石油醚层萃取的浸膏，想要过凝胶，求用什么洗脱系统

我大学毕业的毕设做的是PVA聚乙酸乙酯高分子渗透汽化膜，制膜时用的就是溶剂蒸发法。就是在原料中添加稀释剂(当然这种溶剂是要易于蒸发的)，通过一些方式(比如持续加热搅拌)让两者在(或添加一些催化剂)某条件下熔融，制膜成型后自然晾干或者在烘箱中让溶剂蒸发，得到高分子膜。

清华大学的清华大学学报(自然科学版)有很多关于高分子膜的制备方法，你提到的那几种都有提到，最常见的还是溶剂蒸发法和冷却沉淀法

农药是一类特殊的化学品, 它既能防治农林病虫害, 也会对人畜产生危害。因此, 农药的使用, 一方面造福于人类, 另一方面也给人类赖依生存的环境带来危害, 据文献报道, 农药利用率一般为10% 约90%的残留在环境中, 造成对环境的污染。大量散失的农药挥发到空气中, 流入水体中, 沉降聚集在土壤中,污染农畜渔果产品, 并通过食物链的富集作用转移到人体, 对人体产生危害。农药可以间接对人体造成危害。间接途径就是农药对环境造成污染, 经食物链的逐步富集, 最后进入人体, 引起慢性中毒。高效剧毒的农药, 毒性大, 且在环境中残留的时间长, 当人畜食用了含有残留农药的食物时, 就会造成积累性中毒。这类危害往往要经过较长的时间积累才显示出症状, 不为人们所认识它又是通过食物链的富集作用, 最后才进入人体, 不易及时发现, 因此, 一般不为人们所重视, 而且这类污染范围广, 危害的人众多, 在许多情况下, 是人类自己在毒害自己, 所以说, 这类危害更加危险。大量使用农药, 在杀死害虫的同时, 也会杀死其它食害虫的益鸟、益兽, 使食害虫的益鸟、益兽大大减少,从而破坏了生态平衡。加之经常使用农药, 使害虫产生了抗药性, 导致用药次数和用药量的增加, 加大了对环境的污染和对生态的破坏, 由此形成滥用农药的恶性循环。随排水或雨水进入水体的农药, 毒害水中生物的繁殖和生长, 使淡水渔业水域和海洋近岸水域的水质受到损坏, 影响鱼卵胚胎发育, 使孵化后的鱼苗生长缓慢或死亡, 在成鱼体内积累, 使之不能食用和导致繁殖衰退。随着用药量的不断增加, 渔业水质不断恶化, 渔业污染事故时有发生, 渔业生产受到严重威胁, 往往造成渔业大幅度减产, 直接造成经济损失. 化合物的毒性是其可使人(或动物)造成伤害的固有特性，而化合物的危害性(hazard)是其毒性的函数，即在特定环境条件下与该化合物的接触程度(exposure)，是对人造成伤害可能性的条件。

危害性=毒性×接触程度

对生产、加工和施用农药的工人，与农药接触大多是高浓度的，有长期也有较短期的接触。对于大多数人们来说，主要是通过食用带有残留农药的食品与农药接触，这种接触每天都有，是长期的。过去食品中残留问题主要是重金属和持久性有机氯农药。但在我国剧毒高毒有机磷与氨在甲酸酯农药的不合理使用，造成不少食用果实蔬菜者的急性与亚急性中毒。

二,农药残留的分析方法举例

1、快速初筛检测法

1.1胆碱酯酯或酯酶抑制法

国内外已开发多种类型及方法测定食品中有机磷与氨基甲酸酯农药的残留。

1.2免疫分析法

是将抗体抗原反应与现代测试手段相结合的微量分析法。具有高灵敏度和高效能等优点，仅需很少的仪器设备和专业培训，是初筛及测定致癌物和一些剧毒农药的好方法。但该方法开发费用高，开发时间长约1年，而且只适于分析一种农药或一类农药。

1.3传感器技术

以上两种方法都可以使用传感器技术，利用酶或抗体作为获得高灵敏度的基本物质，在特殊的膜或类似表面上进行反应，通过测定pH，电导或传导的变化等可输出信息。如能用在现场测试方面，则可扩大使用。但其货架寿命，其它物质的干扰，感应重现性等，都是需要解决的问题。

2、样本预处理技术

2.1凝胶色谱(Gel Permeation Chromatography)

以不同孔径的多孔凝胶装柱，根据多孔凝胶对不同大小分子的排助效应进行分离。大分子的类脂物、色素(叶绿素、叶黄素)，生物碱，聚合物等先淋洗出来，农药及工业污染物等分子量较小，后淋洗出。目前使用较多的是XAD系列凝胶，不同配比的环己烷和乙酸乙酯作为淋洗剂，方法可以自动化，重现性好，溶剂与GLC匹配。共缺点是小分子的干扰物会与农药一起流出，较大分子的农药可能会先流出等，有时须再增加柱色谱技术净化。

