急求,如何沉淀蛋白质、除去脂肪?
取适量绞碎的样品(5g-20g),至于50ml烧杯中,加12.5ml
硼砂饱和液,搅拌均匀,再用300ml
70摄氏度的水将样品转移入500ml
容量瓶中,沸水浴加热15min
,然后冷却至室温,然后加入5ml
亚铁氰化钾溶液
,摇匀,再加5ml
乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水定容,摇匀,放置30min
,除去上层脂肪,下层液体用滤纸过滤后备用。
(弃去初滤液50ml)
不是络合反应而是盐析反应。 原因: 因为蛋白质是胶体,有如下性质: 物理性质:丁达尔现象,电泳现象 化学性质:盐析反应,变性反应 在蛋白质中加轻金属盐发生盐析反应,而络合反应只是盐与盐之间的反应。
蛋白质的变性因素在实验操作中选用乙酸锌试剂进行验证。
解释分析:本题是对蛋白质的检测方法、蛋白质变性的综合性考查,回忆蛋白质的功能、蛋白质的检测方法、蛋白质变性的因素和原理,然后分析选项进行解答。
蛋白质的变性因素在实验操作中选用乙酸锌试剂进行验证,蛋白质变性后理化性质发生改变,如溶解度降低而产生沉淀,因为有些原来在分子内部的疏水基团由于结构松散而暴露出来,分子的不对称性增加,因此粘度增加,扩散系数降低。
生物化学性质。
蛋白质变性后,分子结构松散,不能形成结晶,易被蛋白酶水解。蛋白质的变性作用主要是由于蛋白质分子内部的结构被破坏。天然蛋白质的空间结构是通过氢键等次级键维持的,而变性后次级键被破坏,蛋白质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序的松散的伸展状结构(但一级结构并未改变)。
所以,原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面,而亲水基团在表面的分布则相对减少,至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜,很容易引起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
以上内容参考:百度百科—蛋白质变性