过氧化氢浓度测定
过氧化氢浓度测定方法如下:
一、二甲酚橙(xylenol orange)法
原理:过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子,二甲酚橙(xylenol orange)高选择性的结合三价铁离子形成有色(紫色)产物,可用比色法在580nm处测定。从而实现对过氧化氢浓度的测定。
由于二甲酚橙(xylenol orange)作为一种金属离子络合指示剂,与三价铁离子的结合有很高的选择性,也就是该方法有很好的特异性。同时该反应需要在酸性条件下进行,可以消除很多物质的干扰。
二、硫酸钛比色法
原理:H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在415nm有特征吸收。
该方法原理简单易懂,但样本处理需要自备丙酮用来破碎细胞、匀浆组织和稀释液体样本。丙酮易挥发,而且易燃有毒,给操作带来一定困难,需要做好防护措施。
三、探针法
原理:在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,特异的 探针与过氧化氢反应,生成有色产物在570nm有最大光吸收,也可产生红色荧光(Ex/Em=535/587 nm)。比色法与荧光法灵敏度不同,需要配制不同的标准曲线。
该方法需要用到特异性的荧光探针,反应原理较前面2种复杂,但灵敏度很高,在荧光法中灵敏度可达40 nM。
四、过氧化物酶底物法
原理:用一种独特的过氧化物酶底物测定溶液和细胞提取物中的过氧化氢 ,在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,过氧化氢氧化无色的过氧化物酶底物,产生强烈的蓝色。在 650nm有特征吸收。
TiO. 分子量:63.88,黑黄色粉末.比重4.93.熔点1750℃.沸点大于3000℃.不溶于水,硝酸,溶于硫酸,溶于稀盐酸部分氧化成三价钛离子并产生氢气.化学性质不太稳定,由二氧化钛在碳电炉中加热,或用锌,镁,氢等还原剂还原制得.用于制钛酸酸盐半导体。
Ti被浓硫酸可以氧化产生(TiO)2+离子(标准的应该是Ti接O,O接Ti形成一种Ti和氧交替的长链,长度与酸度有关,所以应为[(TinOn)2n+];极易水解生成TiO2沉淀),然而(TiO)2+可以与H2O2配合(或者叫以前称络合)生成[TiO(H2O2)]2+这样一个显黄色的物质,其中在钛和过氧化氢的测试中这个原理被用于检测它们两种物质。
因此显然不存在配比问题,另外你可以试验,如果你加入水将溶液稀释,那么黄色将退去,因为[TiO(H2O2)]2+同一样(TiO)2+容易水解,也是因为容易水解所以在上述所说的测试中一般用氢氟酸而不是浓硫酸,用浓硫酸就比较麻烦了,这里氢氟酸的F-有可以与水中OH-相竞争的能力抑制了OH-与(TiO)2+或[TiO(H2O2)]2+的结合,因而难以水解。
楼主所说第二次的情况我估计是你过氧化氢放多了,将浓硫酸稀释了,因为水解的关系无法生成[TiO(H2O2)]2+了,如果用氢氟酸和TiO2做实验那么,只要加入1滴过氧化氢即可明显看见现象了。
要是还有啥没说的清的你再问吧~~~
上面的Ti(OH)4也可以是TiO(OH)2,溶液中主要是TiO(OH)2。是白色的;生成[TiO(H2O2)]^2+ (桔黄色), 常用于比色法来测定钛的含量
过氧化氢含量的测定
一、目的要求
学习果蔬组织中过氧化氢含量的测定原理和方法。
二、基本原理
果蔬体内积累的H2O2可以直接或间接地导致细胞膜脂质过氧化损害,加速细胞的衰老和解体。但是,在受到病原菌侵染或受到不良环境胁迫时,果蔬体内迅速积累的H2O2参与果蔬抗病性和抗逆性启动和诱导过程。因此,了解果蔬组织中H2O2的代谢具有十分重要的意义。
H2O2与四氯化钛(或硫酸钛)反应生成的过氧化物-钛复合物黄色沉淀,溶解于H2SO4后,可在波长412 nm处比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。
三、材料、仪器及试剂
(一)材料
苹果、番茄、芒果、桃等。
(二)仪器及用具
研钵、移液器、容量瓶(100 mL)、离心管、试管、高速冷冻离心机、分光光度计、通风橱。
(三)试剂
1.-20℃预冷丙酮
2.浓氨水
3.2 mol/L硫酸取10 mL浓硫酸,稀释到90 mL。
4.10%(v/v)四氯化钛-盐酸溶液在通风厨中,将10 mL四氯化钛,缓慢加入到90 mL盐酸中。轻轻地在操作台上平摇,使四氯化钛充分溶解。将试剂转入到棕色瓶中,密闭、4℃保存。
5.100 μmol/L H2O2-丙酮试剂取57 μL 30%分析纯H2O2,溶于重蒸水中,稀释,定容至100 mL,得10 mmol/L H2O2溶液。取1 mL该溶液,溶于丙酮中,并用丙酮定容至100 mL,即为100 μmol/L H2O2-丙酮试剂。
TiO2+H2SO4==TiOSO4+H2O
Ti4+ + H2O==TiO2+ + 2H+
实际上不能从溶液中析出Ti(SO4)2,而是析出TiOSO4•H2O的白色粉末。这时因为
四价钛离子的电荷半径比值大,容易与水反应,经水解而得到TiO2+离子。