2.2固相萃取技术和吸附柱色谱？

早期都使用弗罗里硅土与氧化铝装吸附柱来净化中等极性和非极性农药，但许多极性农药与代谢物易丢失，或者需要用极性溶剂来淋洗。本实验室在弗罗里硅土中添加微量活性碳，对于叶菜类的净化特别适合，也可用于其它蔬菜和果树的净化。固相萃取技术通常使用固相结合相(Solid bond phase)，即在硅胶的未反应硅醇基上接上各种官能团，通常有非极性(C8-C18)(反相色谱)，极性(正相色谱)，离子交换三种。如C18小柱，可以吸附高分子量的非极性干扰物质，特别适用于低脂类果树蔬菜的净化。可进行：①选择性淋洗，将农药先淋洗下来，强保留的杂质留下。②选择性洗脱，溶剂强度可使弱保留杂质先洗脱，使农药保留。

2.3超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction)

超临界流体萃取是利用某些物资(或溶剂)在临界点以上所具有的特性来提取混合物中可溶性组分的一种新的分离技术。所谓超临界流体是物质处在临界温度和监界压力之上的状态，介于气态介于气态和液态之间，兼有气体和液体的其某些物理性状，如类似于液体具有较大的密度和溶解度，类似于气体具有较强的穿透能力。称为超临界流体或高密度气体(densegases)。

通常气体都有一个临界温度(Critical temperature,Tc)，是指能被液化的最高温度，若气体的温度高于临界温度时，不论有多大压力都不能使之液化，只是随着压力增加而密度加大，处于超临界状态，因此亦称为高密度气体。气体有一临界压力(Pc)，指在临界温度下气体被液化的最低压力，如二氧化碳的Pc为73大气压，即1073psi，如果压力小于Pc，无论温度如何降低，物质不能液化。在临界温度和临界压力状态下，压力和温度的微小变化，都会引起气体密度很大的变化，可使其溶解能力有100-1000倍的变化。超临界流体的密度约为0.2-0.9g/cm.s，接近于液体，比气体高数百倍以上。其流动性和粘度很低，接近于气体。扩散系数比气体小，约为气体的百分之一，而较液体大百倍。因此被分析物如农药的移动和分配，在超临界流体中均比在其液体溶剂中进行快。一般地，超临界流体的密度越大，其溶解能力就越大，反之亦然。也就是说在超临界流体中农药的溶解度，在恒温下则随压力P(P＞Pc)升高而增大。将温度和压力适宜变化时，可使农药等物质的溶解度在100-1000倍的范围内变化，与在液体中萃取情况显然不同，这一特性有利从物质中萃取某些易深解的成分。由于可以通过温度和压力的改变来调节其溶解力，这种溶解力的可控性亦就是增加了提取的选择性。虽然超临界流体的密度和溶解度与许多有机溶剂相当，但与液体相比粘度是低的，约低1-2个数量级，扩散系数是高的，约高1-2个数量级。正是由于其高流动性和扩散能力，可以渗透进入样本基质内部和间隙，增加与农药接触的机率和速度，加速溶解平衡使农药从基质中转移出来，可以提高萃取效率，还有助于所溶解的各成分之间的分离。所以超临界流体萃取是通过温度和压力的调节来控制其溶解能力的。其优点是萑取时间短，节省费用，萃取彻底，可进行热敏感样本及痕量样本的萃取。基本解决了溶剂对环境的影响。

3、测定技术

目前农药的活性成分都是典型的小分子化合物，分析技术多使用气相色谱(GLC)、液相色谱(HPLC)。本文主要介绍二维气相色谱技术。

二维色谱最早应用于纸色谱和薄层色谱，即使用不同溶剂进行双向展开，分离效率大大提高。二维色谱在气相色谱上是使用两根不同选择性的色谱柱，对样本同时并行测定，自出现毛细管色谱柱后，发展很快。通常可使用不同的二个仪器或使用一个具有双柱(不同极性)、双通道、双检测器的仪器、一次进样可同时获得二组信息。美国FDA，欧共体等都是先采用此法作定性的。选择艾氏剂、对硫磷、毒死蜱或莠去津等标准农药作为不同检测器的内标物，测定多种农药在不同极性柱上与内标农药的相对保留时间，作为初步定性的依据。此法比较适合中国实际。

三,对于农药污染防治的一些建议

农药的种类繁多, 施用范围广, 利用率低, 降解缓慢, 随着用量的不断加大, 对环境的污染正在日益加剧, 因此, 防止农药污染的漫延已迫在眉睫, 为保持一个良好的生态环境, 既达到防病灭虫之目的, 又能减轻对环境的污染, 应着重抓好如下几个方面的工作。

