不锈钢配位剂配方

DAB染色法也叫二氨基联苯胺法，用于检测细胞中过氧化物酶的活性部位。

原理：细胞颗粒中的过氧化物酶，能将过氧化氢中的氧释放出来，氧化二氨基联苯胺，形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。

使用前先用蒸馏水将B显色液（1:25）稀释为工作液，然后按比例（1:25）加入A显色液，混匀后立即使用。

显色时间1-30分钟，显色时间过长可引起本底增高，故应密切观察显色过程（一般3-10分钟最理想），并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。

扩展资料：

DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用；显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用。

DAB在常温下不稳定，每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱，以免因DAB分解影响实验，或因渗漏造成实验环境污染；DAB有潜在致突变作用，操作时应注意穿戴好防护用具。

不锈钢管在酸洗过程中有一定量的氧原子吸附在基体内，易造成氢脆现象。对商强度不锈钢管要进行除氢处理。除氢方法如下。碱性溶液阳极电解法。在氢氧化钠50～6Og/L，碳酸钠10～20g/L，磷酸三钠50～60g/L，硅酸钠10～20g/L，温度80℃的溶液中，在阳极上，电流密度10A/dm，时间lOmin，可冇效去,除吸附在表面上的氢。加热法。即将不锈钢管零件放在烘箱内在200℃温度时烘1～2小时后去除氢。

不锈钢管酸洗配方有很多种，有的配方适用于清除不锈钢管经各种机械加工处理或经过--定时间使用后表面形成的一层薄而致密的氧化物膜。膜的主要成分含有氧化铬、氧化镍和氧化铁铬。膜的存在影响外观和后序加工。配方的特点是不含有氟化物，污染环境少，危害操作人员的健康少，属常温清洗技术，能使表面达到高度清洁和平整，延长使用寿命的作用。配方采用盐酸和硫酸两种酸合用，比使用单一的盐酸或硫酸效果好。单一酸对不锈钢管表面氧化皮难以完全除去，不能达到光亮的目的。加入六次甲基四胺 (即乌洛托平）作酸洗缓冲剂，以抑制对不锈钢管的过腐蚀。加入双氧水是为了氧化不锈钢管表面氧化膜，以利于溶解于酸中而加以除去。乙醇作为稳定剂抑制双氧水的分解。在酸洗过程中部分乙醇氧化为乙酸，乙酸增强了稳定剂的作用和酸洗能力。操作过程中严格控制温度，温度过高会造成盐酸挥发、双氧水分解和不锈钢管过腐蚀。配方的溶液配制方法是先加入水，再加盐酸，然后在搅拌下加入硫酸，如发热升温，应待冷却后再加硫酸，冷却后加人乙醇、六次甲基四胺，最后在使用前加双氧水。

配方溶液适用于有较厚表面氧化层，如热压、焊接件的光亮浸蚀。具有高效、可靠、简便的特点.被浸蚀表面经处理后色泽均匀洁白，无过腐蚀现象。光沽度比浸蚀前可提高2级。溶液的工作寿命长，配方的工艺是理想的粗糙件光亮浸蚀工艺。溶液也可以作为工件在抛光前的预抛溶液。

配方溶液适用于不锈钢管机加工件的光亮浸蚀处理，属抛光型溶液。溶液中的三乙醇胺，聚乙二醇和苯并咪唑与磷酸起缓蚀和光亮作用。硝酸作为浸蚀剂，溶液的浸蚀强度与温度高低有关。如果温度和浸蚀剂浓度较高时，则处理的时间可酌情缩短。如果光亮度不足，可提高表面活性剂含量，或添加甘油3～10g/L。

配方溶液适用于铸造不锈钢管的氧化皮酸洗铸造不锈钢管表面致密的氧化皮含有氧化硅、氧化铬、氧化镍和氧化铁，极难溶于酸，氧氟酸溶解氧化硅，硝酸和盐酸溶解铁、镍、铬的氧化物， 酸洗效果较彻底，不产生灰渣。氧化皮较厚的可延长酸洗吋间。由于硝酸和氢氟酸有刺激性气味和腐蚀性，酸洗时必须穿戴好防护用具，并要有抽风装置，

配方溶液适用于经过热处理的不锈钢管如lCrl8Ni9Ti、Crl7Ni2等，不锈钢管表面附有一层致密难溶的氧化皮，须按下列工艺流程进行。化学除油→热水洗→疏松氧化皮（氢氧化钠600～660g/L，亚硝酸钠200～220g/L，温度130～140℃，时间不少于4小时)→热水洗→冷水洗→预浸蚀[浓盐酸，六次甲基四胺1% (wt),室温时间20～30分钟]→冷水洗→酸洗→冷水洗→除挂灰（氢氧化钠500～600g/L髙锰酸钾30～40g/L，温度90～lOO℃,时间10～30分钟)→冷水洗→光泽处理（用预浸液，时间2～3分钟，至褐色膜除尽）→冷水洗。

