做实验需要让无水乙醇快速挥发,需要怎么样才能实现啊?
晚上好,无水乙醇因为沸点很低同时蒸气压有比较高,快速挥发使用减压蒸馏或者抽真空的方法都可以实现,第二种方法安全程度更高一些请参考。其他低沸点有机溶剂比如二氯甲烷、丙酮或者乙醚也可以通用以上方法进行快速去除。
有一点需要明确,95%的乙醇无论您如何蒸馏,最终得到的还是95%的乙醇,因为这个比例时是恒沸溶液!
所需试剂:95%乙醇 生石灰 钠 邻苯二甲酸二乙脂
仪器:回流装置一套
实验步骤:
前期准备:将100ml 95%乙醇、15g生石灰装入100ml圆底烧瓶,摇匀后用橡皮塞塞紧并放置过夜。称取12g镁粉,放入稀盐酸中,反应后过滤,放干燥器中干燥。
钠干: 将过夜处置后的乙醇,加入钠片,继续放置直至没有气泡冒出为止。
回流:把处理过的镁粉放入圆底烧瓶中,加入放置过的物料无水乙醇20ml,装上回流装置,加热至微沸,移去热源,加入几粒碘单质引发,引发完毕后,加入沸石、100ml无水乙醇,加热回流2h。
蒸馏:回流结束后,待反应体系稍冷,将其改装成蒸馏装置。用电热套加热蒸馏出绝对无水乙醇。产品储于带有磨口塞或橡皮塞的容器中。
注意事项 :
1. 要过量加入干燥剂,让干燥剂充分吸收多余的水分。
2. 加钠后,不要把瓶塞塞紧,防止产生的氢气压力加大伤到。
3. 加碘单质引发时,要移去热源,防止暴沸;因引发过程中放出大量的热。
4. 蒸馏开始时,应缓慢加热,当温度达到乙醇的沸点时,在收集馏分。
5. 控制好温度,使之不要超过80oC。
6. 所用仪器要干燥或是润洗,防止带入水分。
除开浓硫酸,干燥剂基本没有能和酒精发生化学反应的!【当然,浓硫酸也可以和纸反应】
更谈不上什么快点挥发这件事了。
使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。
去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。
加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。
沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。</ol>总结: DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。