1. 控制污染源是防止污染的有效途径加强对农民安全、合理使用农药的知识培训, 提高广大人民群众对保护生态环境重要性的认识, 禁止滥用乱使农药, 严格限制农药使用范围。为消灭病虫害而必须使用农药时, 应严格遵守农药的使用方法、使用次数和使用量。对不按有关规定, 乱使滥用农药, 对环境造成危害者, 要依法惩处。

2. 加强环保的环境管理, 发挥其监督机能

尽管农药对环境、对人类造成危害, 但它在防治病虫害方面也有不可磨灭的功绩, 目前还不可能完全取消。因此, 对使用农药的管理已势在必行, 各有关部门应引起重视。作为环保部门, 要发挥统一监督的管理职能, 制订一整套管理办法, 真正把农药污染控制在最低限。

(1) 加大对农药的基础性研究, 建立和完善农药使用的环境标准有关科研部门应进行农药使用的风险性评价, 运用农药环境毒理学的基础原理和方法, 根据农药使用后其降解、迁移与环境效应的关系, 进行某些农药对生态系统种群的有害浓度、对重要生物的致死剂量或半致死剂量的毒性效应等研究, 确定出这些农药在各类环境中的允许极限值。在此基础上, 建立各类农药的国家环境标准。目前, 在我国的环境标准中, 均未对农药的允许值作出明确的规定(六六六、DDT 除外, 这两种农药早已禁用) , 有必要制定一套适合于我国国情的防止农药污染的农药排放标准, 饮用水、地面水、渔业用水允许极限的标准。对农药污染产生法律约束力, 实行定量化管理, 使环保监督做到有法可依, 对造成环境危害的处罚做到有据可查。

(2) 加强对农药的监督监测为发挥环境管理的监督作用, 必须对农药污染进行有效的监测, 将农药监测纳入到日常的例行监测中。农药的毒性大, 但在水中的浓度却很低, 常用的化学方法已不能满足对其管理的要求, 因此, 要研究制定更先进的监测方法, 特别是超微量分析与超纯分析技术研究, 以及毒性分析技术的研究, 开发生产性能优良的监测仪器和化学试剂, 提高监测手段, 取得准确的监测数据, 从而有效地控制农药污水的排放。

3. 加快防病灭虫新方法的研究, 推广使用高效、低毒、无污染的新技术

(1) 大力研制高效、低毒、低残留的农药新品种,并尽快推广应用到农业生产中去。生物农药与常规农药相比, 不仅杀虫范围广, 效率高, 而且使用安全, 对人畜无毒害, 对环境无污染, 对作物无残留, 不杀伤益虫, 使害虫不产生抗药性, 并且有助于作物品质的提高, 促进作物早熟高产。利用我国丰富的中草药制成“绿色农药”, 对有害生物具有极高的防治效果, 能兼治各种作物的各种病害, 杀灭病菌毒, 促进值物生长, 且无残毒、无污染, 对人畜和其它有益生物高度安全。对必须使用的有毒农药, 推广应用前, 要进行生态毒理性评价, 预测对环境的影响, 提出正确使用的方法和预防对环境造成危害的措施。

(2) 大力推广无毒、无害的灭虫方法。我省定陶县推出的“灯光诱娥”新举措, 使棉虫蛾在产生第一代棉蛉虫之前被灯光诱杀, 减少了农药用量, 减轻了棉田污染。我市林业局在全市推广灰喜鹊灭虫法, 将培育的灰喜鹊放入山林, 用鹊灭虫, 以虫养鹊, 形成林业生态的良性循环。超声波灭虫、性引诱剂、雄性绝育技术等灭虫方法, 对防治病虫害、减轻农药对环境的污染也具有重要的作用。

(3) 发展抗害作物的研究, 利用生物工程技术培育出各种抗病虫害的作物新品种, 可大大减少农药的使用量。

总之, 要充分认识农药污染所造成的危害, 采取各种各样的措施, 降低农药污染, 既达到防治病虫害、提高农产品产量的目的, 又要保护好环境, 使我们人类免遭其害。

随着人们生活水平的提高，食品安全问题越来越受到人们的关注。世界上许多国家都规定了农药 在食品中的最高残留限量 ，因此，农药残留分析检测成为控制农药残留，保证人类健康和避免国际之间有关农产品贸易争端的基础- 2 J 。

现代农药残留分析方法通常包括样品前处理和测定两部分- 3 J 3。经典的农药残留分析步骤通常是：

水溶性溶剂提取一非水溶性溶剂再分配一固相吸附柱净化一气相或液相色谱仪检测- 1 ． 4 J 。前处理过程中的提取、净化、浓缩等预处理部分，决定着分析

的准确性和重现性。提取指使用适当溶剂将待测物连同样品基质从固态样品中转移至易于净化和分析的液态，净化指将待测物与提取液中的干扰物质分离- 2 ． 4 J 。现代农残分析中，有些方法提取、净化一步完成，提取净化的界限已十分模糊- 2 J 。

