甲苯胺蓝染色液染色方法
甲苯胺蓝染色液染色方法
甲苯胺蓝 是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类,是碱性染料, 甲苯胺蓝 中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。
肥大细胞的染色:
(1)组织脱蜡至水。
(2)蒸馏水浸洗2-3次。
(3) 甲苯胺蓝染液 染20-30min。
(4)稍水洗,洗去多余染色液。
(5)95%酒精分色,在镜下控制分色效果。
(6) 用100%酒精脱水。
(7) 二甲苯 透明, 中性树胶 封片。
肥大细胞染色结果:肥大细胞颗粒呈红紫色,胞核呈蓝色。
细胞涂片染色 :
(1)细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。
(2)滴加1~2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。
(3)后将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。
(4)无需干燥,直接镜检。
细胞涂片染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
原位杂交染色 :
(1)用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:10。
(2) 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
(3) 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
(4) 按需求进行压片固定。
神经元细胞的染色:
(1)将载有细胞的玻片取出放入4%多聚甲醛中固定1h左右;
(2)到时间后取出用PBS冲洗1~2次即可;
(3)然后加入提前预热的1%甲苯胺蓝溶液,在50度左右的气浴或水浴中染色20~30min;
(4)用梯度酒精已次脱水,分别为75%、90%、100%,也可自定梯度;
(5)在镜下控制分色效果,这一步不太好掌握;
神经元细胞染色结果:可见尼氏小体深蓝色颗粒,细胞核呈淡蓝色,背景基本无色。
北京索莱宝科技有限公司 自产产品 1%甲苯胺蓝染色液 ,货号为 G1220 ,主要用于生化实验中肥大细胞的检测。
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0.05%甲苯胺蓝配置,使用甲苯胺蓝配置为1%浓度水溶液,具体使用浓度可自行稀释。温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响,若快速染色,当室温较低时,可以适当加温。)甲苯胺蓝染液染20-30min。稍水洗,洗去多余染色液。95%酒精分色,在镜下控制分色效果。 用100%酒精脱水。苯透明,中性树胶封片
能。
二甲苯透明,中性树胶封固。 结果:在胃粘膜腺上皮表面,腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌(HP),有的呈弯曲杆状或逗点状,HP可散在出现,也可成团聚集出现,这要根据不同病例而异。
试剂的配制:称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃冰箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为最佳,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。
间甲苯胺为无色液体
熔点-50%;沸点203℃、82.3℃(1.333kPa);相对密度0.9889;折射率1.5681。对甲苯胺为白色片状结晶;熔点44.5℃;沸点200%(常压)、79.6℃(1.333kPa);相对密度0.9619;折射率1.5534。
三种异构均可溶于乙醇、乙醚及稀酸液中,微溶于水。由相应的硝基甲苯还原制得。主要用作合成各种染料和药物的原料。在分析化学中除作溶剂外也用作矿物折射指数的浸渍液。
作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色;二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的,产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。
作为染料物质,除了有发色基团外,还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团。如染料化合物中往往由硝基(-NO₂)、偶氮基(-N=N-)、乙烯基等形成了发色基团,而由-OH、-SO₃H、-COOH等酸性基团和-NH₂、-NHCH₃、-N(CH₃)₂等碱性基团构成了助色基团。
它们的存在使染料物质离子化,极性增强,促进染料与组织间发生作用,产生染色效果。我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染色剂。
扩展资料:
1、染色体变异:光学显微镜下可见染色体结构的变异或者染色体数目变异。
2、染色体结构的变异:指细胞内一个或几个染色体发生片段的缺失(染色体的某一片段消失)、增添(染色体增加了某一片段)、颠倒(染色体的某一片段颠倒了180。)或易位(染色体的某一片段移接到另一条非同源染色体上)等改变。
3、染色体数目的变异:指细胞内染色体数目增添或缺失的改变。
4、染色体组:一般的,生殖细胞中形态、大小不相同的一组染色体,就叫做一个染色体组。细胞内形态相同的染色体有几组就说明有几个染色体组。
5、二倍体:凡是体细胞中含有两个染色体组的个体,就叫二倍体。如.人,果蝇,玉米.绝大部分的动物和高等植物都是二倍体。
6、多倍体:凡是体细胞中含有三个以上染色体组的个体,就叫~。如:马铃薯含四个染色体组叫四倍体,普通小麦含六个染色体组叫六倍体(普通小麦体细胞6n,42条染色体,一个染色体组3n,21条染色体。)。
7、一倍体:凡是体细胞中含有一个染色体组的个体,就叫一倍体。
8、单倍体:是指体细胞含有本物种配子染色体数目的个体。
9、花药离体培养法:具有不同优点的品种杂交,取F1的花药用组织培养的方法进行离体培养,形成单倍体植株,用秋水仙素使单倍体染色体加倍,选取符合要求的个体作种。
参考资料来源:百度百科-龙胆紫溶液