配方溶液适用于除去不锈钢管弹性元件（不锈钢管牌号有3J1、 3J2、3J3、3J21、3J24, 3J53等）经过热处理后形成的致密的氧化膜。 氧化膜呈棕黑色或彩色，既影响外观、弹性，又不能焊接。为了防止强酸的腐蚀造成过腐蚀、变薄或烂毛，采用碱性混合液处理，工件表面达到清洁，弹性不变。其工艺流程为：碱性除油→水洗→盐酸浸蚀 (50%盐酸，0.5分钟)→冷水洗→去氧化膜（时间至表面显示出不锈钢管本色）→水洗→钝化（按需要进行，以便于保存，防止氧化变色，配方：铬酐250～350g/L，硫酸20～40mL/L,室温，时间1～2分钟→水洗→烘干（50～70℃, 15～20分钟

两性表面活性剂的品种主要有羧酸盐型(包括氨基酸型和甜菜碱型)两性表面活性剂,此外还有硫酸酯型,磺酸盐型以及磷酸酯盐型等两性表面活性剂.护发素配方(重量%):咪唑啉型两性表面活性剂5.5,十八烷基季铵氯化物1.0,硬脂酸甘油酯与聚乙二醇(100)硬脂酸酯2.0,聚氧乙烯十六烷基醚-20和十六一十八醇混合物1.0,水解动物蛋白3.0,十八醇0.5,二甲基硅铜0.5,水86.5.制法:将表面活性剂溶解于水中,并加热至60%,其余部分加热至75℃在搅拌下把表面活性剂加入到其余组份中.液体香皂配方(重量%):咪唑啉活性剂21.5,α-烯基磺酸盐(40%) 25.0,硬脂酸单甘油酯1.0,水,颜料,防腐剂香料50.0.制法:将表面活性剂溶解于水中,加热至60℃,其它组分加热至75℃,在搅拌下进行混合,并继续搅拌至均匀为止,在40℃时用柠檬酸调整pH值至7.0.通用清洁剂配方(重量%):辛基咪唑啉衍生物钠盐(50%)4.0,偏硅酸钠·五水合物4.0,碳酸钠(无水的)2.0,壬基苯基聚乙二醇醚4.0,丁基卡必醇1.0,水85.0.碗碟液体清洗剂配方(重量%):椰子基咪唑啉羧衍生物钠盐20.0~40.0,十二烷基硫酸钠(28%)15.0,月桂(基)二乙醇胺(高活性的)5.0,水60.0~40.0.干洗洗涤剂配方(重量%):N-[N-(羧乙基)-N-(羟乙基)氨基乙基]十二烷酰胺钠盐20,聚(氧代丙烯)油基醚磷酸钠盐20,硫代琥珀酸二油基钙盐20,聚(氧代乙烯)壬基苯基醚40.用1%以上的这种两性表面活性剂的全氯乙烯洗涤毛织物,可使织物具有极好的抗静电性和柔软感,无任何残留气味.轻型液体洗衣剂配方(重量%):椰子油咪唑啉单羧衍生物钠盐15.0,三聚磷酸钠3.0,磷酸三钠3.0,季胺盐杀菌剂(50%活性)2.0,有机多价鳌合剂(30%)1.0,水76.0.搪瓷表面清洗剂本剂用于清洗搪瓷及其他硬质表面(诸如浴室管线及卫生间设备),它具有自清洗,除锈,上光和抑制腐蚀的效能.配方(重量%):异丙醇20,硫酸十八烷基酯钠盐0.5,醇聚氧乙烯醚12.0,磷酸单及双C10~16烷基酯钾盐或钠盐(含活性组分32~34%)4.0,乙二胺四乙酸四钠盐0.5,草酸二铵0.5,香料0.2,水62.3.加酶液体洗涤剂本剂是一种稳定,透明的单相加酶洗涤剂,在43℃下,经6天后保持酶活性的73%.配方(重量%): C12~15AE7 5.5,椰油酰胺甜菜碱21,FWA 0.2,EDTA- Na 15,1%染料溶液1,香料0.3,碱性蛋白酶1,甘油5,硼砂2,水49.BS-12两性表面活性剂本剂系甜菜碱类化合物,具有阳离子活性剂和阴离子活性剂两者的特点.这种表面活性剂适用于制造无刺激的,对头发调理性的香波,婴幼儿香波同时还可作肥皂,香皂的钙皂分散剂丝毛专用洗衣粉的柔软剂等.1. 香波配方(重量%):月桂醚硫酸钠40.0,辛基酚聚氧丙烯聚氧乙烯醚12.0,烷基甜菜碱(BS-12)4.0,蒸馏水44.0,香料,防腐剂适量.2. 泡沫浴用乳液配方(重量%):烷基甜菜碱(BS-12) 50,辛基酚聚氧丙烯聚氧乙烯醚20,椰子油咪唑啉25,甘油1,可溶性羊毛脂4,香料,防腐剂等适量.3. 胶冻状洗发香波配方(重量%):硫酸化脂肪醇单乙醇胺盐40,烷基甜菜碱(BS-12) 10,香料及染料适量,防腐剂适量,水余量.BS-12两性表面活性剂还可作耐硬水洗涤剂,杀菌剂,纤维柔软剂,染色助剂,抗静电剂,防蚀剂等.

