提取光合色素研磨是为了
提取叶绿体中色素时,要迅速、充分研磨是为了研碎细胞保证色素溶出,迅速是为了减少溶剂蒸发,丙酮挥发性较强,,塞紧试管口也是因为挥发性。丙酮有一定毒性,还是少接触为好,但是在一般的化学实验室丙酮是大量使用的普通溶剂。
简而言之就是,第一:防止丙酮挥发;第二:防止氧化。
1.材料:
新鲜的绿色叶片(如菠菜叶,南方学校也可尝试用朱槿叶)
2.用具
:定性滤纸,棉塞,试管,试管架,研钵,玻璃漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,药勺,天平,10
ml量筒。
3.试剂及其他药品:
无水乙醇,层析液,二氧化硅,碳酸钙。
【实验原理
】
光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中,可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
光合色素可溶于层析液中,不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样,最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
目前在高中阶段应该只有光合色素提取中有用到无水乙醇,其余实验中75%的乙醇都是消毒用
分离不需要无水乙醇,研磨过后植物细胞膜破裂自然会出来,只不过我们要提取叶绿体中的光合色素不能用水来当溶剂(溶解度太小),用有机溶剂能更好的提取色素(相似相溶),用无水乙醇或者乙醚都行的
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叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。
提取步骤如下:
(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。
(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。
(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。
(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。
(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。
(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。
(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。
(8)将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。
扩展资料:
叶绿素的分离
色谱法是一种很好的分离纯化、鉴定有机化合物的重要方法,尤其是在微量分析中应用的更是广泛。果蔬中色素主要包括脂溶性的胡萝卜素、叶黄素、叶绿素和水溶性的花青素。
在提取实验时,我们可以利用相似相溶的原理把水溶性的花青素滤掉,继而可以利用薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素进行分离。
由于这三种色素的极性依次减弱,可以适当地选择单一的有机溶剂或者不同配比的混合溶剂作为展开剂和洗脱剂,确定最佳的优化分离条件。
叶绿素-百度百科
分离光合色素的试剂:用层析液分离。用有机溶剂无水乙醇,或95%乙醇溶液,还可以用乙醚,丙酮代替。
分离光合色素的原理:不同的色素在有机物中溶解度不同,因此移动速率不一样。
溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样,最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
扩展资料
在光合作用中参与吸收、传递光能或引起原初光化学反应的色素。光合色素主要有三大类:叶绿素(包括细菌叶绿素)、类胡萝卜素和藻胆素(右图)。
类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)和藻胆素等是对叶绿素捕获光能的补充,称为辅助色素。这些光合色素的一个共同的特点就是存在较长的共轭体系(有些是环形封闭的,有些是线性的),因此可以参与能量传递 。
高等植物和大部分藻类的光合色素是叶绿素a,b和类胡萝卜素在许多藻类中除叶绿素a,b外,还有叶绿素c,d和藻胆素,如藻红素和藻蓝素;在光合细菌中是细菌叶绿素等;在嗜盐菌中则是一种类似视紫质的色素11-顺-视黄醛(11-cis-retinal)。
参考资料来源:百度百科-光合色素
层析液(石油醚):是一种脂溶性很强的有机溶剂。(作用:溶解并分离色素)
把叶绿体中的色素溶解到丙酮里,这个液体就叫滤液。叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类色素。
提取叶绿素为什么要用丙酮叶绿体中的两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,所以可以用丙酮或无水乙醇等有机溶剂提取色素。但丙酮有一定毒性,所以最好的实验试剂是无水乙醇(水的含量越低越好)。叶绿素是脂溶性色素,一般只要是有机溶剂都可以提取。但根据叶绿素的极性,最好的还是丙酮,其次是氯仿,正己烷,甲醇和乙醇。丙酮是常用的溶剂中对叶绿素溶解度最大的溶剂,最小的则是乙醇。丙酮在常温下通过振荡就可以完全提取叶绿素,而乙醇的话你就必须要加热,或者是加入四分之一体积的醋酸才能达到这个效果。
而无水乙醇是不含有水的,这样就是说用无水乙醇就可以有效的提取色素,并且不会使其分解.