1 常用的农药残留分析样品前处理技术

1 ． 1 提取方法

1 ． 1 ． 1 浸渍、漂洗法 用提取液漂洗样品，或将

样品浸渍在提取液中。

1 ． 1 ． 2 消化法 加热使加入消化剂的样品消化，

收稿日期：2 0 0 6 — 1 2 — 0 7

[ 作者简介：谭道朝 ( 1 9 6 8一) ，男，河南西峡人，助理农艺师。 ]

再用溶剂将待测农药提取出。

1 ． 1 ． 3 振荡法 把提取剂加入盛有样品的容器中，

振荡数小时。

1 ． 1 ． 4 匀浆法 将样品放在匀浆杯中，加入提取

剂，快速匀浆几分钟。

1 ． 1 ． 5 索氏提取法 将样品放在索氏提取器套管

中，圆底烧瓶中加入提取剂，加热连续提取数小

时[ 7 l 。

1 ． 1 ． 6 超声波提取法 经粉碎或匀浆捣碎的样品

加入提取剂，在超声波仪中提取一定时间。

从样品中提取农药的效果，很大程度上取决于

农药的极性和样品基质的类型。因此，常用作提取

剂的有机溶剂有乙腈、丙酮、乙酸乙酯等。乙腈提

取法可用于大多数农药的提取，提取液通过添加氯

化钠，使乙腈和水分离，AO A C ( 国际官方分析家

协会)早期的方法及美国加州食品和农业部方法多

采用乙腈作溶剂。丙酮作为一种提取溶剂，具有毒

性低 ，易于纯化，挥发性好及价格低廉等优点，并

且既能萃取极性物质又能萃取非极性物质，许多国

家农药残留标准方法均采用丙酮作为主要溶剂，美

国食品药品管理局也将丙酮萃取法写入 1 9 8 7年的农药分析手册【 2 , 4 ] 。丙酮提取液用氯化钠或硫酸钠

饱和后，分配至二氯甲烷、乙烷或石油醚中，从而

可得到对不同化合物有利的分配特性和有机相的快

速分离。乙酸乙酯极性相对丙酮、乙腈要弱，因此

其对弱极性农药的提取回收率一般较好，并且其共

提物尤其是色素要显著少于丙酮，从而减少了净化

时的压力，在荷兰的国家方法中，乙酸乙酯作为主

要的提取溶剂。

1 ． 2 净化方法 ，

1 ． 2 ． 1 磺化法 样品提取液中的脂肪、腊质等干

扰物质与浓硫酸发生磺化反应，从而使农药与杂质

分离的净化方法。

1 ． 2 ． 2 冷冻法 用低温处理样品提取液，待脂肪、

腊质、蛋白质等杂质析出后，在低温条件下过滤掉

杂质。

1 ． 2 ． 3 凝结沉淀法 在净化液中加入凝结剂，使

溶液中的脂肪、腊质、蛋白质等杂质沉淀析出，再

经离心，达到净化目的。

1 ． 2 ． 4 液一液分配法 利用待测农药与干扰杂质

在两种互不相溶的溶剂中 ( 通常采用极性溶剂和非

极性溶剂配成溶剂对)溶解度的差异而达到分离目

的的净化方法。

1 ． 2 ． 5 吸附柱层析法 利用各组分在吸附剂上吸

附解吸附能力的差异而达到分离净化的目的。常用

的吸附剂有硅酸镁、硅胶、活性炭、硅藻土、三氧

化二铝等。

1 ． 2 ． 6 离子交换法 利用离子交换剂上的可交换

离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不

同，经过交换平衡达到分离 目的的一种柱色谱

法[ 8 l 。

1 ． 2 ． 7 薄层层析法 采用硅胶、氧化铝等吸附剂

铺成薄层，利用吸附剂表面对不同组分吸附能力的

差别达到分离的方法l 9 ] 9。

1 ． 3 浓缩方法

1 ． 3 ． 1 自然挥发法 将待浓缩的溶液置于室温下，

使溶剂 自然挥发。

1 ． 3 ． 2 吹气法 用干燥空气或氮气吹溶液液面，

并水浴加热使溶剂挥发的浓缩方法。

1 ． 3 ． 3 K· D浓缩器浓缩法 采用 K· D浓缩装置

进行减压蒸馏浓缩的方法。

1 ． 3 ． 4 真空旋转蒸发法 在减压、加温、旋转条

件下蒸馏浓缩的方法。

2 农药残留分析前处理新技术

在样品前处理过程中，提取和净化是核心部

分。A O AC和我国现有国家标准中，大多采用液一

液萃取法和索氏提取法。由于传统的方法使用了大

量有毒溶剂，污染环境和威胁操作人员的身体健

康，并且费时费力，已经逐步被其它一些新方法所

取代。

目前已经广泛应用或报道的新技术主要有：固

相萃取 ( S F I E) 、固相微萃取 ( S P ME) 、基质固相

分散萃取 ( MS P D E) 、凝胶渗透色谱 ( G P C) 、微

波辅助萃取 ( MA E) 、加速溶剂萃取 ( AS E) 、超

临界 流 体 萃 取 ( S F E) 、分 子 印记 合 成 受 体

( MI S R) 、免疫亲和色谱技术 ( I AC )等。

2 ． 1 固相萃取 ( S P E)