深圳金腾龙贸易有限公司2005年成立主营产品：

助焊有机酸活性剂：丁二酸（琥珀酸），己二酸，丁二酸酐（琥珀酸酐），NA酸酐，二溴丁二酸，癸二酸，戊二酸，衣康酸，水杨酸（升华级），十二酸，十四酸，十六酸（棕榈酸）， 十八酸， 硬脂酸，软脂酸，酒石酸，DL-苹果酸，山梨酸，氟硼酸，邻苯二甲酸，苯甲酸， 对叔丁基苯甲酸，氢溴酸，无氯乙醇酸，羟基乙酸，顺丁烯二酸酐（顺酐），顺丁烯二酸，乳酸，丙二酸，壬二酸，辛二酸，十二二酸，邻苯二甲酸，二羟甲基丙酸，聚合酸、油酸、乳酸、酒石酸、柠檬酸、谷氨酸、甘氨酸。

胺酸盐卤素类：环己胺氢溴酸盐，二乙胺氢溴酸盐，环己胺盐酸盐，乙二胺盐酸盐，二乙胺盐酸盐，盐酸二乙胺基乙醇，二苯胍氢溴酸盐，二苯胍盐酸盐，2-溴乙胺氢溴酸盐，三乙醇胺，环己胺，一乙醇胺，二乙醇胺，丁二酸酰胺，水杨酸酰胺，二苯胍，盐酸胍，三异丙醇胺。

表面活性剂：无卤活性剂ST-200、无卤活性剂ST-400、GE-6650、氟碳表面活性剂FC-4430（3M），溴化肼，十六烷基三甲基溴化铵，2，3-二溴1，4-丁烯二醇，OP-10，TX-10，NP-9，NP-15，NP-10，发泡剂，TX-10磷酸酯， 聚乙二醇400~ 6000，平平加O，氢化蓖麻油，氟表面活性剂FSN-100(美国杜邦) 、氟碳表面活性剂FC-4432（3M）、 触变剂乙二撑双硬脂酸酰胺（EBS）、油酸酰胺、芥酸酰胺、硬脂酸酰胺、二溴乙基苯、油醇聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、辛基酚聚氧乙烯醚、松香胺聚氧乙烯醚，触变剂6650（日本）、触变剂6500（日本）、氟表面活性剂FTERGENT 300（日本）、氟表面活性剂F-200、松香表面活性剂FR-502、锡膏表面活性剂GE-511、氢化蓖麻油表面活性剂、低泡表面活性剂、Surfnol 104E，Surfnol 465， CF-32，阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、季铵盐表面活性剂。

助焊溶剂类：二乙二醇单己醚（日本），二乙二醇辛醚（日本），2-乙基-1，3-己二醇（日本），二丙二醇甲醚（利安德），二乙二醇丁醚（美国），2-甲基-2,4-戊二醇， 三乙二醇丁醚，三丙二醇丁醚，三丙二醇甲醚、四氢糠醇，三乙二醇乙醚，专用焊锡膏溶剂，乙二醇单甲醚，丙二醇单甲醚，二乙二醇单乙醚，乙二醇单丁醚，二乙二醇二丁醚，二乙二醇乙醚，乙二醇苯醚，丙二醇苯醚，乙酸丁酯，乙酸乙酯，苯甲醇，硝基甲烷，硝基乙烷，一缩二乙二醇（二甘醇），二缩三乙二醇（三甘醇），四甘醇，丙三醇（甘油），丙二醇，D40 2-乙基-2.6戊二醇 助焊剂遮味剂，洗板水遮味剂、耐高温柠檬香精、桔子香精、高沸点溶剂二价酸酯DBE、己二酸二辛酯、己二酸二甲酯、癸二酸二辛酯。

抗氧剂类：苯骈三氮唑，甲基苯并三氮唑，抗氧化油，防氧化油，锡抗氧化粉，锡渣还原粉，抗氧剂BHT，抗氧剂245（瑞士汽巴）、抗氧剂1010（瑞士汽巴），铜缓蚀光亮剂、咪唑、甲基咪唑、2-苯基咪唑、咪唑啉。

助焊剂专用松香类：专业代理美国EASTMAN松香：全氢化松香FORAL AX-E(伊士曼)，Poly-pale松香，氢化松香醇（ABITOL-E），ESTMAN 12醇酯、DYMEREX聚合松香；日本松香：松香KE-604(日本)，KR-610松香(日本) ，KE-311，KE-100，助焊剂专用特级浅色松香，高加水白松香，焊锡膏（无铅焊锡）专用松香125#，无铅松香625，无铅松香600，冰白松香，精制氢化松香RHR-101，二聚松香145，TSR685，TSR610，DMER-95，DMER-145，松香树脂，168松香、岐化松香、亚克力松香、聚合松香115、聚合松香145、松香胺、无色松香。

焊锡膏配套材料：白色锡膏瓶、绿色锡膏瓶、蓝色锡膏瓶、锡膏泡沫箱、锡膏用冰袋、BGA锡球用焊膏、无铅无卤焊锡膏、锡线用胶芯、锡膏包装箱、锡线架、高效锡线拉丝油、锡线锡芯活性剂。

电池材料类：N-甲基吡咯烷酮（电子级99.9% 普通级99.8%）。

其他类：焊锡膏专用合金焊锡粉、氯化锌（ZnCl2）、氯化铵、松节油、松油醇 、蓖麻油、松节油、对苯二酚，1，4-丁二醇、凡士林、各种香精、柠檬酸、无水柠檬酸、各类锡膏瓶及锡膏泡沫盒、白色锡膏瓶、绿色锡膏瓶、10kg锡膏泡沫箱。

