为什么用乙酸铵作流动相(高效液相色谱法测食品中的糖
乙酸铵可以和乙腈甲醇等常见的流动相互溶,水溶液偏中性,缓冲能力较强,有利于分析不同pH值的化合物,实际上使用磷酸盐缓冲液也是可以的,虽然方法里推荐用乙酸铵,但方法通常不会强制要求,只要使用其他流动相的分析性能达到方法的要求也是可以的。
乙酸铵水做流动相容易堵塞柱子。
柱子是建筑物中用以支承栋梁桁架的长条形构件,工程结构中主要承受压力,有时也同时承受弯矩的竖向杆件,用以支撑梁桁架楼板等。
乙酸铵水介绍
又称醋酸铵是一种有机化合物,是一种有乙酸气味的白色晶体可作为分析试剂和肉类防腐剂其具有吸水性易潮解,因此乙酸铵需要干燥保存,取用时应在干燥的环境中进行,在水溶液中会发生微弱水解,并且生成的两种产物对于水解是相互促进的,用作分析试剂肉类防腐剂,也用作制药等,还可以作为缓冲剂和提供乙酸根配体。
如果不加缓冲盐前提下,峰型、保留时间(分离度)等参数没问题,可以不加。
环合:形成新的碳环或杂环的反应过程,也称闭环缩合或成环缩合。环合一般形成芳香族的六元碳环以及五元和六元杂环,因为这些环比较稳定,而且容易生成。
大多数环合过程是先由两个反应物分子在适当位置发生缩合反应而连接成一个分子,但此时还没有形成新环,然后在这个分子内部的适当位置再环合形成新环。为了以经济合理的方式,形成预期的环状结构,两个反应物须在分子中的适当位置有反应性基团,而且价廉易得。
作为缓冲液,必须考虑的是离子强度、pH和缓冲能力。比如一般调酸性缓冲液(质谱分析化合物正离子模式多,且反相色谱多用酸性流动相),为甲酸溶液、乙酸溶液、甲酸铵-甲酸溶液、乙酸铵-乙酸溶液,虽然文献中常可见使用甲酸或乙酸作为缓冲液,但是由于其离子强度与pH呈正相关,所以在确定的pH值条件下无法进行离子强度的变化的调整,所以在建立色谱条件时并不方便。而甲酸铵-甲酸溶液、乙酸铵-乙酸溶液可以在确定的离子强度条件下调节不同的pH值,或者在相同pH值上调节不同离子强度,所以优化起来更方便。
当然,在pH为3.5-5时,相同浓度的乙酸铵-乙酸溶液比甲酸铵-甲酸溶液缓冲能力强,但其很难调到pH3.5以下,而甲酸铵-甲酸溶液在pH3-3.5缓冲能力不错。另,甲酸溶液和乙酸溶液可能更合适一些极值的pH条件,并可加入可挥发的强酸来达到那些极值条件并具备一定的缓冲能力。
液质流动相的选择方法:
1、流动性主要看结构,极性大小,溶解性,对酸碱的敏感性等等。 大体上有机相是乙腈,甲醇,水相是甲酸水,乙酸水,甲醇水或者加点乙酸铵等。
2、再看化合物质谱条件是(+),则水相可加甲酸,乙酸,一般0.1%,也可以0.2%,可以是条件,原则是能浓度低就不要浓度高,(-),不要用酸,会有抑制。
3、液相分离效果,可以用不同的有机相:水相比例,是分离效果好就可以。
4、观察uv最佳吸收是多少?若离200nm很近,建议有机相用乙腈。
5、重要的是,水相不加任何物质就可楚风很好,建议不要加其他的。
6、液质联用所用的流动相,不能用不挥发性的物质,如:磷酸盐缓冲液等,常用甲酸盐,乙酸盐等易挥发的物质用作缓冲盐的首选。 在做液质联用测定生物样品时,若选择M H峰可在流动相中加入一些添加剂提供H离子,如甲酸等,一般准分子离子峰较稳定。
7、液质联用的流动相要求使用挥发性的酸碱盐,常用的如下: 酸---甲酸、乙酸(<2.0%),三氟醋酸(≤0.5%) 碱---甲胺、乙胺、三乙胺(<1.0%) 盐---醋酸铵(10-5mmol/L)。