亚硫酸水在产品加工中的作用

因为用亚硫酸水溶液洗过之后，可以清除掉表面没有染进去的色素，就没那么容易掉色了。

亚硫酸具有漂白性，原因为二氧化硫冗余水生成亚硫酸根，亚硫酸根参与反应，诸多实验现象证明了不稳定物质是品红与亚硫酸发生加成反应。

并再脱去一分子水得到的产物，加热条件下又水解成品红和硫酸，硫酸水解成二氧化硫和水，故是二氧化硫溶解在水中生成的亚硫酸具有漂白性。

实验目的

了解Feulgen反应的原理，掌握有关的操作方法。

实验原理

DNA可在酸性条件下水解，嘌呤—脱氧核糖之间的糖苷键断开，形成醛基(—CHO)，再用显示醛基的特异性试剂Schiff试剂处理，形成光镜下所见的细胞核内紫红色反应产物。DNA 经稀盐酸处理而水解。除可破坏脱氧核糖与嘌呤碱外，还可水解嘧啶碱。酸水解核酸的程度与 水解时间长短有关，随着水解时间的延长，嘌呤碱基增多，形成的醛基也随之增多，Feulgen反应加强。如果水解时间过长，DNA将完全水解，反而使Feulgen反应减弱。DNA水解时间因组织种类和固定液不同而异，需通过预实验找到合适的水解温度和时间。由于Schiff试剂能与醛基结合，故不能用含醛的固定液固定组织，常用Carnoy固定液。Bouin液不适用于Feulgen反应，因为固定液中含较多的酸，可将DNA水解，影响染色反应。

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Schiff试剂是显示醛基的特异试剂，其反应原理是碱性品红(为红紫色)经亚硫酸处理后变为五色Schiff液，Schiff液遇到醛基时，则被还原形成原有的颜色，即红紫色。碱性品红结构中的醌基是碱性品红中具有紫红色的核心结构，经亚硫酸处理后，则醌基两端的双键打开，形成五色品ii-硫酸复合物为Schiff试剂。如果加热使SO2逸出，则恢复品红原来的颜色而失去对DNA的染色效果，故配好的Schiff试剂应避免SO2逸出。

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Feulgen反应原理

实验仪器、材料及试剂

（一） 仪器、用具

显微镜、恒温水浴箱、温度计、解剖针、酒精灯、试管、烧杯、载玻片、盖玻片、吸水纸。

（二 ）材料

洋葱鳞茎（见图2－1）或根尖（见图2－2）

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（三）试剂

1．1MHCl的配制

取82.5ml比重1.19的浓HCl加蒸馏水至1000ml 。

2．Schiff试剂的配制及保存

称取0.5g碱性品红加入到100ml煮沸的蒸馏水中（用三角烧瓶），时时振荡，继续煮 5分钟（勿使之沸腾），使之充分溶解。然后冷却至50℃时用滤纸过滤，滤液中加入10ml 1MHCl，冷却至25℃时，加入0.5g Na2S2O5（偏重亚硫酸钠或钾），充分振荡后，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24小时（有时需2～3天），使其颜色退至淡黄色，然后加入0.5g活性炭，用力振荡1分钟，最后用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封严瓶塞，外包黑纸。滤液应为无色也无沉淀，贮于4℃冰箱中备用。如有白色沉淀，就不能再使用，如颜色变红，可加入少许偏重亚硫酸钠或钾，使之再转变为无色时，仍可再用。

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3．亚硫酸水

取200ml自来水，加10ml 10%偏重亚硫酸钠（或偏重亚硫酸钾）水溶液和10ml 1M HCl，三者于使用前混匀。

实验步骤

1．将洋葱根尖或鳞茎内表皮放在1M HCl中，加热到60℃水解8～10 min。

2．蒸馏水水洗。

3．Schiff试剂遮光染色30min。

4．用新鲜配制的亚硫酸水溶液洗3次，每次1min。

2、加入HCl 酸化（排除其他酸根离子干扰）

3、加入H2O2 使亚硫酸根氧化为硫酸根 （保证之后能有稳定的沉淀生成）

4、加入BaCl2 使硫酸根完全沉淀

5、过滤、烘干测定硫酸钡质量，再算出硫酸根含量，从而测出亚硫酸根含量(m)，再用测出的亚硫酸根含量（mol）与1中的溶液的总质量(m)可以算出溶液中亚硫酸的含量(%)