另平湖华南城公司专业代理：瑞士汽巴抗氧剂、光稳定剂系列产品：抗氧剂（IRGANOX）1010、抗氧剂1076、抗氧剂168、抗氧剂1098、抗氧剂B215、抗氧剂B225、抗氧剂245、抗氧剂1024、光稳定剂2020、光稳定剂783、光稳定剂UV-770、紫外线吸收剂81、紫外线吸收剂UV-531、紫外线吸收剂234、紫外线吸收剂326、紫外线吸收剂328、紫外线吸收剂UV-P、光学增白剂UVITEX OB。

开口剂、顺爽剂系列：高纯油酸酰胺、高纯芥酸酰胺、硬脂酸酰胺、乙撑酸油酸酰胺、乙撑酸月桂酸酰胺、山嵛酸酰胺。

季胺盐表面活性剂系列:十二烷基三甲基氯化铵(99%)、十四烷基三甲基氯化铵(99%)、十六烷基三甲基氯化铵(99%)、十八烷基三甲基氯化铵(99%)、十二烷基三甲基溴化铵(99%)、十四烷基三甲基溴化铵(99%)、十六烷基三甲基溴化铵(99%)、十八烷基三甲基溴化铵(99%)、双十烷基二甲基氯化铵(99%)、甲基三辛基氯化铵(99%)、三丁基甲基氯化铵(99%)、四丁基溴化铵、四甲基溴化铵。

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护肤品中需要注意的十种化学物质

第一， Sodium Lauryl Sulfate (SLS) or Sodium Laureth Sulfate (SLES)月桂基硫酸钠(SLS)或十二烷基硫酸钠(SLES)

月桂基硫酸钠有可能通过改变（消溶）蛋白质，妨碍正常的结构形成，从而阻碍年轻的眼睛正常发育。这种破坏是永久性的。还有其它研究表明，月桂基硫酸钠可能对免疫系统，尤其是皮肤有伤害。由于月桂基硫酸钠能改变蛋白质性质的特点，皮肤层可能分离并发炎。月桂基硫酸钠是护肤品产品成分中最危险的成分之一，研究指出“月桂基硫酸钠如果与其它化学物质结合，会转化成亚硝胺——这是一种能有效致癌的物质，它能让身体吸收更多的硝酸盐，比直接吃含有硝酸盐的食品还要有害。

第二， Polyethelene glycol (PEG) 聚乙二醇(PEG)

在清洁剂中使用聚乙二醇是为了溶解油脂，同时增加产品的粘度。PEG之后的数字代表的是它的分子量，不同的分子量会影响到聚乙二醇的性质。由于其效力显著，有腐蚀作用的烤箱清洁喷剂中常常使用聚乙二醇类，但是在许多肌肤护理产品中也能发现它们的存在。聚乙二醇类不仅有潜在的致癌作用，还能导致肌肤的天然滋润成分剥离，使免疫系统易受攻击。

第三， Propylene Glycol (PG) 丙二醇/ Butylene Glycol 丁二醇

丙二醇是“表面活性剂”，或湿润剂、溶解剂，是防冻液中一种主要成分。用于工业用途的丙二醇和用于肌肤护理产品的丙二醇是相同的。工业用丙二醇是为了分解蛋白质和细胞结构（这正是皮肤的组成成分），但是丙二醇却在几乎所有形式的彩妆、护发产品、乳液、刮须后护理品、除臭剂、漱口水、牙膏中都能找到，甚至在食品加工过程中也使用。由于丙二醇能够迅速渗透进入皮肤，EPA（美国环境保护署）要求所有在工作中接触丙二醇的工人戴手套、穿防护衣、佩戴护目镜。对丙二醇的进行的原料安全数据分析警告人们避免皮肤接触该物质，因为丙二醇能导致诸如大脑、肝脏和肾脏等全身组织的畸形和变异。但是，在丙二醇含量大大高于工业用途的产品中，像香体棒（身体除味产品）的标签上，甚至没有只字的警告。

第四， Alcohol (Isopropyl) 酒精（异丙基）

作为溶解剂和变性剂（能改变其他物质自然性质的一种有毒性的物质），酒精被广泛用于头发脱色剂、身体磨砂膏、洗手液、刮须后护理液、香味剂及其他多种化妆品中。酒精自石油中提取，用于防冻液，也在虫漆及淡化的精油中作为溶剂使用。根据《化妆品成份消费者指导手册》，摄取、吸入酒精的蒸发物会导致头疼、皮肤发红、头昏眼花、精神抑郁、恶心、呕吐、麻醉和昏迷。摄入一盎司的剂量就足以致命。

第五， Methyl Paraben, Propyl Paraben, Butyl Paraben, Ethyl Paraben 对羟基苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯

对微生物生长有抑制作用，可延长产品的存放时间。尽管其毒性广为人知，但还是有人使用。能引起许多过敏反应、皮疹。对羟基苯甲酸甲酯是安息酸和甲基类化学物的结合物，有剧毒。

第六， Fragrance/Parfum 合成香精

大多数除臭剂、香波、防晒霜、护肤品和婴儿产品含有合成香精。合成香精中的许多合成物都有致癌作用或有毒。“标签上的合成香精代表着其由多达4000种独立成分组成，这些成分几乎全部是化学合成的。FDA（美国）食品及药物管理局接到报告的相关症状包括头疼、头昏眼花、皮疹、皮肤变色、剧烈咳嗽和呕吐，还有过敏性皮肤不适。” 医生的临床观察表明，合成香精会影响中枢神经系统，引起精神沮丧、多动、兴奋易怒、缺乏处理能力、以及其他行为变化。”（《居家安全》作者Debra Lynn Dadd）

