乙酸铵提升峰型原理

液相色谱怎样改善分离度 乙酸铵

用乙酸铵作流动相离子抑制色谱，可做抑制剂，可以防止被分离物质峰异常影响定量。 乙酸铵，结构简式CH3COONH4，又称醋酸铵。白色三角晶体，分析试剂、肉类防腐剂。 用作分析试剂、肉类防腐剂，也用作制药等。还可以作为缓冲剂和提供乙酸根配体。加入改良剂可以大大改善峰形，提高积分准确度，这里乙酸铵的作用也就是改良剂的作用，可以减少次级保留，改善峰形。

两种物质在乙腈和水的流动相中不能分离，加缓冲液会不会有效果

液质流动相选甲醇和水体系是因为对于液相色谱而言，物质的分离是基于被测物在流动相和固定相间的分配比不同而获得的，不管是不是中性物质，只要它们在两相间的分配比不同就可以分离。而流动相的改变也不过是为了获取这个分配比的差异而已。

液质流动相的选择方法：

1、流动性主要看结构，极性大小，溶解性，对酸碱的敏感性等等。

大体上有机相是乙腈，甲醇，水相是甲酸水，乙酸水，甲醇水或者加点乙酸铵等。

2、再看化合物质谱条件是（+），则水相可加甲酸，乙酸，一般0.1%，也可以0.2%，可以是条件，原则是能浓度低就不要浓度高，（-），不要用酸，会有抑制。

3、液相分离效果，可以用不同的有机相：水相比例，是分离效果好就可以。

4、观察uv最佳吸收是多少？若离200nm很近，建议有机相用乙腈。

5、重要的是，水相不加任何物质就可楚风很好，建议不要加其他的。

6、液质联用所用的流动相，不能用不挥发性的物质，如：磷酸盐缓冲液等，常用甲酸盐，乙酸盐等易挥发的物质用作缓冲盐的首选。

在做液质联用测定生物样品时，若选择M

H峰可在流动相中加入一些添加剂提供H离子，如甲酸等，一般准分子离子峰较稳定。

7、液质联用的流动相要求使用挥发性的酸碱盐，常用的如下：

酸---甲酸、乙酸（＜2.0%），三氟醋酸（≤0.5%）

碱---甲胺、乙胺、三乙胺（＜1.0%）

盐---醋酸铵（10-5mmol/L）。

一般用0.01%-0.5%乙酸铵溶液都可以，0.01g-0.5g到100ml超纯水中，用冰醋酸调节PH至4.0。

乙酸铵（ammonium acetate），又称醋酸铵，是一种有机化合物，结构简式为CH3COONH4，分子量为77.082，是一种有乙酸气味的白色晶体，可作为分析试剂和肉类防腐剂。其具有吸水性，易潮解，因此乙酸铵需要干燥保存，取用时应在干燥的环境中进行。

作为缓冲液，必须考虑的是离子强度、pH和缓冲能力。比如一般调酸性缓冲液（质谱分析化合物正离子模式多，且反相色谱多用酸性流动相），为甲酸溶液、乙酸溶液、甲酸铵-甲酸溶液、乙酸铵-乙酸溶液，虽然文献中常可见使用甲酸或乙酸作为缓冲液，但是由于其离子强度与pH呈正相关，所以在确定的pH值条件下无法进行离子强度的变化的调整，所以在建立色谱条件时并不方便。而甲酸铵-甲酸溶液、乙酸铵-乙酸溶液可以在确定的离子强度条件下调节不同的pH值，或者在相同pH值上调节不同离子强度，所以优化起来更方便。

当然，在pH为3.5-5时，相同浓度的乙酸铵-乙酸溶液比甲酸铵-甲酸溶液缓冲能力强，但其很难调到pH3.5以下，而甲酸铵-甲酸溶液在pH3-3.5缓冲能力不错。另，甲酸溶液和乙酸溶液可能更合适一些极值的pH条件，并可加入可挥发的强酸来达到那些极值条件并具备一定的缓冲能力。