甲基四胺，要求“分析纯”，蒸馏水要用零度水。

FTU是标准液的浊度单位，NTU是测量水样的浊度单位；1FTU＝1NTU。

浊度标准液应贮存于0—10℃以内环境中（放置冰箱冷藏室内贮存）。

扩展资料：

浊度计检定中使用国家技术监督局颁布的Formazine标准物质，如GBW12001400度，浊度标准物质，定值不确定度±3％，有效使用期限1年。

不同浊度值的Formazine标准溶液，是用零浊度水和经检定合格的容量器具，按比例准确稀释Formazine浊度标准物质而获得。

400NTU以上的Formazine标准物质需存放在电冰箱的冷藏室内(4-8"C) 低温避光保存，已稀至低浊度值的标准溶液不稳定，不宜保存，应随用随配。

参考资料：百度百科-浊度标准液

英文：Formazin

配置方法：在100ml容量瓶中，以25.0ml水溶解2.5g乌洛托品。配置乌洛托品溶液。

取1.0g硫酸肼溶于水，加水稀释至100.0ml，静置4～6小时。配置硫酸肼溶液。

将上述两种溶液等量混合，经静置24小时，贮存在无表面缺陷的玻璃容器中，可在2个月内使用。该浊度液不得黏附玻璃，用前必须充分摇匀。（该配置方法根据EP7.0翻译)

方法提要

试样经过氧化钠分解，浸取酸化后，在硫酸介质中，用三氯化钛、碘化钾还原铁和五价砷，用苯萃取AsI3，水反萃取，用高锰酸钾将三价砷氧化至五价砷，五价砷与钼酸铵形成砷钼杂多酸配合物，用硫酸肼还原成砷钼蓝，于波长720nm处测量砷的吸光度。本法适用于多金属矿石中0.01%～1.0%砷的测定。

仪器

分光光度计。

试剂

过氧化钠。

苯。

硫酸。

三氯化钛溶液。

柠檬酸溶液(500g/L)。

碘化钾溶液(30g/L)。

碘化钾-盐酸溶液取25mLKI溶液，加入75mLHCl，摇匀，用时现配。

氢氧化钠溶液(100g/L)。

高锰酸钾溶液(2g/L)。

钼酸铵-硫酸溶液称取1.75g(NH4)2Mo2O24·4H2O，溶于4mol/LH2SO4中，用4mol/LH2SO4稀释至100mL。

硫酸肼溶液(1g/L)。

砷标准储备溶液ρ(As)=1.00mg/mL配制方法见本章51.3.1碱熔分离-碘量法。

砷标准溶液ρ(As)=20.0μg/mL由砷标准储备溶液稀释配制。

酚酞指示剂(1g/L乙醇溶液)。

校准曲线

分取0.00mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL砷标准溶液，分别置于一组25mL比色管中，用水稀释至25mL，加入1滴酚酞指示剂，用氢氧化钠溶液中和至红色出现后，滴加(1+1)H2SO4至红色消失，加入0.5mLKMnO4溶液，摇匀，置于沸水浴中加热10min。加入2.5mL钼酸铵-硫酸溶液，摇匀。加入2.5mL硫酸肼溶液，用水稀释至刻度，摇匀。继续置于沸水浴中加热10min，取出流水冷却至室温，再用水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用1cm或2cm比色皿，以试剂空白溶液作参比，于720nm波长处测量吸光度。绘制校准曲线。

分析步骤

称取0.5g(精确至0.0001g)试样置于10mL刚玉坩埚中，加入3gNa2O2，混匀，上面再覆盖1gNa2O2，放入已升温至700℃的高温炉中熔融10min。取出，冷却，放入250mL塑料烧杯中，用40mL热水浸提，盖上表面皿，待激烈反应停止后，在不断搅拌下，沿杯壁滴加(1+1)H2SO4至氢氧化物溶解，用少量水洗出坩埚和表面皿，冷却至室温，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