第七， FD &C Color Pigments 合成色素

根据《化妆品成份消费者指导手册》：“……许多（色素）促发了皮肤敏感和不适……吸收（某些色素）会导致身体内氧损耗和引起死亡。” 在《居家安全》一书中，作者Debra Lynn Dadd指出：“色素被广泛应用于食品、药品和化妆品中……自煤焦油中提炼得来。关于色素的使用还存在争议，因为动物实验表明几乎所有的色素都有致癌作用。”

第八， Urea (imidazolidinyl) &DMDM Hydantoin尿素(咪唑烷基) &D.M.(氯化二苯胺胂)乙内酰脲

这两种成分只是许许多多能释放甲醛的防腐剂中的两种。据Amyo（肌觉缺失）门诊，甲醇能刺激呼吸系统，引起皮肤反应，促发心悸。接触甲醇可能导致关节疼痛、过敏、情绪沮丧、头疼、胸口疼痛、耳炎、慢性全身无力、头昏眼花、以及失眠。甲醇还能使咳嗽、感冒恶化，引发哮喘。其副作用还包括削弱免疫力、导致癌症。商店中销售的几乎所有品牌护肤品、身体和护发用品、防汗用品、指甲油中，能释放甲醇的成分比比皆是。

第九， Tea (Triethanolamine) -Lauryl Sulfate 三乙醇胺月桂基硫酸钠

通常用于化妆品中来调节酸碱值，与多种脂肪酸一起使用，把酸转化为盐（硬脂酸盐），是制成清洁剂的基础。三乙醇胺/三胫乙基胺能引起包括眼睛不适、 头发/皮肤干燥在内的多种过敏反应，如果长期吸入体内，会产生中毒。

这些化合物由于其广为人知的致癌作用，在欧洲已经被禁用。依利诺伊大学环境健康学教授Dr. Samuel Epstein博士说：“在肌肤上反复使用三乙醇胺类的清洁品，会使肝癌和肾癌的几率大大增加。”

第十， Mineral Oil 矿物油

许多肌肤护理产品中都使用矿物油（婴儿油是100%的矿物油），涂在肌肤上的矿物油就像一层塑料膜一样把肌肤紧紧包涂，扰乱了肌肤天然的免疫屏障，使肌肤不能通畅呼吸、吸收天然滋润分子（湿润和营养分子）。肌肤是人体最大的排泄器官，保持其通畅、使其能释放出毒素至关重要。但是矿物油阻碍了该过程，使毒素堆积，会造成痤疮和其它紊乱。矿物油还会减缓皮肤运行功能，影响正常的细胞生长，造成肌肤的提早老化。

zif8产量和制备材料有关。

将2-甲基咪唑(2-mi)的甲醇溶液缓慢沉积至氢氧化锌的氨水溶液中，几天后逐渐得到了无色多面体晶体，命名为zif-8。上述方法虽然可以获得zif-8材料，但是制备效率比较低。

因此，为了更加高效地合成zif-8材料，人们通过改变溶剂种类、添加模板剂或表面活性剂、控制反应温度等因素来优化zif-8材料的制备条件。目前，制备zif-8材料所常用的溶剂有水、氨水、甲醇、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)等，常用的模板剂或表面活性剂有乙醇胺、二乙胺、l-组氨酸、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、十六烷基三甲基溴化铵等。

1、金属离子置换修饰：定义：通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法。常用于酶分子修饰的是二价金属离子，如：Ca2+，Mg2+，Mn2+，Zn2+，Co2+，Cu2+，Fe2+等。

2、大分子结合修饰：定义：利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生精细改变，从而改变酶的特性与功能的方法。常用修饰剂：右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等。使用前一般需经过活化，然后在一定条件下与酶分子共价结合。

3、酶侧链水解修饰(肽链有限水解修饰)：定义：有些酶的肽链经有限水解，使酶的空间结构发生某些精细改变，从而改变酶的特性和功能的方法。酶蛋白主链修饰主要是靠酶切/酶原激活法。方法有：（1)加常用修饰剂：专一性较强的蛋白酶或肽酶；（2）其他：如EDTA+纯水或稀盐酸透析处理枯草杆菌中性蛋白酶，可使其部分水解。

4、酶分子的侧链基团修饰：定义：采用一定的方法（化学法）使酶蛋白的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。组成蛋白质的氨基酸残基上的功能团，侧链基团改变引起酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的特性和功能。常见被修饰的基团有：羧基、氨基、巯基、咪唑基、酚羟基、胍基、色氨酸吲哚基