固相萃取技术是利用固体吸附剂对液体样品中

目标化合物与基质和干扰化合物吸附能力的差异，

来分离和富集目标化合物的方法。液体样品通过填

充吸附剂的萃取柱，目标化合物和干扰化合物保留

在柱上，首先选用适当溶剂洗脱吸附在吸附剂上的

干扰物，然后再用洗脱剂对 目标化合物进行洗脱，

收集目标化合物。固相萃取操作步骤一般包括柱预

处理、加样、洗脱干扰组分和回收待测组分 4部

分。S P E克服了传统的液一液萃取及一般柱层析的

缺点，具有节省时间、减少溶剂用量、操作安全、

回收率高、重现性好、减少杂质引入、便于自动化

等特点。

S P E主要用于液体样品中农药的提取，也可用

于预先提取到溶液中的固体样品。S P E技术已被广

泛应用于农药残留检测工作 中。1 9 7 8年美国 wa —

t e r s 公司首先将一次性商品柱投放市场[ 1 O J ，以后

每年以 1 0 ％的增长率扩大使用。柱子的常用填料

有硅酸镁、硅胶、C 】 8 、C 8 、硅藻土、氧化铝等。

随着新的聚合物的出现，S P E近几年获得了突飞猛

进的发展【 1 1 ] 。

2 ． 2 同相微萃取 ( s P ME )

S P ME是在固相萃取基础上发展起来的萃取分

离技术，其原理是利用待测物在涂层和样品之间平

衡分配，使待测组分扩散吸附到石英纤维表面的固

定相涂层，待吸附平衡后，再与气相色谱 ( G C)

或高效液相色谱 ( HP L C )联用以分离和测定待测

组分。S P 与 G C联用适用于分析挥发性有机

物，通过热解吸，使待测组分与萃取纤维分离。而 对难挥发的有机物可利用 S P ME与 HP L C联用技

术，通过溶剂的解析作用达到分离效果。萃取样品

时，可直接将石英纤维插在样品中或将石英纤维放

置在样品顶空中。提高萃取效率的方法可以通过改

变纤维表面固定液的种类、厚度，调节溶液的离子

强度、p H值及衍生化反应来实现。S P ME具有灵

敏度高、无溶剂、样品用量少而且简便快速等优

点。

一

般来说，不同种类的待分析物，要用不同类

型的吸附质涂层进行萃取，其选择的基本原则是

“ 相似相容原理” 。目前最常用的涂层是聚二甲基硅

氧烷 ( P D MS )和聚丙烯酸酯 ( P A)2 种。1 9 9 4年

S P ME技术 P D MS萃取头首次应用在有机磷农药

的分析中【 1 1 , 1 2 J ，此后 S P ME技术在农残分析中应

用日益增多。目前可供 S P ME使用的固定相涂层

种类不多，限制了他的应用，主要集中在水环境样

品，也有涉及土壤、生物及食品等基质，农药主要

集中于有机氯、有机磷和三嗪类农药。

2 ． 3 基质固相分散萃取技术 ( MS P D E)

MS P D E是 1 9 8 9年美国 L o u i s i a n a 州立大学的

B a r k e 教授首次提出并给与理论解释的一种 S P E技

术【 2 , 4 , 1 3 ] 。其基本操作是将试样直接与反相填料

( C l 4 或 C l 8 )研磨、混匀得到半干状态的混合物并

将其作为填料装柱，然后用不同的溶剂淋洗柱子，

将各种待测物洗脱下来。MS P D E浓缩了传统的样

品前处理中所需的样品匀化、组织细胞裂解、提

取、净化等过程，避免了样品均化、转溶、乳化、

浓缩等造成的待测物损失。经 MS P D E柱后的柱淋

洗液可直接通过f l o r i s i l 柱进一步净化，最后的流出

液可直接进行色谱分析。MS ) E适用于各种分子

结构和极性农药残留的提取净化，具有良好的通用

性和发展潜力，在蔬菜、水果的农药残留检测中得

到广泛应用。

2 ． 4 凝胶渗透色谱 ( GP C)