分取20.0mL溶液置于已盛有13mL(2+1)H2SO4的125mL分液漏斗中，摇匀，冷却至室温。加入1mL柠檬酸溶液，在摇动下逐滴加入三氯化钛溶液至溶液呈紫色后过量8滴，加3mLKI溶液，摇匀。加水至体积约40mL，加10mL苯，振摇1min，分层后，弃去水相。再加5mLKI-HCl溶液，振摇1min，分层后，放尽水相。

于分液漏斗中，加入10mL水反萃取1min，分层后将水相放入25mL比色管中。再向分液漏斗中加入5mL水，振摇0.5min分层后，将水相合并于25mL比色管中。向比色管加入1滴酚酞指示剂，然后按校准曲线分析步骤操作，测得砷量。

砷含量的计算见式(51.6)。

注意事项

1)溶液的显色酸度应严格控制，酸度太低，钼酸盐自身还原呈现微蓝色酸度太高，砷钼蓝颜色强度严重削弱，显色时的硫酸浓度以0.12mol/L较为合适。另外，溶液酸度与钼酸盐的比例也很重要，当硫酸为上述浓度时，钼酸盐的浓度应控制在0.05%。

2)有磷存在时也能形成钼蓝，干扰测定，但经过萃取分离，可不考虑磷的干扰。

3)如萃取时产生大量的胶状物影响分层，应重新进行试验。试样熔融浸取后应加入15mL乙醇，然后移入100mL容量瓶中。在萃取时将三氯化钛的用量增加1倍，碘化钾的用量也由3mL增加到4mL。足量的三氯化钛可将高价的砷、铁、钼、钒、铜、锑等还原至低价，以免氧化碘离子。

（4）移出电极，用蒸馏水清洗并沾干水分，插入用pH试纸粗测的与水样同酸碱性的标准缓冲溶液中。同样摇动塑料试杯，待读数稳定时，调节“斜率”旋钮，使显示pH值为当时温度下对应的标准溶液的pH值。

注意：仪器校准完毕，“定位”和“斜率”旋钮不能再动。 4.测定水样pH值

（1）移出电极，用蒸馏水清洗并沾干水分。

（2）将电极插入被测液内，摇动试杯使之均匀，待读数稳定时读数，即为水样pH值。 （3）测量完毕，将电极冲洗干净，套上保护帽，帽内放一定量蒸馏水以保持电极球泡的湿润。 （注：pHS-25型酸度计控制面板及操作与pHS-3C型相同）。 五、思考题

1、玻璃电极法测定pH值的原理？

2、用仪器测定pH值时，如何选择校准仪器用的标液？仪器如何校正？ 3、准确测定水样的pH值应注意哪些问题？

实验二 水样浊度的测定

（分光光度法）（A）

一、实验目的及要求

1．掌握分光光度法测定水样浊度的操作； 2．熟练标准曲线的绘制； 3．学习并熟练分光光度计的使用。 二、方法原理

在适当温度下，硫酸肼与六次甲基四胺聚合，形成白色高分子聚合物，以此作为浊度标准液，于680nm波长处用3cm比色皿测定吸光度，绘制标准曲线。测定水样吸光度，从标准曲线上查得相应浊度。

本法适用于测定天然水、饮用水的浊度，最低检测浊度为3度。 三、仪器及试剂 1．50mL比色管。 2．分光光度计。

3．无浊度水：将蒸馏水通过0.2µm滤膜过滤，收集于用过滤水荡洗两次的玻璃瓶中。 4．浊度贮备液

（1）硫酸肼溶液：称取1.000g硫酸肼［（NH2）2SO4•H2SO4］溶于水中，定容至100mL。 （2）六次甲基四胺溶液：称取10.00g六次甲基四胺［(CH2)6N4］溶于水中，定容至100mL。 （3）浊度标准溶液：吸取5.00mL硫酸肼溶液与5.00mL六次甲基四胺溶液于100mL容量瓶中，混匀。于（25±3）℃静置反应24h。冷却后用水稀释至标线，混匀。此溶液浊度为400度，可保存一个月。