修饰剂的要求

一般情况下，要求修饰剂具有较大分子量、有良好的水溶性和生物相容性，修饰后酶的半衰期长。

酶性质的了解

应熟悉酶的分子结构，活性部位，侧链集团。反应活性温度、PH等。

反应条件的选择

反应要在酶稳定的环境下进行，避免破坏酶的活性集团。控制酶分子与修饰剂的分子比例，反应温度，时长。确保酶的高结合率和高回收率。

化学物质与蛋白质的相互作用 化学物质与蛋白质的的沉淀作用 沉淀作用的类型 可逆沉淀 定义： 在温和条件下， 通过改变溶液的 pH 或电荷状况， 使蛋白质从胶体溶液中沉淀分离。 蛋白质在沉淀过程中， 结构和性质都没有发生变化， 在适当条件下， 可以重新溶解形成溶液， 所以这种沉淀又称为非变类型： 可逆沉淀是分离和纯化蛋白质的基本方法， 如等电点沉淀法、 盐析法和有机溶剂沉淀法等。 不可逆沉淀 定义： 在强烈沉淀条件下， 不仅破坏了 蛋白质胶体的溶液的稳定性， 而且也破坏了蛋白质的结构和性质， 产生的蛋白质沉淀不可能再溶解于水。 由于沉淀过程中发生了蛋白质结构和性质的变化， 所以又称为变性沉淀。 类型： 加热沉淀、 强酸碱沉淀、 重金属盐沉淀等 沉淀剂的类型 无机物沉淀 盐析 定义： 低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度， 此现象叫盐溶。 继续向蛋白质溶液中加入大量的中性盐（硫酸铵、 硫酸钠、 氯化钠） 使蛋白质沉淀析出的现象叫做盐析（水与离子的相互作用增加了蛋白质表面的疏水补丁的相互作用； 同时瓦解了 以电荷为基础的蛋白质分子之间的作用） 。 盐析方程： lgS=lgS0-KSI S0 -离子强度为零时的溶解度 S-蛋白质在某一离子强度溶液中的溶解度 KS -盐析常数 第一类： Mn2+、 Fe2+、 Co2+、 Ni2+、 Cu2+、 Zn2+、 Cd2+,能和蛋白质分子表面的羧基、氨基、 咪唑基、 胍基等侧链结合 第二类： Ca2+、 Ba2+、 Mg2+、 Pb2+、 能和蛋白质分子表面的羧基结合， 但不能和含氮化合物结合 金属离子沉淀法 第三类： Ag2+、 Hg2+、 Pb2+、 能和蛋白质分子表面的巯基等侧链相结合 优点： 在稀溶液中对蛋白质有较强的沉淀能力。 处理后残余的金属离子可以用离子交换树脂和螯合剂除去。 等电点沉淀 定义： 在低的离子强度下， 用无机或有机酸碱调 PH 至等电点， 使蛋白质所带静电荷为零， 能大大降低其溶解度。 （适用于巯水性较强的蛋白质。 ） 主要优点： 很多蛋白质的等电点都在偏酸范围内， 而无机酸通常较廉价， 并且某些酸， 如磷酸、 盐酸、 和硫酸的应用能为蛋白质食品所允许。 同时， 常可直接进行其他纯化操作， 无需将残余的酸除去。 主要缺点： 酸化时易使蛋白质失活， 这是由于蛋白质对于低 PH 比较敏感所致。 有机物沉淀 优点： 溶剂容易蒸发除去， 不会残留在成品中， 因此适用于制备食品蛋白质。 而且有机溶剂密度低， 与沉淀物密度差大， 便于离心分离。 原理： 加入有机溶剂于蛋白质溶液中产生多种效应， 这些效应结合起来使蛋白质沉淀。 主要效应是水活度的降低。 （最常用的溶剂是乙醇和丙酮） 有机溶剂 缺点： 容易使蛋白质变性失活， 且有机溶剂易燃、 易爆、 安全要求高。 酚类化合物 定义： 当蛋白质溶液 PH 小于其等电点时， 蛋白质颗粒带有正电荷， 容易与酚类化合物或有机酸酸根所带的负电荷发生作用生成不溶性盐而沉淀。 （这类化合物包括鞣酸、 苦味酸、 三氯乙酸、 磺酰水杨酸等） 聚合物沉淀 及有机酸沉淀 非离子型聚合物 定义： 许多非离子型聚合物， 包括聚乙二醇（PEG） 可用来进行选择性沉淀以纯化蛋白质。 聚合物的作用认为与有机溶剂相似， 能降低水化物， 使蛋白质沉淀。 PDE 的使用:低分子量的蛋白质沉淀加入大量 PDE， 反之亦然。 所用的 PDE 的浓度通常为 20%， 浓度再高，会使粘度增大， 造成沉淀的回收比较困难。 且其不必除去。 聚电解质沉淀法 定义： 有一些离子型多糖化合物可应用于沉淀食品蛋白质。 如羧甲基纤维素， 海藻酸盐、 果胶酸盐、 卡拉胶等。 原理： 主要作用力是静电引力。 （加入量不能太多， 否则会引起胶融作用而重新溶解。 ） 化学物质对蛋白质的稳定作用 蛋 白质 不可 逆失 活的 化学 因素 强酸和强碱： 强的无机酸碱以及有机酸碱都可以改变蛋白质的 pH,引起蛋白质表面必须基团的电离； 由于各氨基酸残基所带电荷的相互吸引或者相互排斥使蛋白质的空间结构发生较大变化， 造成蛋白质分子聚集， 导致不可逆失活； 在强酸、 强碱条件下， 肽键也容易发生断裂。 