凝胶渗透色谱基于体积排除的分离机理，当样

品溶液加到多孔性凝胶固定相净化柱上，用溶剂淋

洗，分子量大的脂肪、色素、蛋白质等先被淋洗出

来，然后农药等小分子物质相继被淋洗出来。G P C

以不同孔径的凝胶装柱，目前使用较多的是 X AD

系列凝胶，不同配比的环己烷和乙酸乙酯作为洗脱

剂 。对富含油脂、色素、蛋白质等样品进行净

化时，可先考虑利用 GP C将大分子的杂质去掉，

再结合其它的净化方法进一步净化去掉小分子杂

质，以达到最终净化目的。与通常使用的柱层析区

别主要是柱层析是利用填充物、样品和淋洗剂之间

极性的差别而达到分离 目的，而 GP C柱填料和被

分离试样没有任何相互作用，完全靠化合物中各组

分分子大小不同而淋出顺序先后的不同而达到分离

目的。淋洗溶剂的极性对分离的影响并不起决定作

用 。

目前已应用于肉类、土壤、蔬菜、水果、谷物

中的有机氯、有机磷、拟除虫菊酯类农药。此方法

在国外应用已较普遍，我国也已开始应用。

2 ． 5 微波辅助萃取法 ( MA E)

MA E是利用微波能来提高萃取效率的一种新

技术。微波是指波长在 l mm至 l m之间，频率在

3 0 0 MH2 至 3 0 0 0 0 0 MH2 之间的电磁波，介于红外

线与无线电波之间。不同物质的介电常数、比热、

形态以及含水量不同，其吸收微波能的程度不同，

由此产生的热能及传递给周围环境的热能也不同，

在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的

某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，

从而使被萃取的物质从基体或体系中分离进入到介

电常数较小、微 波吸收能力较差 的萃取剂 中。

MAE基本不受目标物质极性大小的影响，具有选

择型好、应用范围广、萃取效率高、节省时间、污

染少、回收率高、设备简单等特点。

由于非极性溶剂介电常数小，对微波透明或部

分透明，无法进行萃取分离 ，因此在微波萃翠取

时，要求溶剂必须具有一定的极性，对待测组分有

较强的溶解能力，对后续测定的干扰较少。此外还

应考虑溶剂的沸点因素。常用的萃取剂有：甲醇、

乙醇、丙酮、乙酸、甲苯、二氯乙烷、乙腈等有机

溶剂，用苯、正己烷等非极性溶剂萃取时，必须加

入一定比例的极性有机溶剂。另外，萃取时还要考

虑萃取时间、微波的辐照功率、萃取温度、溶剂

p H值、介质物料中的水分等因素。1 9 8 6年【 1 5 , 1 6 ]

微波开始应用到有机分析中的样品预处理，目前已

应用到土壤样品、食品、饲料等分析中。

2 ． 6 加速溶剂萃取技术 ( S E)

AS E是在较高的温度 ( 5 0 ℃～2 0 0 ℃)和压力

( 1 0． 3 - -2 0 ． 6 a )下用溶剂对固体或半固体样品

进行萃取的样品前处理方法。利用升高的温度和压

力，增加物质溶解度和溶质扩散效率，提高萃取效

率。升高温度减弱了溶质与基体之间的相互作用

力，降低溶剂粘度，增加溶剂进入样品基体的扩散，减低溶剂和样品基体之间的表面张力，使被萃

取物与溶剂更好解触。增加压力有利于提高溶剂沸

点，使之能够在较大压力下保持液态，从而溶解更

多溶质。A S E提取效率和索氏提取相当，与其它

萃取技术比较具有缩短萃取时间、降低溶剂使用

量、回收率高、操作简便、萃取 自动化特点。

1 9 9 6年美国D i n e x公司推出了 AS E商品化装

置一加速溶剂萃取仪 7 l 。主要由溶剂瓶 ( 带有多

元溶剂 自动混和器) 、泵、气路系统、加温炉、不

锈钢萃取池和收集瓶组成。运行过程是将常用的有

机溶剂由泵注入已填样品的萃取池后，加温加压，

几分钟后，萃取液由载气吹入收集瓶中。A S E目

前已应用于土壤、蔬菜、水果、肉类、茶叶中的有

机氯、有机磷、拟除虫菊酯类农约及除草剂等，我

国A S E用于农残监测分析报道较少，但发展前景

看好。

2 ． 7 超临界流体萃取 ( S F E)

S F E是利用超临界流体在高于临界温度和临界

压力下高密度、低粘度、渗透力强等特点，从样品

中萃取目标物，当恢复到常压和常温时，溶解在流

体中的成分立即以溶于吸收液的液体状态与气态分

开。虽然用于超临界流体的溶剂有多种，但 c o2

无毒、安全、临界温度和压力低，对热敏性物质破

坏少，因此作为首选的萃取剂。由于 c o 2的极性

较低，适宜于非极性和极性小的物质提取，对极性

较大的物质萃取能力差，故在萃取极性较大的物质

时，可以加入适宜的夹带剂如甲醇、乙醇、水等以

提高其萃取能力。与传统的萃取方法相比，S F E具

有萃取时间短、提取效率高、避免使用大量有机溶

剂、前处理简单等优点。

S F E技术于 1 9 8 6 年由C a p r i e l 等应用于农药残

留分析[ 1 8 ] ，目前应用于植物样品、动物组织、果

实、土壤、水等样品中多种杀虫剂、杀菌剂和除草

剂的萃取。

2 ． 8 分子印迹合成受体技术 ( MI S R)