COD量是表征水本被污染程度的主要指标，在当前主要的检测方法主要有酸性高锰酸盐氧化法、碱性高锰酸盐氧化法和重铬酸盐氧化法等等，前两种方法主要检测地下水及污染较轻水的COD含量，后一种主要检测污水中COD的含量。这两种方法的优点是，氧化完全，测定准确。但是，这些方法要求检测条件较为严格，试验时间长，同时需要大量的化学试剂，有些试剂使用还要进行处理，否则就会造成环境的二次污染。因此简单、快速的紫外分光光度法检测水的COD便可解决这些问题。

1.基本原理

水中以有机物的量来代表水中 COD 的量，虽各种有机物都有自己的吸收度，对每一波长的光的吸收度是不一样的，但我们发现大部分的有机物在紫外光谱区波长为254nm处有很强的吸收，因此在波长254 nm 紫外光区来测量污水 COD 具有很大的准确性。但是，实际我们平时所做的污水样品中，大多数都较混浊，其中含有大量的悬浊物及一些胶体，这些在测量的过程中会对测定COD的含量有一定的影响，会使测量的结果偏大，所以我们必须对此时测得的COD量进行修正。也就是说，我们同时还应测出此时水的浊度，在波长为546nm处的可见光区，可测出水的浊度。这样两次所测量的差值便为水中COD的含量。

2.试验方法

2.1所用仪器 紫外分光光度计

2.2所用试剂 邻苯二甲酸氢钾、硫酸肼、六次甲基四胺

2.3标准溶液的配制

2.3.1 COD标准溶液的配制：称取在105度的温度下干燥优级纯邻苯二甲酸氢钾0.425 1g溶解于水中，定容至1 000 mL，此标准溶液为COD为500 mg/L的贮备液。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0、16.0、18.0mL邻苯二甲酸氢钾标准储备液于25mL比色管中，加定容到25 mL，摇匀，则得到的COD分别为40、80、120、160、200、240、280、320、360 mg/L。

2.3.2 浊度标准溶液的配制：称取硫酸肼1.0000 g溶于水中，定容至 100 mL 得到1%硫酸肼溶液；称取 10.00 g 六次甲基四胺溶于水中，定容至 100 mL，得到10%六次甲基四胺溶液。分别吸取 5.00 mL 硫酸肼溶液和5.00 mL 六次甲基四胺溶液混合于室温放置24 小时，定溶至100 mL，摇匀，此时得到浊度为 400 度的贮备液。吸取 2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、9.00、10.00mL 浊度标准贮备液于 25mL 比色管中，定容摇匀，则得到的浊度值分别为 32、48、64、80、96、112、128、144、160 度。

2.4测试结果

2.4.1COD标准溶液在波长为254nm及546nm处的吸光度及标准曲线：

3．讨论

从实验中我们可以看出，COD标准样品中，546nm处吸光度可忽略不计，所以可以看出COD在此波长时不吸收，对于浊度标准样品的分析我们也可以得出其在254nm及546nm处均有吸收，而且线性非常好，因此我们在测水样时，依据三个标准曲线，测得水样中两个波长的吸光度进行计算求得水样的浊度及COD值。我们根据对样品不同浓度的测度得出，通过紫外分光光度法测得的水样的COD值与重铬酸盐氧化法测得的COD值一致，证明紫外分光光度法测COD值的准确性。

4.结论

本文对紫外分光光度法测定污水COD值进行了实验研究，结果显示污水由于水体混浊，其在波长为254nm及546nm处均有吸收且呈现很好的线性关系，而COD在546nm处没有吸收，所以我们可以根据两波长的吸光度值及水的浊度值求得水中COD值。