氧化剂： 各种氧化剂能够氧化芳香族侧链的氨基酸以及甲硫氨酸、 半胱氨酸、 和胱氨酸残基； 分子氧、 过氧化氢氧自由基等是最常见的氧化剂。 在生物体内， 蛋白质的失活主要是通过活性氧（羟基自由基、 超氧离子、 过氧化氢、 过氧化物等来完成的。 ） 去 污 剂 和 活性表面剂： 离子表面活性剂： 阴离子： 如 SDS(十二烷基硫酸钠)阳离子： 癸基三甲基氯化铵、 十六烷基三甲基氯化铵等， 对蛋白质的变形能力比阴离子弱。 非离子去污剂： 通常不能使蛋白质变性。 变性剂 脲和盐酸胍： 高浓度的脲（8~10mol/L） 和盐酸胍（6mol/L） 与蛋白质多肽链作用， 破坏蛋白质分子内维持其二级结构和高级结构的氢键， 引起蛋白质不可逆失活。 有机溶剂： 取代蛋白质表面的结合水， 并通过疏水作用与蛋白质结合， 改变溶液的介电常数， 从而影响维持蛋白质天然构想的非共价力的平衡。 螯合剂： EDTA 与金属离子形成配位聚合物， 从而使酶失去金属辅助因子， 从而导致酶或者蛋白质的构想发生较大的改变， 导致蛋白质不可逆失活。 重 金 属 离 子和巯基试剂 重金属离子： （如 Hg2+、 Cd2+、 Pb2+等） 能与能与蛋白质分子中的半胱氨酸的巯基、 组氨酸的咪唑基、 色氨酸的吲哚基反应， 使蛋白质不可逆失活。 巯基试剂： （如巯基乙醇） 通过还原蛋白质分子内的二硫键使蛋白质失活（一般可逆） 。 低分子量的含二硫键的试剂可以与蛋白质分子中的的巯基作用， 使蛋白质失活。 蛋白质的稳定 常 用 方法：固化法： 将酶或者蛋白质多点连接于载体上。 添加剂： 保护蛋白质不受氧化剂氧化， 不受变性剂变性 化学修饰： 共价交联， 使蛋白质构想固化。 添加剂 共溶剂： 糖类、 醇、 氨基酸及其衍生物、 无机盐、 甘油、 多聚物（如聚乙二醇） 等被称为蛋白质共溶剂。 其改变溶液的热力学性质， 在蛋白质表面完全水化和共溶剂完全结合之间建立平衡， 使天然蛋白质稳定性增强， 理论上成为优先排阻作用。 抗氧化剂和还原剂： 蛋白质表面的半胱氨酸极容易被空气中的氧缓慢氧化而变成次磺酸或者二硫化物， 从而使蛋白质的电荷或者形状发生改变而失活。 （加入一些巯基试剂或者植物蛋白质课防止这种氧化。 ） 底物、 辅酶： 一些酶可以被底物、 辅酶或者竞争性抑制剂及反应产物所稳定。 其可能是降低活性中心的能量水平， 使酶趋于稳定。 金属离子： 如 Ca2+的存在可以稳定枯草杆菌蛋白酶、 灰色链丝菌蛋白酶和胰蛋白酶等， Ca2+与这些蛋白质的结合相当于与底物结合。 重金属离子可能引起酶活性抑制。 都具有长链疏水尾 和 亲水的 极性头 具有两个反应活性部位的双功能基团 同行双功能试剂： 两端具有相同的活性反应基团， 如 N-羟基琥珀酰亚胺酯， 二硝基氟苯、 双亚胺基酯等对氨基有专一性， 戊二醛也可与羟基反应。 异性双功能交联剂： 一端与氨基作用， 另一端与巯基作用（用碳二亚胺做交联剂， 第二个反应基团是羧基） 。 可被光活化的交联剂： 一端先于蛋白质反应， 经光照后， 另一端再产生一个活性基团， 如碳烯或者氮烯， 他们具有较高反应性，没有专一性。 可裂解型交联剂: 不可裂解型交联剂 化学交联剂 化学物质对蛋白质侧链基团的共价修饰作用外源化合物与生物大分子相互作用主要两个方式 共价结合： 当外源化合物的活性代谢产物与细胞内重要生物大分子共价结合时， 发生烷基化或芳基化，导致 DNA 损伤， 蛋白质正常功能丧失， 乃至细胞的损伤和死亡。 非共价结合 生物体内蛋白质加合物的形成 可与蛋白质发生反应的化合物（课本 148 页表格） ： 除少数烷化剂外， 绝大多数外源化合物需经体内代谢活化， 转为亲电子的活性代谢物再与细胞内生物大分子的亲核部位和基团发生共价结合。 蛋白质分子中的可反应基团： 氨基酸分子中的氨基和羧基、 丝氨酸和苏氨酸特有的羟基、 半胱氨酸分子中的巯基， 精氨酸分子中的胍基、 组氨酸分子中的咪唑基、 酪氨酸分子内中的酚基、 色氨酸分子中的吲哚基。 这些部位与源化合物发生共价结合， 会影响蛋白质的结构和功能。 与蛋白质的共价结合： 白蛋白是血液和组织间质中的主要蛋白质， 也是脂肪酸、 内源性（生物体内存在） 化合物及外源性（非生物体内存在） 化合物运输的主要载体， 容易与终致癌物结合形成共价加合物。 