MI S R是将要分离的目标分子与功能单体产生

特定的相互作用，加入交联剂进行聚合制备得到固

体颗粒介质，通过物理或化学方法除去包埋在介质

中的目标分子，便得到对 目标分子空间结构和结合

位点具有 “ 记忆”或 “ 烙印”作用的分子印迹聚合

物 ( MI P ) 。利用分子印迹聚合物对模板分子的空

间结构和多个非共价键作用点的记忆功能来选择性

吸附印迹分子，从而达到分离目的。

制备亲和性和选择性好的分子印迹聚合物时，

一

般要求模板分子为既能参加聚合反应，又易于在

反应后除去，且分子中含有强极性基团的化合物，

能与功能单体形成作用力较强的氢键，如糖类、氨

基酸类、核苷酸类、生物碱、胆固醇等。常用的功

能单体有如甲基丙稀酸、二氟甲基丙稀酸等羧酸

类，4 一乙烯基毗啶、2 一乙烯基吡啶、乙烯基咪唑

等杂环弱碱类 ． 常用的交联剂有二乙烯基苯、乙二

醇二甲基丙烯酸酯，可使 MI P交联度达到 7 0 ％～

9 0 ％，从而使生成的 MI P具有一定的硬度和形成

稳定的结合位点。所用溶剂不但对印迹分子等应具

有较高的溶解性，最好还能够促进印迹分子与功能

分子间的相互作用，如氯仿、甲苯等有机溶剂。除

去模板分子可采用乙腈、水、甲醇、乙醇、甲醇 一

乙酸、乙腈 一乙酸等高极性溶剂反复洗涤 。

由于需要合成被印迹分子衍生物，使该项技术

受到限制，因为有些化合物的分子无法进行衍生

化。1 9 9 7年 L u n d大学成立了国际性的分子印迹学

会。1 9 9 9年 L a n z a F．s e l l e r a g r e n B．和 J a k e u c h i

T．等分别报道了利用分子印迹技术来制备对三嗪

类除草剂有特异性的印迹分子聚合物【 1 1 ] ，目前分

子印迹技术的研究还处在探索阶段。

2 ． 9 免疫亲和色谱技术 ( I A C )

I AC技术原理是一种利用抗原抗体特异性可逆

结合特性的 S P E技术 ，根据抗原抗体的特异性亲

合作用，从复杂的待测样品中捕获目标化合物。其

原理是将抗体与惰性微珠 ( 珠状琼脂糖、键合相硅

胶)偶联制成固定相，然后装柱，将含抗原的溶液

过免疫亲和柱，抗原与固定了的抗体结合，而非目

标化合物则沿柱流下，最后用洗脱缓冲液洗脱抗

原，从而得到纯化的抗原。溴化氰活化的琼脂糖是

最经典的亲和柱的柱材。I AC技术具有显著优点：

对待测物的高效、提高样品纯化率、高灵敏度、高

选择性保留能力，特别适用复杂样品极稀组分的净

化与富集。

I AC理论基础早在 2 0世纪 6 0年代已建立 ，

1 9 8 7年 Va n d e Wa t e r 等首次应用 I A C技术净化了

猪肉中的氯霉素，之后于 1 9 8 9年又在此技术基础

上测定了蛋、牛奶中的氯霉素。现在已成为医药、

兽药、食品检测中应用的一种重要前处理方法。现

在市场已有克仑特罗、黄曲霉毒素等多种免疫亲和

柱出售，使用效果非常好 。

1.称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

4.压实。沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

7.检测。要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

8.送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。

硅胶柱层析原理

硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

文献报道是用乙腈和乙酸乙酯

我看乙腈有毒，而且我的东东同样也可以在乙醇中溶，乙醇的沸点也和乙腈、乙酸乙酯差不多

所以就想试一下houyouxiao(站内联系TA)原则是可以，

要看你的物质在溶液中的物性

建你少量试一试

乙腈有毒 做好防护应没有什么问题呀sunguangxiang1(站内联系TA)我认为是可以的jcm76(站内联系TA)当然可以，少量的乙醇可以增大溶剂的极性，至于配比，那要在具体操作时看重结晶的效果如何。xttanyue(站内联系TA)我天天用乙睛呵呵，没事，按照文献比较好，不过可以自己试试溶剂也好zhaoweijinghe(站内联系TA)可以用乙醇－四氢呋喃混合溶剂重结晶，我作过溴盐，收率大，晶粒大。纯度极高。不防少量试试。不过，乙睛并没有想像的那么可怕，尽管用就是，四氢呋喃更贵。xiaoda1984(站内联系TA)Originally posted by zhaoweijinghe at 2007-3-13 04:22 PM:

如果可以的话

如题谢谢zizaitian(站内联系TA)一般不这样用吧，乙醇和乙酸乙酯的极性相差较大，这样重结晶出来的东西一般纯度不高！zhwj(站内联系TA)我有几个化合物是Mannich-type类型反应的产物，试了好多常见的溶剂，要么是不溶，要么就是成凝胶状，用这个试了还是不行，真不知道怎么办才好。不知哪位仁兄能帮小弟解决此问题。:oxiaosongnan121(站内联系TA)我来发个言xjzeng(站内联系TA)就是配比的问题吧？就该是可以的jdf008(站内联系TA)没什么问题的,只要你的物质在乙醇易溶,而乙酸乙酯中极微溶解,就完全有理由去试一下的,利用极性的差异得到产物的结晶析出的faunhelf(站内联系TA)做有机啥没毒，还是按照文献做最好，要不浪费时间啊。有机试剂一般都是有毒的，自己做好防备工作就好了。不要怕这个怕那个，最重要要知道那些试剂比较毒，事先做好准备。

可以猜测是苯酚氧化之后形成的苯醌。

原因是97.5%纯度的乙醇是用苯作共沸物制备的，时间长了往往会有微量苯酚形成，强碱作用下变色很快。

还有可能就是本来就有少量酚酞之类的东西。

白色固体有氢氧化钠，可能有乙醇钠，不溶于水说明试剂有别的杂质，也有可能是碳酸钠在碱浓度较高时不溶。

凝胶的话，由于红色液体中有碱，发生水解形成乙酸钠，乙酸钠在饱和氢氧化钠溶液中沉淀析出了。

我只能提出猜想，希望你自己再设计方法检验了。

向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析。

把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定比例放在皂化锅内搅拌加热，反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物。往锅内加入食盐颗粒，搅拌、静置，使高级脂肪酸钠与甘油、水分离，浮在液面。（该反应用以制肥皂）凝胶又称冻胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体（在干凝胶中也可以是气体），这样一种特殊的分散体系称作凝胶。没有流动性。内部常含有大量液体。例如血凝胶、琼脂的含水量都可达99%以上。可分为弹性凝胶和脆性凝胶。弹性凝胶失去分散介质后，体积显著缩小，而当重新吸收分散介质时，体积又重新膨胀，例如明胶等。脆性凝胶失去或重新吸收分散介质时，形状和体积都不改变，例如硅胶等。由溶液或溶胶形成凝胶的过程称为胶凝作用

先根据TLC方法筛选好洗脱剂，使两相邻物质Rf值之差最大化 将柱子必须装平整、均匀 考虑有限柱填料的吸附量 可考虑用剃度法分开并洗脱 柱层析分离的实验方法和技巧1B= vrGq

常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 应该是粗长的最好。柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。 En8-Hc#NC

现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。 适用于对氧，水敏感，易分解的产品，可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，毕竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。也是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。至于是加压、常压、减压，随需而定。因为是schlenk操作，所以点板是个问题，如果样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。如果样品无色，只好准备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。像我以前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集到。

无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。哪位做过可以提出来大家参详参详。 湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的吸附饱和，而样品本身又是比较好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，如果不能重结晶，那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。

有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1：1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）。 当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中有写用正己烷的，太贵了，除非特别需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因为极性很小，有时还是非它不可。乙醚也可以用，但是就是容易睡觉，注意保持清醒别让溶剂流干了，那样柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。甲醇据说能溶解部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。其他的溶剂用的相对较少，要依个人的不同需要选择了。

由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。

另外溶剂在过柱子后最好也回收使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，缺点是要消耗一定的人工。这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越来越大了。在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。 1、 装柱

柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废！

2、 加样

用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（2～4cm就够了），再加压，这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行。

3、 淋洗剂的选择

感觉上要使所需点在rf0.2～0.3左右的比较好。要按照RF的比值来判断是否效果好，而不是爬得高就好。

4、 样品的收集

用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话，就不容易流出。这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。另外，收集的试管大小要以样品量而定，特别是小量样品，如果用大试管，可能一根就收到了三个样品，wuwu。如果都用小试管那工作量又太大。

5、最后的处理

柱分后的产品，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会累积到产品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶剂洗涤一下，因为大部分的杂质是溶在溶剂里的，一洗基本就没了，必要时进行重结晶。

另外，再过柱的时候，有时会出现气泡，一是和使用的溶剂有关，如果是易挥发的溶剂，如乙醚、二氯甲烷等，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象，因此，在室温高的时候，可以选择沸点较高，挥发相对小的溶剂。还有，使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点应该相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚(60~90),而乙醚却要选择30－60的石油醚。二是：不论是用带砂板的还是塞棉花的，在装柱之前，都要将空气用加压的方法将空气排干，这样就可避免柱中有空气！