苯酚,乙醇,丙酮,乙醛,葡萄糖,氨基酸的鉴别

用氨基酸自动分析仪测定氨基酸时前处理为什么加苯酚3，4滴

测定样品中各种游离氨基酸含量，可以除去脂肪杂质后，直接上柱进行分析。

测定蛋白质的氨基酸组成时样品必须经酸水解，使蛋白质完全变成氨基酸后才上柱进行分析。 经过处理后的样品上柱进行分析。上柱的样品量根据所用自动分析仪的灵敏度来确定。一般为每种氨基酸0.1μmol 左右（水解样品干重为0.3mg 左右）。测定必须在pH5～5.5、100℃下进行，反应进行时间为10～15min，生成的紫色物质在570nm 波长下进行比色测定。而生成的黄色化合物在440nm 波长下进行比色测定。做一个氨基酸全分析一般只需1h 左右，同时可将几十个样品一起装入仪器，自动按序分析，最后自动计算给出精确的数据。仪器精确度在±1～3%。

通常有机溶剂的使蛋白质变性的原因主要是引起蛋白质脱去水化层以及降低介电常数而增加带电质点之间的相互作用,致使蛋白质颗粒容易聚集而沉淀.

蛋白质只有C末端剩下一个羧基,其他氨基酸都是以残基形式存在,一个羧基的酯化恐怕不是主要影响因素.况且很多球状蛋白质,C末端是包埋在分子内部的.

有两种氨基酸是含硫的氨基酸：半胱氨酸和蛋氨酸。蛋氨酸是人体必需氨基酸，必须从膳食中摄取以满足需要。

含羟基的氨基酸有：丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸，其中酪氨酸上的是苯酚基团。

氨基酸是生物学上重要的有机化合物，由氨基（-NH2）和羧基（-COOH）的官能团，以及连到每一个氨基酸的侧链组成。氨基酸是构成蛋白质的基本单位，赋予蛋白质特定的分子结构形态，使其分子具有生化活性。蛋白质是生物体重要的活性分子，包括催化新陈代谢的酶。

2’鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂.双缩脲试剂的成分是质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01 g／mL的硫酸铜溶液.在碱性溶液（NaOH）中,双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络

3’丙氨酸——茚三酮反应.氨基酸与茚三酮水合物在弱酸条件下共加热时,氨基酸被氧化脱氨、脱羧,而茚三酮水合物被还原,其还原物可与氨基酸加热分解产生的氨结合,再与另一分子茚三酮缩合成为蓝紫色化合物,称为罗曼紫（Ruhemann's purple）.

另外还有一个更简单的方法：

1912年法国化学家Maillard发现甘氨酸与葡萄糖混合加热时形成褐色的物质,这个反应叫美拉德反应机理 ,也就是说你可以用上面的方法先鉴定出苯酚,然后将葡萄糖溶液分别加入到另外两个试管中加热,形成褐色物质的为丙氨酸,反之为蛋白质。

所以有4种方法可以鉴别

即1鉴别出苯酚和蛋白质

2鉴别出苯酚和丙氨酸

3鉴别出丙氨酸和蛋白质

4上述的那个简单的方法

2.纸层析法（分配层析），根据不同物质在不同溶剂间的分配系数（某溶质与两种互不相溶的溶剂震荡混合，达到平衡时，该物质在两种溶剂中所溶解的一定的比例）或溶解度不同来达到分离的目的；本实验采用上行纸层析法，茚三酮作为显色剂。

3.表示氨基酸在滤纸上的移动速率：

由公式可知：Rf值越大，溶质分子移动速率越大；反之，移动速率越小。

影响Rf值的因素有二

4. 谷氨酸是酸性氨基酸，即亦为极性氨基酸，亲水性强，在水中溶解度更高；因具有脂肪族侧链，丙氨酸为非极性氨基酸，疏水性强，在苯酚中溶解度更高。