与血红蛋白共价结合： 外援化合物进入血液后， 可与红细胞膜结合而进入红细胞内与血红蛋白发生共价结合。 与细胞内蛋白质发生共价结合： 进入体内的外源化合物或其代谢产物可与浆胞、 质膜以及细胞核内的蛋白质发生共价结合形成加合物。 （如溴苯一种重要的肝脏毒物） ； 有些非遗传毒性致癌物与浆胞蛋白或者核蛋白共价结合， 对细胞造成不利影响。 特定的氨基酸残基侧链基团的修饰 蛋白质侧链基团的修饰是通过选择性的试剂或亲和标记试剂与蛋白质分子侧链上特定的功能基团发生化合反应来实现的。 修饰试剂的作用不专一， 不但与蛋白质必须基团作用， 也和非必须基团作用。 巯基化学修饰 烷基化试剂是一种重要的巯基修饰试剂， 尤其是碘乙酸和碘乙酰胺， 可用于多肽链氨基酸顺序分析过程中防止半胱氨酸的氧化。 N-乙基马来酰亚胺： 有较强的专一性， 伴随光变化， 容易通过光吸收变化确定反应程度。 5,5`-二硫-2-硝基苯甲酸（DTNB） ： 又称 Ellman 试剂， 最常用的巯基修饰试剂， 可通过光吸收变化确定反应程度 有机汞试剂： 最常用对氯汞苯甲酸， 溶于水中形成羟基衍生物， 与巯基相互作用时在 255nm 处光吸收具有较大的增强效应。 氨基化学修饰： 赖氨酸残基可被选择性修饰， 三硝基苯磺酸（TNBS） 与赖氨酸残基发生反应， 在 420nm 处和 367nm 处有光吸收 羧基化学修饰： 水溶性的碳化二亚胺类化学物可修饰蛋白质分子中的羧基基团 咪唑基的化学修饰： 组氨酸残基的咪唑基课通过氮原子的烷基化或碳原子的亲核取代来修饰， 常用焦炭酸（DPC） 二乙脂来修饰 酚和脂肪族羟基的化学修饰： 四硝基甲烷(TNM)可用于修饰络氨酸残基， 产生离子化的发色基团——3-硝基络氨酸衍生物。 胍基的化学修饰： 苯乙二醛： 两分子苯乙二醛与一份子精氨酸残基不可逆结合。 精氨酸残旧修饰试剂（如 4-羟基-3-硝基苯乙二醛） 可使被修饰的精氨酸残基在 405nm 处具有光吸收。 对硝基苯乙二醛修饰精氨酸残基可以得到唯一产物。 亲和性标记： 对于底物或者配体的结合部位具有一定亲和性， 因而能够结合选择性的结合在蛋白质的表面上的特定部位； 由于它们的化合反应性， 这类类似物能够与蛋白质分子共价结合； 这类反应试剂具有饱和性， 与底物或者天然配体竞争蛋白质的结合位点。 主要有光亲和标记和自杀性抑制剂两种类型， 自杀性抑制剂作为底物没有反应活性。 丁二酮和 1,2-环己二酮与胍基反应可逆生成精氨酸-丁二酮复合物， 该物与硼酸结合稳定。 蛋白质光谱探针 蛋白质吸光探针 金属探针 双缩脲法： 双缩脲与碱性溶液中与二价铜离子生成紫红色化合物， 具有 2 个和 2 个以上化合物都具有双缩脲反应， 紫红色化合物可在 540nm 处测量吸光度 Folin-Lowry 法： Lowry 等将双缩脲试剂和 Folin 酚试剂结合使用， 在蛋白质发生双缩脲反应之后， 再和 Folin 酚试剂反应， 此试剂在碱性条件下被蛋白质中络氨酸的酚基还原， 生成颜色更深的化合物， 可在 640nm 处测量。 双辛可宁酸法（BCA 法） ： 在碱性条件下， 蛋白质分子中的肽键与铜离子反应生成 Cu（I） 、 Cu(I)再与 BCA 反应形成紫色络合物， 在 565nm 测量吸光度。 染料探针 原理： 利用蛋白质和染料结合成沉淀或者改变结合燃料的光吸收特性， 借助燃料颜色的颜色的减退或减退变化的程度来测定蛋白质的含量。 溴酚蓝： 该试剂颜色对比度为 160nm， 反应在 pH3.2 左右进行， 在 600nm 测量吸光度。 溴甲酚绿： 对比度约为 170nm， 反应在 pH4.2 进行， 628nm 测量吸光度。 考马斯亮蓝： 在酸性条件下， 考马斯亮蓝与蛋白质结合。 其吸收高峰从 465nm 移至 595nm， 颜色由棕黄色转为深蓝色 蛋白质荧光探针 蛋白质光散射探针 蛋白质分子中存在络氨酸、 色氨酸、 苯丙氨酸残基， 能够吸收 270~300nm 的紫外光而发出紫外荧光。 小分子配体能与蛋白质发生相互作用， 导致蛋白质荧光的淬灭， 利用小分子配体对蛋白质内源性荧光的淬灭这一现象可以确定蛋白质与小分子配体的作用类型及结合部位。 作为一个好的荧光探针满足的条件 1.探针分子与蛋白质分子的某一微区必须有特异性的结合， 并且结合比较牢固； 2.探针的荧光必须对环境条件敏感 3.蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。